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异丹叶大黄素下调膀胱癌细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制研究 被引量：5
1
作者 方勇 王章桂 +1 位作者 侯琦 卢瑜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期53-60,共8页
目的:探索异丹叶大黄素(ISO)下调肿瘤细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3、RT12和RT4细胞后用Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达水平;以RTPCR法检测细胞周期蛋白D1 mRNA的表达水平。稳定... 目的:探索异丹叶大黄素(ISO)下调肿瘤细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3、RT12和RT4细胞后用Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达水平;以RTPCR法检测细胞周期蛋白D1 mRNA的表达水平。稳定转染细胞周期蛋白D1启动子萤光素酶报告基因至UMUC3细胞并筛选后,检测ISO预处理后萤光素酶活性。ISO预处理UMUC3细胞后,提取核蛋白检测核转录因子表达水平的变化。分别稳定转染GFP和GFP-细胞周期蛋白D1表达构建载体,筛选克隆;ISO预处理后,Western blotting法检测细胞周期蛋白D1的蛋白表达水平,贴壁依赖性细胞生长实验法检测细胞生长能力的变化,流式细胞术检测细胞周期的变化。分别稳定转染人源性细胞周期蛋白D1野生型和-163位点突变型萤光素酶报告基因质粒载体至UMUC3细胞并筛选,ISO预处理后检测细胞的萤光素酶活性。最后利用染色质免疫沉淀的方法,以抗Sp1抗体检测ISO对Sp1与细胞周期蛋白D1启动子结合力的影响。结果:ISO可从mRNA和蛋白水平显著抑制肿瘤细胞的细胞周期蛋白D1水平,并且是从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的转录。ISO可抑制、下调核转录因子Sp1的表达,并抑制Sp1与细胞周期蛋白D1启动子区域的结合力,该结合位点主要位于启动子-92到+27bp的5’-非翻译区。结论:ISO可通过下调Sp1核转录因子表达及其与细胞周期蛋白D1启动子的结合,从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的表达,从而诱导G0/G1细胞周期阻滞并抑制肿瘤细胞增殖。我们的研究将为临床中药单体ISO综合治疗肿瘤提供新的策略。 展开更多
关键词 异丹叶大黄素 膀胱癌 细胞周期蛋白D1 Sp1转录因子 细胞周期阻滞
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多巴胺D2胺体三维结构预测及与激动剂配体相互作用的研究
2
作者 朱七庆 郭宗儒 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 1998年第3期115-120,共6页
以细菌视紫红质（bacteriorhodopsin）的三维晶体结构为模板，预测了多巴胺D2受体跨膜区的七个α螺旋肽段的三维结构。根据定点突变实验数据以及预测的受体三维结构，确定了激动剂配体结合胺由Asp86,Ser141,Ser144等十十个氨基酸残基组... 以细菌视紫红质（bacteriorhodopsin）的三维晶体结构为模板，预测了多巴胺D2受体跨膜区的七个α螺旋肽段的三维结构。根据定点突变实验数据以及预测的受体三维结构，确定了激动剂配体结合胺由Asp86,Ser141,Ser144等十十个氨基酸残基组成。为了校正和检验所得的模型，分别以一组刚性、一组柔性的激动剂与受体对接（DOCK），分析－logIC50和结合能Eb相关性，较好的结果说明该模型是可靠的。 展开更多
关键词 多巴胺D2受体 三维结构 预测 对接 激动剂配体
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化合物LG-1的免疫增强作用研究
3
作者 杨红振 徐蒿 +3 位作者 李靖 白金叶 刘刚 程桂芳 《中国药理通讯》 2003年第3期48-48,共1页
关键词 免疫增强剂 LG-1 脾淋巴细胞 细胞增殖 流式细胞仪 MTT法 小鼠
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吲哚美辛和氢化可的松对小鼠腹腔巨噬细胞MMP—9活性的影响
4
作者 李怡棠 张成义 等 《中国药理学会通讯》 2000年第3期30-30,共1页
关键词 吲哚美辛 氢化可的松 巨噬细胞 MMP-9活性 动物实验
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