植物雌激素研究进展 被引量：30

1

作者 孔令娜 左萍萍 《生殖医学杂志》 CAS 2003年第1期46-53,共8页

植物雌激素 ( phytoestrogen)是一类存在于植物中、与雌激素结构近似的生物活性物质。本文介绍了它们的来源和种类 ,对其在预防癌症、心血管疾病、骨质疏松以及改善妇女绝经期症状。

关键词 植物雌激素 肿瘤 心血管疾病 骨质疏松 绝经期症状 认知功能

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胆红素诱导神经细胞凋亡及对其线粒体膜电位的影响——胆红素对中枢神经细胞损伤机理的研究 被引量：20

2

作者 韩张 胡萍 倪道凤 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期243-246,T001,共5页

目的　观察胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡及对其线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)的影响 ,探讨高胆红素血症对中枢神经细胞损伤的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法　将胆红素 (0 0 2g/L)直接作用... 目的　观察胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡及对其线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)的影响 ,探讨高胆红素血症对中枢神经细胞损伤的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法　将胆红素 (0 0 2g/L)直接作用于体外培养的SH SY5Y细胞 ,在不同时间点通过倒置显微镜观察细胞形态的变化及存活情况 ;经Hoechst332 5 8染色后 ,在荧光显微镜下观察细胞核的形态变化 ;利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率 ;经罗丹明 12 3染色后 ,用流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化。结果　在 0 0 2g/L胆红素作用下 ,SH SY5Y细胞 2h后即可见较多细胞皱缩、变圆 ,4h可见有少数细胞飘起 ,细胞轮廓不清 ,6h可见大部分细胞飘起 ,并已开始崩解 ;染色质在胆红素作用 6h出现典型的凋亡样改变 ;细胞凋亡率随作用时间的延长明显增加 ,3h为 19 4 % ,4h为 76 4 % ,6h达到 79 0 % ;在胆红素作用 1h后反映线粒体膜电位相对荧光强度即由 (16 6± 1 5 5 6 )U下降到 (7 11± 0 70 1)U ,差异有显著性 (P <0 0 1) ,并随作用时间的延长而进一步降低。结论　胆红素作用早期即可导致SH SY5Y细胞线粒体膜电位下降 ,既而发生凋亡 ,提示通过诱导听觉中枢神经元凋亡可能在高胆红素血症所致的听力损伤和听神经病发病中起重要作? 展开更多

关键词 胆红素 脱噬作用 线粒体膜电位 MMP 神经母细胞瘤 听神经疾病 细胞凋亡

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小鼠脑内NO/NOS-cGMP信号系统与吗啡依赖形成的机制 被引量：16

3

作者 方芳 曹清 +2 位作者 宋福津 王艳红 刘景生 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期133-139,共7页

本文观察了吗啡依赖小鼠脑组织ｃＧＭＰ含量、钙依赖性及非钙依赖性ＮＯＳ活性的变化、蛋白激酶Ａ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＡ，ＰＫＡ）对ＮＯＳ活性的磷酸化调节以及一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂对吗啡依赖形成的影响。结果发现... 本文观察了吗啡依赖小鼠脑组织ｃＧＭＰ含量、钙依赖性及非钙依赖性ＮＯＳ活性的变化、蛋白激酶Ａ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＡ，ＰＫＡ）对ＮＯＳ活性的磷酸化调节以及一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂对吗啡依赖形成的影响。结果发现：（１）小脑、纹状体、海马及大脑皮质ｃＧＭＰ含量明显下降；（２）纹状体及大脑皮质钙依赖性ＮＯＳ活性明显升高，而ＩＰ２０（ＰＫＡ抑制剂）可抑制此变化，小脑及海马钙依赖性ＮＯＳ活性及以上各脑区非钙依赖性ＮＯＳ活性无明显变化；（３）纹状体、大脑皮质中与ＮＯＳ分子量相当的１５０ｋＤ蛋白质的体外磷酸化水平低于对照，ＩＰ２０可抑制此变化；（４）ＮＯＳ抑制剂可抑制小鼠对吗啡依赖的形成；（５）纳洛酮拮抗组小鼠未见上述变化。结果表明，吗啡依赖小鼠脑组织普遍存在ｃＧＭＰ水平下降，纹状体、大脑皮质钙依赖性ＮＯＳ活性的增加可能与吗啡依赖有关，且受ＰＫＡ对其磷酸化调节。ＮＯＳ活性增加与ｃＧＭＰ含量的下降相矛盾，提示ＮＯ／ＮＯＳ在吗啡依赖中的作用可能是通过一种不同于产生ｃＧＭＰ信号的机制进行的。 展开更多

