豆状囊尾蚴人工感染家兔抗体水平的消长 被引量：8

1

作者 王晓霞 骆学农 +2 位作者 孙晓林 于三科 才学鹏 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期283-286,共4页

取人工感染豆状带绦虫犬自然排出的孕卵节片,虫卵计数后以不同数量感染家兔,定期采血,待囊尾蚴成熟后扑杀,计数。同时,用豆状囊尾蚴粗制抗原所建立的ELISA诊断方法,检测家兔的抗体变化情况。结果显示,家兔在感染后第3周血清抗体呈阳性,... 取人工感染豆状带绦虫犬自然排出的孕卵节片,虫卵计数后以不同数量感染家兔,定期采血,待囊尾蚴成熟后扑杀,计数。同时,用豆状囊尾蚴粗制抗原所建立的ELISA诊断方法,检测家兔的抗体变化情况。结果显示,家兔在感染后第3周血清抗体呈阳性,且抗体水平逐步上升,第8周达到最高水平,直至第10周扑杀时仍呈较高的阳性水平。抗体水平随感染数量的增加而升高,虫体负荷随感染强度的增加而逐步升高,感染虫体数量的多少对抗体出现的时间影响不大。研究结果为该病的流行病学调查及免疫预防奠定了基础。 展开更多

关键词 家兔 豆状囊尾蚴 试验模型 抗体水平 酶联免疫吸附试验

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人体带绦虫病诊断方法的研究进展 被引量：8

2

作者 贾万忠 王玉朝 +1 位作者 闫鸿斌 郭爱疆 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期210-214,共5页

就目前用于人体带绦虫感染或寄生的常用临床诊断方法,如虫体形态学观察、粪便或肛门拭子涂片显微镜检查、循环抗体ELISA检测、粪抗原ELISA和粪DNA-PCR检测等及其优缺点进行了综述。指出,敏感性高且特异性强的粪抗原ELISA和粪DNA分子生... 就目前用于人体带绦虫感染或寄生的常用临床诊断方法,如虫体形态学观察、粪便或肛门拭子涂片显微镜检查、循环抗体ELISA检测、粪抗原ELISA和粪DNA-PCR检测等及其优缺点进行了综述。指出,敏感性高且特异性强的粪抗原ELISA和粪DNA分子生物学检测是今后的发展方向和应重点研究的领域。 展开更多

关键词 人 带绦虫病 诊断 粪抗原 粪DNA

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青海省细粒棘球蚴线粒体cox1基因和nad1基因多态性的研究 被引量：6

3

作者 马睿麟 娄忠子 +8 位作者 李立 胡广卫 赵全邦 沈艳丽 闫鸿斌 张向乐 殷宏 蔡金山 贾万忠 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1251-1256,共6页

分析了采自青海省7个县共19个细粒棘球蚴分离株样品的nad1基因和cox1基因核苷酸序列的多态性和单倍型。结果显示,18个细粒棘球蚴分离株属于G1型,1个分离株属于G3型。G1型分离株可根据nad1基因和cox1基因的核苷酸序列变异分为不同的单倍... 分析了采自青海省7个县共19个细粒棘球蚴分离株样品的nad1基因和cox1基因核苷酸序列的多态性和单倍型。结果显示,18个细粒棘球蚴分离株属于G1型,1个分离株属于G3型。G1型分离株可根据nad1基因和cox1基因的核苷酸序列变异分为不同的单倍型,其中nad1基因的单倍型共有5种,变异位点只有5个,单倍型序列之间碱基差异1~4个,变异率达0.45%;而cox1基因的单倍型共有9种,涉及变异位点共27个,单倍型序列之间碱基差异1~11个,变异率达0.68%。突变碱基多位于密码子第3位碱基上,属于同义突变。cox1基因的多态性比nad1基因的多态性丰富。用于细粒棘球蚴G1型内分离株之间核苷酸多态性的分析则分辨率相对较高。上述研究结果为进一步开展棘球蚴病分子流行病学调查积累了数据。 展开更多

