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羊痘病毒3个结构蛋白的克隆与抗原性分析 被引量：2
1
作者 颜新敏 吴国华 +3 位作者 李健 朱海霞 朱彩珠 张强 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期889-891,共3页
为研究羊痘病毒结构蛋白的功能,本研究将羊痘病毒的ORF57、ORF95和ORF117分别克隆至pGEX4T-1原核表达载体后转染到大肠杆菌中。重组表达菌经1 mmol/L的IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,结果显示3个重组蛋白均在原核细胞中获得有效表达。表... 为研究羊痘病毒结构蛋白的功能,本研究将羊痘病毒的ORF57、ORF95和ORF117分别克隆至pGEX4T-1原核表达载体后转染到大肠杆菌中。重组表达菌经1 mmol/L的IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,结果显示3个重组蛋白均在原核细胞中获得有效表达。表达产物经western blot分析,羊痘病毒特异性血清只能识别融合蛋白ORF57和ORF95,不能识别ORF117。本研究为重组诊断抗原的筛选和亚单位疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 ORF57 ORF95 ORF117 原核表达 抗原性分析
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羊痘病毒G蛋白偶联趋化因子受体基因序列分析及其在鉴别病毒种属上的作用 被引量：1
2
作者 颜新敏 张强 +2 位作者 吴国华 李健 朱海霞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期154-156,共3页
为明确G蛋白偶联趋化因子受体(GpCR)基因在羊痘病毒种属鉴别中的作用,本实验对3株绵羊痘病毒(SPV)和2株山羊痘病毒(GPV)弱毒疫苗株的GpCR进行了克隆测序,并与GenBank中登录的21个羊痘病毒属成员相关序列进行了比对。核酸同源性分析表明... 为明确G蛋白偶联趋化因子受体(GpCR)基因在羊痘病毒种属鉴别中的作用,本实验对3株绵羊痘病毒(SPV)和2株山羊痘病毒(GPV)弱毒疫苗株的GpCR进行了克隆测序,并与GenBank中登录的21个羊痘病毒属成员相关序列进行了比对。核酸同源性分析表明SPV不同毒株之间同源性达到99.5%～99.8%;GPV之间同源性达到98.8%～99.8%;GenBank上公布的疙瘩皮肤病病毒(LSDV)之间同源性达到100%。而GPV、SPV和皮肤疙瘩病毒两两比对的同源性仅达到94.2%～95.9%。对GpCR的系统进化树分析可以看出GPV、SPV和LSDV分别位于不同的进化分枝上,而GPV与LSDV具有更近的亲缘关系。GpCR基因在鉴别GPV属和流行病学分析中具有重要价值。 展开更多
关键词 羊痘病毒 G蛋白偶联趋化因子受体 序列分析 种属鉴别
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2007—2014年国内外小反刍兽疫流行现状及分析 被引量：55
3
作者 吴锦艳 尚佑军 +4 位作者 田宏 陈妍 王光祥 栾志舫 张志东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期687-693,共7页
小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起山羊、绵羊、野生反刍动物及骆驼的一种急性、亚急性高度接触性传染病。自2007年小反刍兽疫作为外来动物疫病传入我国以来,在国务院、农业部和国家有关部委的密切关注和大力支持下,使疫情的流行蔓延趋... 小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起山羊、绵羊、野生反刍动物及骆驼的一种急性、亚急性高度接触性传染病。自2007年小反刍兽疫作为外来动物疫病传入我国以来,在国务院、农业部和国家有关部委的密切关注和大力支持下,使疫情的流行蔓延趋势得到有效控制。但是到了2013年年底,小反刍兽疫风波再次掀起,而且波及面积也逐步扩大,截至2014年6月,疫情已蔓延近20多个省份,严重影响我国国际贸易和经济发展。本文就近几年以及目前国内外小反刍兽疫流行现状进行整理并加以分析,以期为我国小反刍兽疫防控提供参考。 展开更多
关键词 小反刍兽疫 疫情 分布
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干扰素-γ研究进展 被引量：49
4
作者 杨生海 殷宏 +1 位作者 刘永生 张杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期29-34,共6页
干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)是一种具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的细胞因子,主要由活化的T细胞和NK细胞产生。IFN-γ对机体免疫系统具有强大的调节作用,是机体发挥免疫功能、清除体内病原体不可缺少的成分。因此,IFN-γ在... 干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)是一种具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的细胞因子,主要由活化的T细胞和NK细胞产生。IFN-γ对机体免疫系统具有强大的调节作用,是机体发挥免疫功能、清除体内病原体不可缺少的成分。因此,IFN-γ在疾病的诊断、治疗和疫苗免疫效果检测等方面起着重大作用,是现代分子生物学、免疫学和临床医学研究的热点之一。对干扰素-γ产生、分子结构、生物学活性及作用机制等方面做以下简要综述。 展开更多
关键词 干扰素-Γ 分子结构 生物学活性
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国内部分地区羊支原体肺炎血清学调查及分析 被引量：43
5
作者 吴锦艳 尚佑军 +11 位作者 陈妍 王光祥 田宏 曹小安 尹双辉 樊天喜 臧金凤 栾志舫 王耀杰 王雪莹 刘湘涛 张志东 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期156-158,共3页