关键词 吗啡依赖 一氧化氮合酶 CGMP 磷酸化

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NO-cGMP信号转导系统的上调参与阿片类药物耐受和戒断的生化机制 被引量：8

4

作者 臧梦维 孟爱民 +3 位作者 沈琦 汪青 郭菲 刘景生 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期566-570,共5页

目的　观察阿片激动剂长时程作用对NO cGMP信号转导系统的影响。方法　选用iNOScDNA稳定表达的NG LNCXiNOS细胞 ,采用NOS活性和cGMP放免测定 ,Western杂交和NADPH黄递酶组化染色技术。结果阿片类药物长时程作用剂量依赖性增高胞浆相iNO... 目的　观察阿片激动剂长时程作用对NO cGMP信号转导系统的影响。方法　选用iNOScDNA稳定表达的NG LNCXiNOS细胞 ,采用NOS活性和cGMP放免测定 ,Western杂交和NADPH黄递酶组化染色技术。结果阿片类药物长时程作用剂量依赖性增高胞浆相iNOS活性和胞内cGMP含量 ,药物作用强弱顺序是DPDPE >DADLE >吗啡 ,EC50 都在nmol·L-1数量级。用纳洛酮急性戒断阿片耐受细胞 ,造成酶活性和cGMP水平增加更显著。DPDPE长时程作用还引起iNOS基因表达增强和NADPH黄递酶染色阳性细胞增多。结论　提示NO cGMP信号转导系统上调可能是阿片耐受和成瘾的重要生化改变。 展开更多

关键词 Δ-阿片受体 阿片类依赖 NO-CGMP 信号转导

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短暂激活c-jun N-terminal激酶抑制胆红素诱导的SH-SY5Y细胞凋亡 被引量：2

5

作者 韩张 胡萍 倪道凤 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2002年第5期473-476,共4页

探讨c junN terminal激酶 (JNK)在胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡信号转导中的作用。我们用 30 0 μmol LH2 O2 预处理SH SY5Y细胞 1h以激活JNK ,与经PBS预处理的对照组比较 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞百分比由 (37 4±... 探讨c junN terminal激酶 (JNK)在胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡信号转导中的作用。我们用 30 0 μmol LH2 O2 预处理SH SY5Y细胞 1h以激活JNK ,与经PBS预处理的对照组比较 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞百分比由 (37 4± 3 2 ) %降低到 (12 6± 2 6 ) %。为了进一步证实JNK的作用 ,在SH SY5Y细胞经H2 O2 预处理前 ,先经 2 0 μmol LJNK c jun AP1抑制剂curcumin作用 12h以抑制H2 O2 对JNK的激活 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞增高到 (42 8± 4 4 ) % ,curcumin完全抑制了短暂激活JNK所提供的保护作用。结果表明短暂激活JNK可能在胆红素诱导的SH SY5Y细胞凋亡中提供抗凋亡信号 。 展开更多

关键词 细胞凋亡 胆红素 JNK 人神经母细胞瘤细胞

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苯并二氢吡喃衍生物抗骨质疏松活性的构效关系研究 被引量：5

6

作者 熊晓云 陈亚琼 +4 位作者 邹永 梅其炳 赵德化 孙兰3 刘景生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期518-521,共4页

