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恶性疟原虫类巨噬细胞迁移抑制因子基因的克隆和表达
被引量：
5
1
作者
韩志富
邵丁丁
王恒
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期515-518,共4页
目的克隆、表达恶性疟原虫的巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)同源基因Pfmif。方法参照人MIF基因(Humif)氨基酸序列在P.falciparum基因组中找到同源核苷酸序列,设计特异引物,采用RT-PCR方法从恶性疟原虫3D7株红内期RNA扩增获得Pfmif基因;利用...
目的克隆、表达恶性疟原虫的巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)同源基因Pfmif。方法参照人MIF基因(Humif)氨基酸序列在P.falciparum基因组中找到同源核苷酸序列,设计特异引物,采用RT-PCR方法从恶性疟原虫3D7株红内期RNA扩增获得Pfmif基因;利用生物信息学软件分析所扩增的基因;原核表达重组PfMIF蛋白,并亲和纯化。结果从恶性疟原虫RNA中扩增到Pfmif基因,长度为351bp,编码116个氨基酸,具有MIF家族蛋白的典型特征。成功的表达及纯化了融合有GST标签的重组PfMIF蛋白。结论获得来自恶性疟原虫的MIF同源基因,初步确定PfMIF是MIF家族的一个新成员。
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关键词
恶性疟原虫
巨噬细胞迁移抑制因子
基因克隆
原核表达
下载PDF
职称材料
伯氏疟原虫pbmag-1基因片段克隆及原核表达优化
2
作者
高宇辉
王恒
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期314-319,共6页
目的克隆并表达伯氏疟原虫pbmag-1基因cDNA片段。方法在GenBank中检索伯氏疟原虫编码基因pbmag-1部分cDNA序列,设计特异引物,经RT-PCR从伯氏疟原虫ANKA株扩增出该基因的部分cDNA片段。以锚定OligodT引物反转录mRNA获得的cDNA为模板,利...
目的克隆并表达伯氏疟原虫pbmag-1基因cDNA片段。方法在GenBank中检索伯氏疟原虫编码基因pbmag-1部分cDNA序列,设计特异引物,经RT-PCR从伯氏疟原虫ANKA株扩增出该基因的部分cDNA片段。以锚定OligodT引物反转录mRNA获得的cDNA为模板,利用已知序列设计特异引物,通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术延伸pbmag-13′端未知的编码序列,并将其克隆于原核表达载体后转入大肠埃希菌(E.coli)BL21-(DE3)-RIL株,经优化诱导条件,表达了重组蛋白PbMAg-1并用其免疫小鼠。结果获得1341bp具有完整3′末端序列的pbmag-1基因片段,其A/T含量为73%。以包涵体形式表达的重组蛋白免疫小鼠,其血清抗体经蛋白质印迹(Western blotting)分析,能特异性地识别伯氏疟原虫感染红细胞相对分子质量约为Mr64000的蛋白。结论获得重组蛋白PbMAg-1的3′端完整的pbmag-1基因cDNA片段,为研究伯氏疟原虫PbMAg-1蛋白在鼠疟免疫反应中的作用奠定了实验基础。
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关键词
pbmag-1
伯氏疟原虫
基因克隆
原核表达
下载PDF
职称材料
题名
恶性疟原虫类巨噬细胞迁移抑制因子基因的克隆和表达
被引量：
5
1
作者
韩志富
邵丁丁
王恒
机构
中国
医学
科学院
中国
协和
医科大学
基础医学
研究所
病原
系
分子
寄生虫
学
实验室
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期515-518,共4页
文摘
目的克隆、表达恶性疟原虫的巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)同源基因Pfmif。方法参照人MIF基因(Humif)氨基酸序列在P.falciparum基因组中找到同源核苷酸序列,设计特异引物,采用RT-PCR方法从恶性疟原虫3D7株红内期RNA扩增获得Pfmif基因;利用生物信息学软件分析所扩增的基因;原核表达重组PfMIF蛋白,并亲和纯化。结果从恶性疟原虫RNA中扩增到Pfmif基因,长度为351bp,编码116个氨基酸,具有MIF家族蛋白的典型特征。成功的表达及纯化了融合有GST标签的重组PfMIF蛋白。结论获得来自恶性疟原虫的MIF同源基因,初步确定PfMIF是MIF家族的一个新成员。
关键词
恶性疟原虫
巨噬细胞迁移抑制因子
基因克隆
原核表达
Keywords
P.falciparum
macrophage migration inhibitory factor
cloning
expression
分类号
R382.31 [医药卫生—医学寄生虫学]
R392.1 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
伯氏疟原虫pbmag-1基因片段克隆及原核表达优化
2
作者
高宇辉
王恒
机构
中国
医学
科学院
中国
协和
医科大学
基础医学
研究所
病原
系
分子
寄生虫
学
实验室
出处
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期314-319,共6页
基金
国家863高技术研究发展计划(No.2001AA215021
No.2004AA215232)~~
文摘
目的克隆并表达伯氏疟原虫pbmag-1基因cDNA片段。方法在GenBank中检索伯氏疟原虫编码基因pbmag-1部分cDNA序列,设计特异引物,经RT-PCR从伯氏疟原虫ANKA株扩增出该基因的部分cDNA片段。以锚定OligodT引物反转录mRNA获得的cDNA为模板,利用已知序列设计特异引物,通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术延伸pbmag-13′端未知的编码序列,并将其克隆于原核表达载体后转入大肠埃希菌(E.coli)BL21-(DE3)-RIL株,经优化诱导条件,表达了重组蛋白PbMAg-1并用其免疫小鼠。结果获得1341bp具有完整3′末端序列的pbmag-1基因片段,其A/T含量为73%。以包涵体形式表达的重组蛋白免疫小鼠,其血清抗体经蛋白质印迹(Western blotting)分析,能特异性地识别伯氏疟原虫感染红细胞相对分子质量约为Mr64000的蛋白。结论获得重组蛋白PbMAg-1的3′端完整的pbmag-1基因cDNA片段,为研究伯氏疟原虫PbMAg-1蛋白在鼠疟免疫反应中的作用奠定了实验基础。
关键词
pbmag-1
伯氏疟原虫
基因克隆
原核表达
Keywords
pbmag-1
Plasmodium berghei
Gene cloning
Prokaryotic expression
分类号
R382.314 [医药卫生—医学寄生虫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
恶性疟原虫类巨噬细胞迁移抑制因子基因的克隆和表达
韩志富
邵丁丁
王恒
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
5
下载PDF
职称材料
2
伯氏疟原虫pbmag-1基因片段克隆及原核表达优化
高宇辉
王恒
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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