关键词 细粒棘球蚴 青海省 cox1基因 nad1基因 基因型 单倍型 单核苷酸多态性

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我国包虫病的防治现状 被引量：19

4

作者 贾万忠 《兽医导刊》 2011年第6期30-33,共4页

棘球蚴病（又称包虫病）是由寄生于犬科动物的棘球属绦虫的幼虫——棘球蚴寄生在牛、羊、人等多种哺乳动物的脏器内而引起,是一类危害严重的人兽共患寄生虫病。

关键词 包虫病 人兽共患寄生虫病 防治 棘球蚴病 犬科动物 哺乳动物 绦虫 牛

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绦虫种的分类鉴定方法研究进展 被引量：11

5

作者 范彦雷 娄忠子 +2 位作者 李立 闫鸿斌 贾万忠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期199-206,共8页

绦虫(cestode)物种数目较多,大约有1 500多种,对人及动物危害严重的是绦虫的幼虫,可引起绦虫蚴病,其中猪囊虫病和包虫病是流行严重的人兽共患寄生虫病。本文将对绦虫种的鉴定方法研究进展、应用和发展方向做一简要综述。目前鉴定一个绦... 绦虫(cestode)物种数目较多,大约有1 500多种,对人及动物危害严重的是绦虫的幼虫,可引起绦虫蚴病,其中猪囊虫病和包虫病是流行严重的人兽共患寄生虫病。本文将对绦虫种的鉴定方法研究进展、应用和发展方向做一简要综述。目前鉴定一个绦虫物种主要依据其形态学、生活史等传统分类学方法并结合分子分类学方法来进行。传统形态学方法不能对那些形态学上相似、但在遗传学方面却不同的绦虫加以鉴定。线粒体和核基因序列在物种鉴定方面的应用已经成为绦虫分类学的研究热点,构成绦虫的核酸条形码,为绦虫隐藏种的发现和新物种的界定,以及为绦虫病的准确诊断、分子流行病学调查、预防措施的制定等提供了重要依据。 展开更多

关键词 绦虫 分类鉴定 形态学 生活史 免疫学试验 分子生物学方法 种间杂交

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四价鸡球虫苗的免疫效果研究 被引量：10

6

作者 闫鸿斌 贾万忠 +4 位作者 田广孚 李万坤 孟庆玲 郭爱疆 才学鹏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期236-240,共5页

在实验条件下观察自主研制的四价鸡球虫苗(LCV)对平养鸡的安全性和免疫保护效果。试验设空白对照组(NC)、攻虫对照组(PC)和免疫组(VC)3个试验组,每组30只鸡。试验结果:空白对照组、攻虫对照组和免疫组的相对增重率依次为100%、84.77%和9... 在实验条件下观察自主研制的四价鸡球虫苗(LCV)对平养鸡的安全性和免疫保护效果。试验设空白对照组(NC)、攻虫对照组(PC)和免疫组(VC)3个试验组,每组30只鸡。试验结果:空白对照组、攻虫对照组和免疫组的相对增重率依次为100%、84.77%和94.97%;免疫后(免疫后攻虫前)排卵囊高峰期间(免疫后5d～10d),免疫组平均OPG(即每克粪便中的卵囊数)为2.70×104,攻虫后排卵囊高峰期间(攻虫后6d～13d)攻虫对照组组平均OPG为2.32×106,高于免疫组(2.69×105)(p<0.01);攻虫后各组死亡率依次为0、10%和0;3个组的ACI(抗球虫指数)分别为200.0、154.77和184.97,免疫组试验效果最佳。结果表明,LCV安全性高、免疫保护效果理想,接种该疫苗后的鸡对较大剂量攻虫具有较强的抵抗力。 展开更多

关键词 鸡 球虫 疫苗 LCV 免疫

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弓形虫GJS株pcDNA3-MIC3核酸疫苗的研究 被引量：7