目的　研究系列苯并二氢吡喃化合物的构效关系 ,为设计优良的绝经后骨质疏松症防治药物提供理论依据。方法　在综合考察雷洛昔芬和异丙氧基异黄酮的基础上 ,设计合成一系列苯并二氢吡喃化合物 ,从整体水平考察化合物A对去卵巢大鼠骨质... 目的　研究系列苯并二氢吡喃化合物的构效关系 ,为设计优良的绝经后骨质疏松症防治药物提供理论依据。方法　在综合考察雷洛昔芬和异丙氧基异黄酮的基础上 ,设计合成一系列苯并二氢吡喃化合物 ,从整体水平考察化合物A对去卵巢大鼠骨质疏松的影响 ,从细胞水平研究C单独给药以及与雌二醇联合给药对人成骨细胞株HOSTE85增殖的影响 ,并均在 0 1μmol·L-1水平考察比较化合物BE对HOSTE85增殖的影响。结果　化合物A可一定程度对抗去卵巢大鼠骨质疏松症。C( 1 0nmol·L-1,0 1μmol·L-1)对HOSTE85具有显著增殖作用 ,C与雌二醇联合给药显著拮抗雌二醇对HOSTE85的增殖作用 ,故C可能为雌激素受体的部分激动剂。C、D( 0 1μmol·L-1)对HOSTE85具有显著增殖作用。结论　以A作为母体化合物 ,侧链引入碱性基团 ,对其结构修饰设计抗绝经后骨质疏松症药物是可行的。 展开更多

关键词 选择性雌激素受体调节剂 异丙氧基异黄酮 雷洛昔芬 苯并二氢吡喃 绝经后骨质疏松症

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甲基蓝对阿片类物质产生耐受和依赖的阻断作用 被引量：2

7

作者 臧梦维 孟爱民 +3 位作者 沈琦 孙越 汪青 刘景生 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第8期576-581,共6页

目的：探讨鸟苷酸环化酶（ｓＧＣ）抑制剂甲基蓝（ＭＢ）对阿片耐受和依赖的阻断作用。方法：体外培养ｉＮＯＳ稳定表达的神经细胞做为模型，竞争性蛋白结合法、放免法和３ＨＡｒｇ转化３ＨＣｉｔ法检测胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ水平... 目的：探讨鸟苷酸环化酶（ｓＧＣ）抑制剂甲基蓝（ＭＢ）对阿片耐受和依赖的阻断作用。方法：体外培养ｉＮＯＳ稳定表达的神经细胞做为模型，竞争性蛋白结合法、放免法和３ＨＡｒｇ转化３ＨＣｉｔ法检测胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ水平和ＮＯＳ活性，激光共聚焦扫描技术测定胞内Ｃａ２＋浓度。观察ＭＢ对δ阿片激动剂ＤＰＤＰＥ和吗啡预处理细胞４８ｈ及纳洛酮戒断，对胞内ｃＧＭＰ，ｃＡＭＰ含量、［Ｃａ２＋］ｉ和ＮＯＳ活性的影响。结果：ＭＢ可明显抑制阿片激动剂长时程所致ｃＧＭＰ含量增加（Ｐ＜００１），对ｃＡＭＰ含量、［Ｃａ２＋］ｉ和ＮＯＳ活性的变化无影响。结论：ＭＢ通过抑制ｓＧＣ活性，使ＮＯｃＧＭＰ通路下调，减缓阿片耐受和依赖的发生。 展开更多

关键词 药理依赖 阿片类 阻断作用 甲基蓝

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17β-雌二醇对人的类成骨细胞株TE85和U2功能的调节 被引量：2

8

作者 孙兰 刘景生 +1 位作者 翁玲玲 郑虎 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期641-645,共5页

