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双靶向配体化力达霉素DTLL的制备优化和稳定性研究
被引量:
2
1
作者
叶程
曹睿
+5 位作者
宋文凭
李良
李毅
赵春燕
李亮
邵荣光
《中国医药生物技术》
2018年第3期193-200,共8页
目的通过对具有高效抗肿瘤活性的类抗体偶联药物—--双靶向配体化力达霉素(DTLL)制备过程的优化,获得纯度高和活性强的DTLL产品;探讨影响DTLL稳定性的主要因素,为临床申报和工业化生产提供依据。方法分别对DTLL前体(DTLP)蛋白表达载体...
目的通过对具有高效抗肿瘤活性的类抗体偶联药物—--双靶向配体化力达霉素(DTLL)制备过程的优化,获得纯度高和活性强的DTLL产品;探讨影响DTLL稳定性的主要因素,为临床申报和工业化生产提供依据。方法分别对DTLL前体(DTLP)蛋白表达载体、宿主菌株、表达温度、诱导剂终浓度、菌体密度和诱导时间进行优化。以高压破碎法提取可溶性目的蛋白,采用Ni+亲和与分子筛层析两步纯化,得到高纯度DTLP,再与力达霉素发色团组装获得DTLL。采用HPLC、MTS、ELISA法进行稳定性试验,分别监测DTLL冻干样品的蛋白纯度、发色团含量、细胞毒和亲和力活性的变化。结果经过发酵提取工艺优化,每升发酵液所得DTLP蛋白约为22 mg,是优化前每升9 mg的2.4倍,其蛋白纯度达到99.7%;DTLL组装效率达到68%;稳定性试验结果显示,DTLL冻干样品对光照敏感,在–80℃低温避光环境下可稳定保存。结论成功优化了双靶向配体化力达霉素DTLL的制备工艺,提升了产品纯度和产率,为其后续生产和临床申报提供了实验基础,也为其他抗体偶联药物的制备提供了较成熟完善的技术平台。
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关键词
重组融合蛋白质类
蛋白质稳定性
制备工艺
配体化力达霉素
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职称材料
题名
双靶向配体化力达霉素DTLL的制备优化和稳定性研究
被引量:
2
1
作者
叶程
曹睿
宋文凭
李良
李毅
赵春燕
李亮
邵荣光
机构
中国医学科学院
北京
协和
医学院
医药
生物
技术
研究所
肿瘤
室
/
卫生部
抗生素
生物工程
重点
实验室
出处
《中国医药生物技术》
2018年第3期193-200,共8页
基金
国家科技重大专项(2014ZX09201042-002)
国家自然科学基金(81472787
+1 种基金
81321004)
中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目协同创新团队项目(2016-I2M-3-013)
文摘
目的通过对具有高效抗肿瘤活性的类抗体偶联药物—--双靶向配体化力达霉素(DTLL)制备过程的优化,获得纯度高和活性强的DTLL产品;探讨影响DTLL稳定性的主要因素,为临床申报和工业化生产提供依据。方法分别对DTLL前体(DTLP)蛋白表达载体、宿主菌株、表达温度、诱导剂终浓度、菌体密度和诱导时间进行优化。以高压破碎法提取可溶性目的蛋白,采用Ni+亲和与分子筛层析两步纯化,得到高纯度DTLP,再与力达霉素发色团组装获得DTLL。采用HPLC、MTS、ELISA法进行稳定性试验,分别监测DTLL冻干样品的蛋白纯度、发色团含量、细胞毒和亲和力活性的变化。结果经过发酵提取工艺优化,每升发酵液所得DTLP蛋白约为22 mg,是优化前每升9 mg的2.4倍,其蛋白纯度达到99.7%;DTLL组装效率达到68%;稳定性试验结果显示,DTLL冻干样品对光照敏感,在–80℃低温避光环境下可稳定保存。结论成功优化了双靶向配体化力达霉素DTLL的制备工艺,提升了产品纯度和产率,为其后续生产和临床申报提供了实验基础,也为其他抗体偶联药物的制备提供了较成熟完善的技术平台。
关键词
重组融合蛋白质类
蛋白质稳定性
制备工艺
配体化力达霉素
Keywords
Recombinant fusion proteins
Protein stability
Preparation
Dual targeted ligand-based lidamycin
分类号
TQ460.6 [化学工程—制药化工]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
双靶向配体化力达霉素DTLL的制备优化和稳定性研究
叶程
曹睿
宋文凭
李良
李毅
赵春燕
李亮
邵荣光
《中国医药生物技术》
2018
2
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职称材料
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