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A组轮状病毒NSP1基因克隆表达及免疫学性质研究 被引量:4
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作者 魏海涛 张艳 +3 位作者 范耀春 李传印 文喻玲 陈元鼎 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期15-21,共7页
轮状病毒(rotavirus,RV)非结构蛋白1(non structural protein1,NSP1)在病毒与宿主的相互作用中发挥着重要的功能。运用基因克隆和表达技术在大肠杆菌中表达了TB-Chen株RVNSP1蛋白,进行了NSP1的免疫学性质和RV感染细胞中NSP1蛋白的合成... 轮状病毒(rotavirus,RV)非结构蛋白1(non structural protein1,NSP1)在病毒与宿主的相互作用中发挥着重要的功能。运用基因克隆和表达技术在大肠杆菌中表达了TB-Chen株RVNSP1蛋白,进行了NSP1的免疫学性质和RV感染细胞中NSP1蛋白的合成与分布以及NSP1的系统进化和基因分型研究。结果表明,大肠杆菌BL21(DE3)能高效表达重组NSP1蛋白(rNSP1),rNSP1表达量约占菌体总蛋白的34.4%。rNSP1能诱导免疫豚鼠产生特异性血清抗体。Western blot及免疫荧光检测结果表明,抗rNSP1血清抗体能特异性识别自身蛋白,对SA11、Wa株的NSP1蛋白有交叉反应性;免疫荧光结果还表明,SA11感染的MA104细胞中合成的NSP1蛋白在细胞质中区域化聚集形成辐射状排列的颗粒状结构,而Wa株的NSP1不能形成此样结构。至今发现的A组RV至少可以分为16个不同的NSP1基因型,TB-Chen株NSP1为A2型。不同基因型有独特的敏感宿主范围,同一基因型可能感染不同种动物,同一种动物也可能感染不同基因型。基因型A4型和A16型仅在鸟类病毒株中出现;而且鸟类中只有A4型和A16型。研究结果为进一步研究NSP1蛋白质的结构功能及其应用开发奠定了很好的基础。 展开更多
关键词 轮状病毒 NSP1 重组表达 免疫学性质 基因分型
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妊娠期糖尿病孕妇大网膜下脂肪组织全基因组DNA甲基化研究 被引量:2
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作者 钱源 孙浩 +3 位作者 肖雪 祁文瑾 张兰 马润玫 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2017年第2期159-164,共6页
背景大网膜下脂肪组织与妊娠期糖尿病(GDM)密切相关,目前,关于GDM孕妇大网膜下脂肪组织全基因组DNA甲基化研究较少。目的研究GDM孕妇和无GDM孕妇大网膜下脂肪组织全基因组DNA甲基化差异,为寻找GDM可能的致病基因提供线索。方法选取2012... 背景大网膜下脂肪组织与妊娠期糖尿病(GDM)密切相关,目前,关于GDM孕妇大网膜下脂肪组织全基因组DNA甲基化研究较少。目的研究GDM孕妇和无GDM孕妇大网膜下脂肪组织全基因组DNA甲基化差异,为寻找GDM可能的致病基因提供线索。方法选取2012年1月—2014年5月于昆明医科大学第一附属医院妇产科门诊定期产前检查并入院分娩的GDM孕妇3例为病例组,同期健康孕妇3例为对照组。剖宫产术中剥离大网膜下脂肪组织,提取全基因组DNA。经变性和扩增后酶切扩增产物,将DNA片段与Illumina Methylation Bead Chip芯片进行杂交。根据Methylation Analysis Algorithms生成各样本每个位点的甲基化水平,经过偏差校正和位点过滤,得到甲基化水平。采用DAVID数据库对具有显著性差异的甲基化基因进行Gene Ontology(GO)和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)信号通路分析。另分别选取同期GDM孕妇和无GDM孕妇各5例,验证候选基因启动子区域甲基化水平差异。结果病例组1 298个基因低甲基化,1 570个基因高甲基化,其中TMEM195、TCF7L2、IGF1、IGF1R甲基化可能与血糖调控密切相关,DGKG、NRXN3甲基化可能与体质指数(BMI)密切相关。GO功能分析显示,低甲基化基因参与的生物学过程主要是级联反应的活性调节、细胞凋亡调节及蛋白转运等,细胞成分主要为细胞外基质;高甲基化基因参与的生物学过程主要是抗原处理和呈递、主要组织相容复合体(MHC)Ⅱ参与的抗原处理和呈递,细胞成分主要为肌动骨架蛋白、MHC等。KEGG信号通路分析中,富集数>20.000的通路有抗原处理和呈递(富集数为23.142)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路(富集数为22.068)。分别选取参与抗原处理和呈递、PPAR信号通路中的甲基化差异基因人类白细胞抗原G(HLA-G)、PPARGC1A进行验证。GDM孕妇大网膜下脂肪组织HLA-G启动子区域甲基化水平高于无GDM孕妇( 展开更多