目的：以人的类成骨细胞株 Ｔ Ｅ８５ 和 Ｕ２ 为细胞模型，观察雌激素对细胞功能的影响。方法：３ Ｈ胸腺嘧啶参入法测细胞增殖； Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法测细胞因子 Ｉ Ｌ６ 含量；精氨酸转化法测ｉ Ｎ Ｏ Ｓ 活性。结果： Ｉ Ｌ１... 目的：以人的类成骨细胞株 Ｔ Ｅ８５ 和 Ｕ２ 为细胞模型，观察雌激素对细胞功能的影响。方法：３ Ｈ胸腺嘧啶参入法测细胞增殖； Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法测细胞因子 Ｉ Ｌ６ 含量；精氨酸转化法测ｉ Ｎ Ｏ Ｓ 活性。结果： Ｉ Ｌ１（２０ Ｕ·ｍ Ｌ－ １ ） 和 Ｔ Ｎ Ｆα（５０ Ｕ·ｍ Ｌ－ １ ） 刺激细胞分泌 Ｉ Ｌ６ ，并抑制细胞增殖。在 Ｔ Ｅ８５ 细胞，１７β雌二醇（ Ｅ２ ） 可抑制 Ｉ Ｌ６ 分泌并能对抗 Ｉ Ｌ１和 Ｔ Ｎ Ｆα对细胞增殖的影响。 Ｎ Ｏ Ｓ 抑制剂 Ｌ Ｎ Ｍ Ｍ Ａ 使细胞３ Ｈ胸腺嘧啶的参入降低， Ｅ２ （１ ｎ ｍｏｌ· Ｌ－ １） 可对抗 Ｌ Ｎ Ｍ Ｍ Ａ 的抑制作用。结论： Ｅ２ 通过减少 Ｉ Ｌ６ 分泌和影响ｉ Ｎ Ｏ Ｓ 活性而调节细胞功能。 展开更多

关键词 17Β-雌二醇 成骨细胞 细胞因子

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阿片类药物对诱导型NO合酶稳定表达神经细胞受体介导AC-cAMP系统的影响 被引量：2

9

作者 臧梦维 沈琦 +2 位作者 汪青 郭菲 刘景生 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第7期484-490,共7页

目的：利用稳定表达诱导型ＮＯ合酶的ＮＧＬＮＣＸｉＮＯＳ细胞，观察阿片类药物对受体介导ＡＣｃＡＭＰ系统的影响。方法：竞争性蛋白结合法和完整细胞受体结合实验测定ｃＡＭＰ含量和受体结合力。结果：阿片类药物短时程作用抑制... 目的：利用稳定表达诱导型ＮＯ合酶的ＮＧＬＮＣＸｉＮＯＳ细胞，观察阿片类药物对受体介导ＡＣｃＡＭＰ系统的影响。方法：竞争性蛋白结合法和完整细胞受体结合实验测定ｃＡＭＰ含量和受体结合力。结果：阿片类药物短时程作用抑制ＡＣ活性，受阿片受体介导的、百日咳毒素敏感的Ｇ蛋白信号通路调节。阿片类药物长时程作用和纳洛酮急性戒断引起受体脱敏，呈时间和剂量依赖性，伴有受体下调。结论：成功地建立阿片耐受和依赖细胞模型，可用于研究ＡＣｃＡＭＰ系统和ＮＯｃＧＭＰ系统在阿片耐受和成瘾中的调节。 展开更多

关键词 阿片类 受体 药物耐受 一氧化氮合酶 AC-cAMP

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RGS4对阿片受体信号转导途径中腺苷酸环化酶活性的影响 被引量：2

10

作者 谢志华 胡萍 +3 位作者 叶菜英 杨惠芬 刘丽云 张德昌 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期210-214,共5页