7

作者 张燕丽 曹丽艳 +5 位作者 芦赟 蔡志杰 王艳华 付宝权 李文卉 张德林 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1299-1302,共4页

根据GenBank中MIC3基因序列设计1对引物,采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增微线体蛋白3(MIC3)基因片段,克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴... 根据GenBank中MIC3基因序列设计1对引物,采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增微线体蛋白3(MIC3)基因片段,克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定。重组质粒pcDNA3-MIC3肌肉注射免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测血清特异抗体;经腹腔攻击感染弓形虫GJS株速殖子,观察小鼠的生存时间。结果成功构建了pcD-NA3-MIC3质粒;免疫组小鼠血清检测到特异性抗体;攻击感染后免疫组小鼠平均存活时间较对照组明显延长。表明该核酸疫苗具有较好的免疫原性,能诱导小鼠产生良好的免疫保护作用。 展开更多

关键词 刚地弓形虫 微线体蛋白3(MIC3) 核酸疫苗 免疫保护

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细粒棘球绦虫重组EG95抗原在绵羊绦虫蚴病血清抗体检测中的应用 被引量：5

8

作者 刘红霞 张德祯 +4 位作者 闫鸿斌 娄忠子 倪兴维 苟惠天 贾万忠 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期911-915,共5页

为了分析评价细粒棘球绦虫重组蛋白EG95(rEG95)在血清抗体检测上的效果,以细粒棘球绦虫EG95重组质粒pGEM-EG95为模板,经PCR扩增后将目的片段亚克隆至pET-28a(+),构建重组表达载体pET-EG95,在大肠杆菌BL21中表达,SDS-PAGE分离和电洗脱纯... 为了分析评价细粒棘球绦虫重组蛋白EG95(rEG95)在血清抗体检测上的效果,以细粒棘球绦虫EG95重组质粒pGEM-EG95为模板,经PCR扩增后将目的片段亚克隆至pET-28a(+),构建重组表达载体pET-EG95,在大肠杆菌BL21中表达,SDS-PAGE分离和电洗脱纯化重组表达产物rEG95。建立重组蛋白间接ELISA方法,检测绵羊带绦虫蚴病血清抗体水平。结果表明,表达产物经SDS-PAGE测定分子质量为21ku左右。该蛋白可被棘球蚴病阳性血清特异性识别,表明该表达产物具有反应原性。应用该重组蛋白间接ELISA检测18份脑多头蚴、15份细颈囊尾蚴、20份棘球蚴感染绵羊血清,24份疫苗抗原rEG95免疫羊血清和来自棘球蚴病疫区的179份绵羊血清,其阳性检出率分别是66.67%、80.00%、100%、91.67%和58.2%,而14份健康羊血清反应为阴性,组间差异有一定统计学意义(P<0.05)。表明EG95蛋白可作为绵羊带绦虫蚴病共同保护性抗原和诊断抗原而加以应用。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 重组EG95抗原 血清 抗体 酶联免疫吸附试验

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野生动物棘球绦虫感染检测方法的研究进展 被引量：4

9

作者 倪兴维 闫鸿斌 +1 位作者 娄忠子 贾万忠 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期100-106,共7页

论述了棘球绦虫野生动物宿主的种类、分布与感染情况,介绍了剖检法、粪抗原-ELISA检测方法、分子生物学检测方法等棘球绦虫感染检测方法的研究进展,并提出了存在的问题及解决途径,为野生动物棘球绦虫(蚴)病的控制与诊断提供指导。

关键词 野生动物 棘球绦虫 流行病学 检测方法

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多房棘球绦虫EM95蛋白的生物信息学分析 被引量：4

10

作者 范彦雷 李立 +2 位作者 娄忠子 闫鸿斌 贾万忠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期423-428,共6页