关键词 糖尿病 妊娠 DNA甲基化 脂肪组织 抗原呈递 过氧化物酶体增殖物激活受体 全基因组关联研究
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轮状病毒分类与命名 被引量:20
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作者 陈元鼎 范耀春 李传印 《国际病毒学杂志》 2009年第4期115-120,共6页
轮状病毒(rotavirus,RV)是不含囊膜、有三层壳体、基因组为11个片段的双链RNA病毒,是人类、哺乳类和鸟类急性胃肠炎的重要病原体。RV结构复杂,成员众多,建立一个能区分不同病毒株及其基因型(血清型)的分类与命名系统,对深入研... 轮状病毒(rotavirus,RV)是不含囊膜、有三层壳体、基因组为11个片段的双链RNA病毒,是人类、哺乳类和鸟类急性胃肠炎的重要病原体。RV结构复杂,成员众多,建立一个能区分不同病毒株及其基因型(血清型)的分类与命名系统,对深入研究RV生物学、免疫学性质及其分子遗传进化和亲缘关系,促进国际学术交流和有效预防与控制RV感染,具有重要的意义。 展开更多
关键词 轮状病毒 基因组 基因型 分类 命名
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不同代次F基因型SP-A株腮腺炎病毒在恒河猴体内的致病性 被引量:3
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作者 史长军 梁燕 +7 位作者 崔萍芳 马绍辉 王庆玲 杨丽仙 陈巍 沈冬 谭振国 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第9期774-776,共3页
目的观察不同代次F基因型SP-A株腮腺炎病毒在恒河猴体内的致病性。方法选取腮腺炎病毒SP-A株在KMB17细胞上传至15、20、30代的活病毒作为实验组,在Vero细胞上传至第2代的病毒作为野毒株对照组,分别接种恒河猴腮腺。观察实验动物体温和... 目的观察不同代次F基因型SP-A株腮腺炎病毒在恒河猴体内的致病性。方法选取腮腺炎病毒SP-A株在KMB17细胞上传至15、20、30代的活病毒作为实验组,在Vero细胞上传至第2代的病毒作为野毒株对照组,分别接种恒河猴腮腺。观察实验动物体温和临床体征。活体取双侧腮腺,进行组织病理检查,并检测腮腺炎病毒中和抗体。结果对照组动物出现了明显的体温升高,一般状况较差,注射后第5天出现腮腺肿大,组织病理检查表现为淋巴细胞大量浸润。而各实验组动物均未出现腮腺炎症状和明显的组织病理学变化。各组动物接种病毒后均能产生抗腮腺炎病毒的中和抗体,但对照组的中和抗体GMT水平均高于各实验组。结论腮腺炎病毒SP-A株传至第15代次,已无致腮腺炎发病能力,为开发F基因型腮腺炎病毒减毒活疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 腮腺炎病毒 SP-A株 F基因型 致病性 减毒
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白细胞介素-7基因抗肿瘤效应的实验观察研究 被引量:1
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作者 王炯 董承红 +3 位作者 孙明 和绍清 王丽春 李琦涵 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第10期879-882,共4页
目的:探讨白细胞介素 7裸 DNA质粒用于小鼠肿瘤基因治疗的可行性。方法:构建 IL 7基因真核表达质粒( pSVK3 IL 7),并将此质粒 DNA直接肌肉注射到 Balb/c小鼠体内,在此之前 7天、同时、之后 7天背部皮下接种 SP 2肿瘤细胞,观察该... 目的:探讨白细胞介素 7裸 DNA质粒用于小鼠肿瘤基因治疗的可行性。方法:构建 IL 7基因真核表达质粒( pSVK3 IL 7),并将此质粒 DNA直接肌肉注射到 Balb/c小鼠体内,在此之前 7天、同时、之后 7天背部皮下接种 SP 2肿瘤细胞,观察该质粒基因的体内抗肿瘤生物学活性;并通过 RT PCR的方法检测注射部位 IL 7mRNA的表达情况。结果:在实验中观察到直接肌肉注射 IL 7基因质粒 DNA的荷瘤鼠,其肿瘤出现的时间明显延迟,肿块也明显小于肿瘤对照组,并且延长了荷瘤鼠的存活时间;基因注射后 7天在注射部位局部有大量的 IL 7mRNA表达。结论:由此看出直接注射裸 DNA IL 7基因质粒有一定的抗肿瘤的效应。 展开更多
关键词 白细胞介素-7 肿瘤 基因治疗
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