目的 探讨 RGS4在整体细胞中对阿片受体信号转导途径中腺苷酸环化酶 (AC)活性的影响。方法 采用共转染法将μ-受体、δ-受体和 RGS4基因导入 HEK- 293细胞，受体结合法确定转染效率。用不同浓度的吗啡、 DAMGO和 DPDPE分别激活μ-受体和... 目的 探讨 RGS4在整体细胞中对阿片受体信号转导途径中腺苷酸环化酶 (AC)活性的影响。方法 采用共转染法将μ-受体、δ-受体和 RGS4基因导入 HEK- 293细胞，受体结合法确定转染效率。用不同浓度的吗啡、 DAMGO和 DPDPE分别激活μ-受体和δ-受体，放射性蛋白竞争结合（非标记底物）法测定 cAMP浓度 。结果 受体被其特异的激动剂激活后，单独转染 μ-受体或δ-受体基因的细胞其 AC活性被抑制，且对激动剂表现出高度的剂量依赖性；空质粒（ pcDNA3）转染的细胞之 AC活性不受各种激动剂影响 ;同时转染 RGS4和 μ-受体基因的细胞其 AC活性虽然也呈现剂量依赖性抑制，但抑制的强度比单独转染μ-受体基因的细胞明显减弱 ; RGS4和 δ-受体基因共转染并不影响δ-受体对 AC活性的抑制。受体结合实验显示 RGS4不影响μ-受体和δ-受体的表达。结论 RGS4能逆转μ-受体对 AC的抑制效应，但对δ-受体却没有相同的作用。这可能反映了不同阿片受体分子机制的差异。 展开更多

关键词 RGS4 阿片受体 共转染 腺苷酸环化酶 剂量依赖性抑制

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脱氢表雄酮硫酸酯与绝经后激素替代治疗 被引量：2

11

作者 刘雁勇 左萍萍 《生殖医学杂志》 CAS 2003年第5期301-306,共6页

脱氢表雄酮 (DHEA)及其硫酸酯 (DHEAS)是由肾上腺皮质分泌的最丰富的甾体激素 ,DHEA(S)通过与GABA、NMDA等多种受体作用及调节阿片肽分泌等途径发挥缓解抑郁症状、增强体质、调节机体免疫力、改善认知等功能 ,有关DHEA(S)

关键词 DHEAS 激素替代治疗 Β-内啡肽 抑郁症 绝经

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小剂量雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠骨小梁结构的影响 被引量：2

12

作者 孙兰 杨京 刘景生 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期224-227,I001,共5页

目的 观察小剂量雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠血清雌二醇（ E2）浓度和骨小梁结构的影响。方法 12月龄雌性大鼠去除双侧卵巢建立骨质疏松模型。实验分四组：假手术组、去卵巢骨质疏松组（ OVX）、 E2替代治疗组 [2.0 mg /(kg· d)]... 目的 观察小剂量雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠血清雌二醇（ E2）浓度和骨小梁结构的影响。方法 12月龄雌性大鼠去除双侧卵巢建立骨质疏松模型。实验分四组：假手术组、去卵巢骨质疏松组（ OVX）、 E2替代治疗组 [2.0 mg /(kg· d)]和小剂量 E2组 [0.5 mg/(kg· d)]。去卵巢术 2周后开始灌胃给 E2，连续 12周。在实验结束前 2周，对所有大鼠进行阴道脱落细胞检查，连续 14 d。用显微镜观察涂片，并根据细胞形态和数量判断大鼠动情周期。给药结束后处死动物，取子宫，称其湿重。取全血，采用放射免疫分析法测定血清 E2、卵泡刺激素（ FSH）及黄体生成素（ LH）浓度。通过股骨骨病理切片观察骨小梁结构。 结果 与 OVX组大鼠相比，小剂量 E2组大鼠股骨远端小梁骨粗壮，骨质密度较高，作用与 E2替代组接近，但大鼠子宫重量、血清 E2浓度和动情周期无明显改变。 结论 小剂量 E2能明显改善去卵巢骨质疏松大鼠的骨小梁结构，同时对生殖系统无影响。 展开更多

关键词 雌激素 去卵巢 骨质疏松 骨小梁 实验研究

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羟苯氨酮激活家兔血管平滑肌细胞钙敏感钾通道 被引量：1

13

作者 李安龙 刘忠武 +2 位作者 朱丽霞 张德昌 叶益新 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期101-104,共4页