泡型棘球蚴病（alveolarechinococcosis，AE），又称泡型包虫病，是由多房棘球绦虫（Echinococcus multilocularis，Era）的幼虫引起的一种危害严重的人畜共患寄生虫病，可感染包括人在内的多种动物，呈世界性分布。目前该病呈现感染地... 泡型棘球蚴病（alveolarechinococcosis，AE），又称泡型包虫病，是由多房棘球绦虫（Echinococcus multilocularis，Era）的幼虫引起的一种危害严重的人畜共患寄生虫病，可感染包括人在内的多种动物，呈世界性分布。目前该病呈现感染地区以及感染宿主扩增的趋势，在一些非流行区的国家和地区也首次出现有感染人的报道[1]，同时也有该寄生虫感染非特异性宿主的报道，从而间接增加人的感染[2]。 展开更多

关键词 多房棘球绦虫 生物信息 寄生虫感染 人畜共患寄生虫病 泡型包虫病 学分 蛋白 世界性分布

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猪带绦虫10ku蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其初步应用 被引量：3

11

作者 吴国华 郑亚东 +3 位作者 贾万忠 张少华 景志忠 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1402-1405,共4页

将猪带绦虫六钩蚴10 ku蛋白(TSO10)和囊尾蚴10 ku蛋白(CE10)的基因克隆到表达载体中,构建重组表达载体pGEX-4T-TSO10和pGEX-4T-CE10,经测序证明基因序列完全正确。重组表达载体转化大肠杆菌后诱导表达,用SDS-PAGE、Western-blot和薄层... 将猪带绦虫六钩蚴10 ku蛋白(TSO10)和囊尾蚴10 ku蛋白(CE10)的基因克隆到表达载体中,构建重组表达载体pGEX-4T-TSO10和pGEX-4T-CE10,经测序证明基因序列完全正确。重组表达载体转化大肠杆菌后诱导表达,用SDS-PAGE、Western-blot和薄层扫描检测表达产物。表达的目的蛋白纯化后用于血清样品ELISA检测。SDS-PAGE、Western-blot和薄层扫描检测结果表明,六钩蚴和囊尾蚴10 ku蛋白基因均能在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白的相对分子质量约为35 ku,并能被囊虫病人阳性血清所识别,具有反应原性,表达量分别占菌体蛋白总量的25%和30%。ELISA检测结果显示,10 ku蛋白可用于囊虫病的诊断。 展开更多

关键词 猪带绦虫 10 ku蛋白基因 表达 初步应用

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棘球蚴EG95重组蛋白研究进展 被引量：2

12

作者 李宏民 娄忠子 +4 位作者 李立 李振华 李建秋 闫鸿斌 贾万忠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1066-1070,1078,共6页

棘球蚴病是一种对人畜危害极为严重的人兽共患寄生虫病,严重威胁我国流行区农牧民身体健康和畜牧业的发展,对该病的预防迫在眉睫。EG95蛋白在细粒棘球蚴发育过程中必不可少、高度保守,是目前为止已发现的最具潜力的疫苗候选抗原之一。... 棘球蚴病是一种对人畜危害极为严重的人兽共患寄生虫病,严重威胁我国流行区农牧民身体健康和畜牧业的发展,对该病的预防迫在眉睫。EG95蛋白在细粒棘球蚴发育过程中必不可少、高度保守,是目前为止已发现的最具潜力的疫苗候选抗原之一。国内外学者在EG95重组抗原的构建、表达、应用等方面进行了大量的工作,本文对其进行综述。 展开更多

关键词 棘球蚴病 EG95基因 重组抗原 疫苗 表达系统 免疫保护作用

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弓形虫排泄分泌抗原研究的新进展

13

作者 叶强 张德林 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期765-770,共6页

简要介绍了弓形虫排泄分泌抗原的制备及其组分,对近几年国内外排泄分泌抗原在免疫功能及应用方面的研究进展加以综述,并对其在疫苗研制上的成果和前景进行了探讨,旨在为弓形虫病疫苗的研制提供参考。

