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脂质纳米粒递送靶向Cyp2e1基因的小干扰RNA可减轻小鼠亚急性酒精性肝损伤 被引量：1
1
作者 吴爽 陈秋冰 +2 位作者 王亚兰 殷昊 魏渊 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期306-317,共12页
目的:研究脂质纳米粒(LNP)递送靶向Cyp2e1基因的小干扰RNA(siRNA)减轻小鼠亚急性酒精性肝损伤的作用及机制。方法:通过微流控技术将靶向Cyp2e1基因的siRNA封装在LNP中得si-Cyp2e1 LNP,并进行表征。筛选si-Cyp2e1 LNP给药的最佳剂量,将40... 目的:研究脂质纳米粒(LNP)递送靶向Cyp2e1基因的小干扰RNA(siRNA)减轻小鼠亚急性酒精性肝损伤的作用及机制。方法:通过微流控技术将靶向Cyp2e1基因的siRNA封装在LNP中得si-Cyp2e1 LNP,并进行表征。筛选si-Cyp2e1 LNP给药的最佳剂量,将40只C57BL/6N雌鼠随机分为空白对照组、模型对照组、si-Cyp2e1 LNP组、LNP对照组和美他多辛组,经10 d的乙醇喂养及最后3 d的乙醇灌胃处理,构建亚急性酒精性肝损伤小鼠模型。测定各组血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性,肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛、活性氧、谷胱甘肽、三酰甘油和总胆固醇含量,计算肝脏指数;光学显微镜观察小鼠肝组织病理学变化。实时逆转录聚合酶链反应检测各组小鼠体内氧化应激、脂质合成和炎症相关基因表达的变化情况。结果:与模型对照组比较,si-Cyp2e1 LNP组肝脏指数降低,血清ALT、AST活性降低,肝组织丙二醛、活性氧、三酰甘油和总胆固醇含量下降,SOD活性升高,谷胱甘肽含量增加(均P<0.01)。苏木精-伊红染色结果显示模型对照组肝细胞排列紊乱,细胞质稀疏,有大量的脂肪空泡和坏死,而si-Cyp2e1 LNP组肝细胞大小均匀,排列整齐,肝组织形态结构正常;油红O染色结果显示si-Cyp2e1 LNP组相比模型对照组肝脏脂肪含量减少,未见脂肪滴积聚;抗F4/80单克隆抗体荧光免疫组织化学结果显示si-Cyp2e1LNP组相比模型对照组累积光密度比值降低(P<0.01),无明显炎症反应。与模型对照组比较,si-Cyp2e1 LNP组活性氧形成相关催化基因P47phox、P67phox和Gp91phox的表达减少(均P<0.01),而抗氧化酶相关基因Sod1、Gsh-rd和Gsh-px的表达增加(均P<0.01);脂质代谢相关基因Pgc-1α、Cpt1的mRNA表达增加(均P<0.01),脂质合成相关基因Srebp1c、Acc和Fasn的mRNA表达减少(均P<0.01);肝脏炎症相关基因Tgf-β、Tnf-α和Il-6的表达减少(均P<0.01)。结论:si-Cyp2e1 LNP� 展开更多
关键词 亚急性酒精性肝损伤 小干扰RNA 脂质纳米粒 氧化应激 脂质代谢合成 炎症 小鼠
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