目的　研究羟苯氨酮 (oxyphenamone ,Oxy)扩张血管作用机理。方法　用全细胞膜片钳技术 ,监测家兔肠系膜阻力血管平滑肌细胞钙敏感钾通道电流变化以及Oxy对其的影响。结果　 0 1μmol·L- 1Oxy明显增加钙敏感钾通道电流 ,冲洗后恢... 目的　研究羟苯氨酮 (oxyphenamone ,Oxy)扩张血管作用机理。方法　用全细胞膜片钳技术 ,监测家兔肠系膜阻力血管平滑肌细胞钙敏感钾通道电流变化以及Oxy对其的影响。结果　 0 1μmol·L- 1Oxy明显增加钙敏感钾通道电流 ,冲洗后恢复至给药前水平 ;0 0 1～ 10 μmol·L- 1Oxy明显增加钙敏感钾通道电流 ,且呈现浓度依赖性。 展开更多

关键词 血管平滑肌 羟苯氨酮 全细胞膜片钳技术 心力衰竭 钙敏感钾通道

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阿片类药物长期作用对μ-中国仓鼠卵细胞基因表达的影响及与PC12细胞线粒体膜电势之间的关系 被引量：1

14

作者 陆久怡 叶菜英 +3 位作者 杨惠芬 武文君 刘丽云 张德昌 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期215-219,共5页

目的 从基因水平入手，筛选 DAMGO长期作用后μ-中国仓鼠卵细胞 (μ- CHO)差异表达的基因，初步研究阿片类药物与 PC12细胞线粒体膜电势之间的关系。方法 选用μ受体特异性激动剂 DAMGO长期（ 72 h）作用于μ- CHO细胞，模拟耐受成瘾。... 目的 从基因水平入手，筛选 DAMGO长期作用后μ-中国仓鼠卵细胞 (μ- CHO)差异表达的基因，初步研究阿片类药物与 PC12细胞线粒体膜电势之间的关系。方法 选用μ受体特异性激动剂 DAMGO长期（ 72 h）作用于μ- CHO细胞，模拟耐受成瘾。利用差异显示 PCR、克隆、 Northern印迹分析等找出表达水平有改变的基因，测序，并与 NIH Blast数据库中序列比对。利用激光共聚焦显微成像、线粒体膜电势测定等方法，观察吗啡短期与长期作用 PC12细胞线粒体膜电势的变化。结果其中一条基因在用 DAMGO长期刺激μ- CHO细胞后基因水平出现上调，并与大鼠线粒体膜上 H＋ /磷酸基同向转运蛋白编码基因同源性很高。线粒体膜电势测定发现，用 10－ 6～ 10－ 4 mol/L吗啡短时间（ 2 h）作用 PC12细胞后，细胞内线粒体膜电势部分丧失或完全丧失；长时间（ 12～ 60 h）作用后，膜电势出现从部分丧失、完全丧失到逐步恢复的现象，上述现象均能被阿片受体拮抗剂纳洛酮阻断。结论 初步提示阿片类药物长期作用含有阿片受体的细胞后，可导致细胞线粒体功能改变，推测阿片类药物可能影响细胞线粒体电子转移、 ATP合成过程，此过程可能与阿片类药物长期激活阿片受体导致的成瘾、耐受有关。 展开更多

关键词 阿片类药物 耐受 差示PCR 线粒体膜电势 PC12细胞

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新型阿片受体配基的生物鉴定 被引量：1

15

作者 胡萍 谢志华 +3 位作者 杨惠芬 仇缀佰 张德昌 叶菜英 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期220-223,共4页

目的 研究新合成的阿片受体配基对μ阿片受体的激动作用。方法 采用生物鉴定的方法，检测新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡对豚鼠回肠（ GPI）纵行肌收缩的抑制作用和所激动的阿片受体亚型，评价效价强度，测定 IC50值。结果 新型阿片受... 目的 研究新合成的阿片受体配基对μ阿片受体的激动作用。方法 采用生物鉴定的方法，检测新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡对豚鼠回肠（ GPI）纵行肌收缩的抑制作用和所激动的阿片受体亚型，评价效价强度，测定 IC50值。结果 新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡都可抑制 GPI的电刺激收缩，在 GPI上显示纯激动剂作用。新型阿片受体配基与阿片受体的结合为可逆性结合。新型阿片受体配基 1＃、 2＃、 3＃、 6＃、 8＃、 9＃和 12＃以及典型的阿片受体激动剂 DAMGO和吗啡的 IC50值分别为 (11.57± 0.71)、 (1255.00± 407.00)、 (9.40± 1.41)、 (240.60± 146.40)、 (453.00± 7.07)、 (130.60± 10.61)、 (7.68± 0.71)、 (12.04± 0.61)和 (72.15± 22.63)nmol/L。竞争性拮抗剂纳洛酮可拮抗配基的激动作用，使新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡的量效曲线平行右移。结论 新型阿片受体配基可激动μ阿片受体，是典型的μ受体激动剂。 展开更多