关键词 刚地弓形虫 排泄分泌抗原 研究进展

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青海省高原鼠兔体内囊尾蚴分类学地位的初步研究

14

作者 范彦雷 李立 +4 位作者 娄忠子 闫鸿斌 李建秋 刘聪暖 贾万忠 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期661-666,共6页

对从青海省久治县高原鼠兔体内发现的囊尾蚴新种进行了虫种的初步鉴定。利用捕鼠器在青海省久治县捕捉草原上的高原鼠兔,并现场进行解剖,对腹腔或胸腔内发现的囊尾蚴用400mL/L的绵羊胆汁溶液处理,使其头节完全暴露出来,然后用100mL/L福... 对从青海省久治县高原鼠兔体内发现的囊尾蚴新种进行了虫种的初步鉴定。利用捕鼠器在青海省久治县捕捉草原上的高原鼠兔,并现场进行解剖,对腹腔或胸腔内发现的囊尾蚴用400mL/L的绵羊胆汁溶液处理,使其头节完全暴露出来,然后用100mL/L福尔马林溶液进行固定,经苏木精-伊红染色,对头节的形态学进行显微观察。选取其中一条囊尾蚴提取基因组DNA,PCR扩增线粒体细胞色素氧化酶亚基1(cox1)基因,分别利用Neighbor-Joining和Maximum Likelihood方法进行分子系统发育分析。剖解显示,高原鼠兔对该种囊尾蚴的感染率为6.0%(3/50),3只鼠兔囊尾蚴的感染强度分别为4、13和28条;染色后观察发现,该囊尾蚴头节有两圈钩和4个吸盘。遗传进化研究分析表明,该种囊尾蚴具有独立的虫种分类地位,与豆状带绦虫具有较近的亲缘关系。综合形态学、中间宿主和系统发育分析结果,初步确定从青海省高原鼠兔体内发现的囊尾蚴为带属绦虫的一新种的幼虫,并建议将其命名为才氏囊尾蚴。 展开更多

关键词 才氏囊尾蚴 高原鼠兔 苏木精-伊红染色 形态学 cox1基因 系统发育

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宁夏西海固地区棘球绦虫感染的流行病学调查 被引量：7

15

作者 许阳阳 刘聪暖 +5 位作者 尹媛婕 娄忠子 李燕兵 李正直 贾万忠 杨玉荣 《动物医学进展》 北大核心 2015年第7期126-130,共5页

为了解宁夏西吉、海原和原州区(简称西海固地区)的棘球绦虫的感染情况,用PCR方法检测犬粪中棘球绦虫DNA,用ELISA法检测B超筛查阴性的青少年儿童血清中抗棘球绦虫特异抗体(反映周围环境棘球绦虫卵的污染)。采用SPSS20.0统计分析资料,2... 为了解宁夏西吉、海原和原州区(简称西海固地区)的棘球绦虫的感染情况,用PCR方法检测犬粪中棘球绦虫DNA,用ELISA法检测B超筛查阴性的青少年儿童血清中抗棘球绦虫特异抗体(反映周围环境棘球绦虫卵的污染)。采用SPSS20.0统计分析资料,2检验比较不同组间阳性率的差异。结果显示,西海固地区,在检查的2 175份犬粪中,细粒棘球绦虫(E.g-DNA)阳性率分别为9.87%、6.10%、7.00%;多房棘球绦虫(E.m-DNA)阳性率分别为6.40%、1.52%、3.37%。在检查的5 706份人血清中,抗E.g抗体阳性率分别为45.46%、36.23%、42.18%,抗E.m抗体阳性率分别为8.38%、7.03%、20.48%。从终末宿主(狗)感染率和人血清抗体阳性率(非生活史中间宿主)可以证明两型棘球绦虫在该地区的传播流行非常活跃。 展开更多