关键词 新型阿片受体配基 Μ阿片受体 激动剂 镇痛药

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钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的制备与活性测定 被引量：1

16

作者 郭庆民 孟爱民 +1 位作者 杨京 刘景生 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期228-231,共4页

目的 从牛心肌中提取纯化钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ (CaMKⅡ )，并测定其活性。方法 采用 DEAE- cellulose柱层析和 Sepharose 4B亲和层析分离纯化蛋白，用γ- 32P掺入法测定 CaMKⅡ及自磷酸化的 CaMKⅡ活性。 结果从牛心肌中提取到钙... 目的 从牛心肌中提取纯化钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ (CaMKⅡ )，并测定其活性。方法 采用 DEAE- cellulose柱层析和 Sepharose 4B亲和层析分离纯化蛋白，用γ- 32P掺入法测定 CaMKⅡ及自磷酸化的 CaMKⅡ活性。 结果从牛心肌中提取到钙调蛋白结合的蛋白组分，纯化后得到的 CaMKⅡ比较稳定，产量也较高。此过程比较简单，适合大量制备。经 SDS- PAGE检测，发现酶提取物均质，酶亚基的目的蛋白带相对分子质量为 56 000。在 syntide- 2为底物的反应中，纯化的 CaMKⅡ的特异性酶活性为 7.84 pmol· min－ 1· mg－ 1。 CaMKⅡ可自磷酸化，经过自磷酸化的酶在 Ca2＋和钙调蛋白不存在时也保持活性。结论 通过凝胶层析与亲和层析可提纯 CaMKⅡ。 展开更多

关键词 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 活性测定 制备 凝胶层析 亲和层析

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重组诱导型一氧化氮合酶在NG108-15细胞中稳定表达及其生物学特性

17

作者 臧梦维 汪青 +2 位作者 沈琦 刘景生 彭学贤 《实验生物学报》 CSCD 1999年第4期335-347,共13页

本文用重组iNOS基因真核表达载体转染NG108-15神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交细胞株,获得G418抗性克隆。在稳定表达iNOS基因2~#克隆中,胞浆相酶活性增加,伴有NO_2^-含量和胞内cGMP水平增高,提示iNOS基因表达参与NO-cGMP信号转导通路,且可... 本文用重组iNOS基因真核表达载体转染NG108-15神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交细胞株,获得G418抗性克隆。在稳定表达iNOS基因2~#克隆中,胞浆相酶活性增加,伴有NO_2^-含量和胞内cGMP水平增高,提示iNOS基因表达参与NO-cGMP信号转导通路,且可被L-NNA和MB所阻断。蛋白表达产物的亚细胞定位分析显示功能性iNOS主要位于细胞胞浆中。对转染细胞做外源基因整合、转录和翻译水平鉴定,证实均有较高水平iNOS mR-NA转录和特异性蛋白表达,成功地建立了稳定表达iNOS基因的工程细胞。 展开更多

关键词 INOS NG108-15 基因表达 基因转移 抑制剂

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NMDA受体拮抗剂APV抑制福尔马林诱导的大鼠伤害性行为反应

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作者 李富春 丁丽君 任民峰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期251-254,共4页