关键词 棘球绦虫 流行病学 犬 少年儿童

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重组CE18蛋白在绵羊绦虫蚴病诊断上的应用 被引量：6

16

作者 刘红霞 才学鹏 +5 位作者 张少华 郭爱疆 闫鸿斌 苟惠天 付宝权 贾万忠 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期2997-3002,共6页

【目的】探讨细粒棘球蚴CE18重组蛋白作为绦虫蚴病免疫诊断抗原的应用价值,为筛选绦虫蚴病血清学诊断抗原提供依据。【方法】应用棘球蚴CE18重组抗原建立间接ELISA方法,分别对18份脑多头蚴、15份细颈囊尾蚴、19份棘球蚴感染绵羊血清及19... 【目的】探讨细粒棘球蚴CE18重组蛋白作为绦虫蚴病免疫诊断抗原的应用价值,为筛选绦虫蚴病血清学诊断抗原提供依据。【方法】应用棘球蚴CE18重组抗原建立间接ELISA方法,分别对18份脑多头蚴、15份细颈囊尾蚴、19份棘球蚴感染绵羊血清及194份棘球蚴病疫区绵羊血清和13份健康羊血清进行检测,通过显著性差异分析评价CE18蛋白作为诊断抗原的意义。同时,应用生物学软件对CE18抗原蛋白同源序列进行分析,进一步从分子水平上提示CE18蛋白作为绦虫蚴病诊断抗原的依据。【结果】序列分析表明棘球蚴CE18蛋白基因为多种绦虫如泡状带绦虫、多头带绦虫、猪带绦虫等的共有序列,其蛋白质氨基酸序列相似性很高,不同种属之间高达99%,从分子水平上表明CE18蛋白为带绦虫蚴共同抗原成分之一。重组抗原CE18-ELISA方法检测绵羊血清抗体水平显示:脑多头蚴病、细颈囊尾蚴病、棘球蚴病和棘球蚴病疫区血清的阳性率分别为38.89%、73.33%、100%和76.14%,而对照组血清为阴性反应。【结论】CE18重组蛋白可作为绵羊棘球蚴病和细颈囊尾蚴病血清学诊断抗原,用于畜群活体检疫初筛试验。 展开更多

关键词 CE18重组蛋白 绵羊 绦虫蚴病 抗体 免疫诊断

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猪带绦虫仓鼠动物模型的建立

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作者 张艳 翟军军 +2 位作者 才学鹏 景志忠 骆学农 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期2172-2177,共6页

【目的】为开展猪带绦虫的病原学形态观察、生物学特性研究以及解决实验材料来源的问题,建立猪带绦虫的实验仓鼠动物模型。【方法】通过经口感染被免疫抑制的实验仓鼠,观察仓鼠体内绦虫的感染、生长发育及寄生部位等生物学特性,并利用... 【目的】为开展猪带绦虫的病原学形态观察、生物学特性研究以及解决实验材料来源的问题,建立猪带绦虫的实验仓鼠动物模型。【方法】通过经口感染被免疫抑制的实验仓鼠,观察仓鼠体内绦虫的感染、生长发育及寄生部位等生物学特性,并利用压片技术和组织切片技术对检出的绦虫的形态结构进行研究。【结果】免疫抑制剂在5mg/只,感染一次就能使囊尾蚴发育到性成熟;在实验仓鼠体内,感染后40d的仓鼠体内就能检出具有体节的可见虫体,感染80d后的仓鼠体内能检出孕卵节片;检出的虫体多数吸附在小肠前1/3段,也有寄生在胆囊和胆管中的虫体,甚至偶见虫体钻出胆囊外堆积在肝脏附近;虫体头节上可见4个吸盘及两圈小钩;与人猪带绦虫相比,成熟节片较少。【结论】成功建立了猪带绦虫仓鼠动物模型,这使得成功解决猪带绦虫实验材料的来源问题成为可能,也为猪带绦虫的深入研究奠定了基础。 展开更多

关键词 猪带绦虫 仓鼠动物模型 绦虫特性

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