目的：检测ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＤＬ２ａｍｉｎｏ５ｐｈｏｓｐｈｏｎｏｖａｌｅｒｉｃａｃｉｄ（ＡＰＶ）对福尔马林诱导的大鼠伤害性行为反应的镇痛效应。方法：在大鼠左足趾部ｓｃ福尔马林诱导化学损伤性行为反应，经蛛网膜下... 目的：检测ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＤＬ２ａｍｉｎｏ５ｐｈｏｓｐｈｏｎｏｖａｌｅｒｉｃａｃｉｄ（ＡＰＶ）对福尔马林诱导的大鼠伤害性行为反应的镇痛效应。方法：在大鼠左足趾部ｓｃ福尔马林诱导化学损伤性行为反应，经蛛网膜下腔引入药物，观察对此行为反应的抑制效应。结果：ＡＰＶ剂量依赖地抑制福尔马林诱导的持续性伤害性行为反应并有时间作用特点；ＡＰＶ对其中的反射性缩腿反应也有抑制作用，但没有时间作用特点。结论：ＮＭＤＡ受体在脊髓痛觉传递和疼痛反应过程中起重要作用；但ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＡＰＶ是否有直接的镇痛效应仍需进一步分析。 展开更多

关键词 NMDA受体拮抗剂 伤害性行为反应 疼痛 大鼠

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一氧化氮合酶抑制剂阻断阿片耐受和依赖的信号转导途径 被引量：5

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作者 臧梦维 沈琦 刘景生 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期764-768,共5页

目的探讨一氧化氮合酶（NOS）抑制剂NG-硝基-L-精氨酸（L-NNA）对阿片耐受和依赖机制中腺苷酸环化酶-环磷酸腺苷（AC-cAMP）系统、Ca2+系统和一氧化氮-环磷酸鸟苷（NO-cGMP）系统变化的影响。方法实验共分为对照组，阿片激动剂组，阿片... 目的探讨一氧化氮合酶（NOS）抑制剂NG-硝基-L-精氨酸（L-NNA）对阿片耐受和依赖机制中腺苷酸环化酶-环磷酸腺苷（AC-cAMP）系统、Ca2+系统和一氧化氮-环磷酸鸟苷（NO-cGMP）系统变化的影响。方法实验共分为对照组，阿片激动剂组，阿片激动剂+纳洛酮组;L-NNA+阿片激动剂组和L-NNA+阿片激动剂+纳洛酮组。采用竞争性蛋白结合试验，3H-精氨酸转化成3H-胍氨酸方法，放射免疫测定和激光共聚焦显微镜技术，测定cAMP含量，NOS活性，cGMP生成量和[Ca2+]i水平。免疫组织化学检测iNOS蛋白表达。结果稳定表达iNOS基因的NG-LNCXiNOS细胞在高选择性δ-受体激动剂δ-阿片受体高选择性激动剂（DPDPE）长时程作用及纳洛酮戒断时，胞内cAMP水平和[Ca2+]i增加，胞浆相iNOS活性和cGMP生成增多，与DPDPE预处理剂量成正比。10-4mol/LL-NNA能降低吗啡、DPDPE、DADLE诱发的cAMP、iNOS活性和蛋白及cGMP的升高，但不能降低[Ca2+]i。结论NOS抑制剂延缓阿片耐受和依赖的发生，可能是负调控AC-cAMP系统和NO-cGMP系统，为临床应用NOS抑制剂防治阿片耐受和成瘾提供了实验依据。 展开更多

关键词 阿片样δ 麻醉品依赖 一氧化氮 信号传递

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G蛋白βγ异二聚体与跨膜信号转导的保真

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作者 潘阳 叶菜英 张德昌 《国外医学（分子生物学分册）》 CSCD 2003年第5期279-281,共3页

G蛋白信号通路是细胞跨膜信号转导体系中的重要组成部分 ,其转导信号的功能涉及广泛的细胞生物学活动。G蛋白的信号转导特性与结合GTP的α亚单位和 βγ亚单位异二聚体有关。越来越多的研究表明 。

关键词 G蛋白 信号转导 βγ异二聚体 跨膜信号转导 βγ亚单位

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