为了解国内羊肺炎支原体的流行情况,本研究应用正向间接血凝试验(IHA)对2014年~2015年间采自我国12个省44个市、县的3 402份未免疫血清样品进行了绵羊肺炎支原体(MO)、山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)抗体的检测。结果显示:MO抗体阳性率为... 为了解国内羊肺炎支原体的流行情况,本研究应用正向间接血凝试验(IHA)对2014年~2015年间采自我国12个省44个市、县的3 402份未免疫血清样品进行了绵羊肺炎支原体(MO)、山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)抗体的检测。结果显示:MO抗体阳性率为31.92%(1 086/3 402),其中阳性率最高的省份为内蒙古76.8%(636/828),其次是河北50%(60/120)、吉林21.99%(93/423);Mccp的抗体阳性率为10.67%(363/3 402),其中阳性率最高省份为河南35.14%(39/111),其次为河北27.5%(33/120)、山东22.5%(27/120);另有来自河北、辽宁、吉林、海南、黑龙江、内蒙古和安徽7省份的少量血清样品同时检测出MO和Mccp两种抗体,表明该病的流行存在不同菌株混合感染的情况,这在河北地区最为严重(15%)。分析表明,羊支原体肺炎在我国大部分地区流行相当严重,尤其在河北、河南和山东等集约化舍饲养殖发展的地区。绵羊的抗体阳性率明显高于山羊,表明MO在致病性和感染性方面相对Mccp更强。本研究为评估羊支原体肺炎在我国的流行状况以及制定有效防制措施提供了实验依据。 展开更多
关键词 羊支原体肺炎 抗体水平 调查与分析
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口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型定型诊断胶体金免疫层析方法的建立 被引量：27
6
作者 蒋韬 梁仲 +5 位作者 陈涓 何继军 吕律 马维民 刘在新 刘湘涛 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期3801-3808,共8页
【目的】建立一种从田间样品中快速、灵敏、简便检测O、A、AsiaI型口蹄疫病毒抗原的胶体金免疫层析方法(GICA)。【方法】采用柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记纯化的标准株O、A、AsiaI型口蹄疫抗体。将纯化的口蹄疫流行株O/China99,A/... 【目的】建立一种从田间样品中快速、灵敏、简便检测O、A、AsiaI型口蹄疫病毒抗原的胶体金免疫层析方法(GICA)。【方法】采用柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记纯化的标准株O、A、AsiaI型口蹄疫抗体。将纯化的口蹄疫流行株O/China99,A/AF72and AsiaⅠ/China05抗体和羊抗豚鼠抗体分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带。经试验条件优化,组装形成胶体金定型诊断试剂盒。【结果】本试验研制的口蹄疫定型试剂盒具有良好的灵敏度,可检测到7.8×104LD50(1﹕128倍稀释乳鼠毒)的病毒量。同时对阳性及阴性样品进行3次重复检测结果完全相同,说明其有较好的重复性;特异性试验证实该方法在检测口蹄疫临床症状相似病原,如猪水疱病抗原(SVD)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)等病毒时无交叉反应;试剂盒对206份已知血清型田间及实验室样品的符合率试验,O、A、AsiaⅠ型和阴性样本的符合率分别为92.45%、91.66%、92.75%、100%定型准确率94.58%。试剂盒在4℃下可保存6个月。【结论】本试验研发的口蹄疫病毒胶体金定型诊断试剂盒是一种快速、灵敏、特异的FMD抗原检测方法,对基层现场具有广泛应用价值。 展开更多
关键词 O、A、AsiaI型口蹄疫病毒 胶体金 免疫层析法
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细胞凋亡信号传导通路的研究进展 被引量：18
7
作者 刘萍 丛国正 +3 位作者 独军政 邵军军 林彤 常惠芸 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第3期715-717,726,共4页
细胞凋亡是机体维持自身稳定的一种基本生理机制,是有许多基因产物及细胞因子参与的一种有序的细胞自我消亡形式。细胞凋亡发生过程的启动和进行受到精确调控,具有独特而复杂的信号系统。各种凋亡信号通过信号传导通路传至细胞内,激活... 细胞凋亡是机体维持自身稳定的一种基本生理机制,是有许多基因产物及细胞因子参与的一种有序的细胞自我消亡形式。细胞凋亡发生过程的启动和进行受到精确调控,具有独特而复杂的信号系统。各种凋亡信号通过信号传导通路传至细胞内,激活靶分子而产生细胞效应,引发细胞凋亡。一般认为,细胞凋亡存在3条主要通路:线粒体通路、内质网通路和死亡受体通路,各通路间互相联系,共同调节细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞凋亡 信号传导 死亡受体 线粒体 内质网
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羊痘病毒及其疫苗研究进展 被引量：22
8
作者 赵志荀 吴国华 +1 位作者 颜新敏 张强 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第4期77-81,共5页
国内外已对羊痘病毒及对羊痘的预防控制做了大量的研究工作。羊痘病毒的流行病学特征、分离及体外培养、体外检测已有了较快的发展,而其致病机制和基因组结构、分子表位、结构蛋白及非结构蛋白等分子生物学特征的研究尚待逐渐进入更加... 国内外已对羊痘病毒及对羊痘的预防控制做了大量的研究工作。羊痘病毒的流行病学特征、分离及体外培养、体外检测已有了较快的发展,而其致病机制和基因组结构、分子表位、结构蛋白及非结构蛋白等分子生物学特征的研究尚待逐渐进入更加深入的研究。近年来的研究主要是针对结构基因如p32的各类载体的构建、表达和对非结构基因如TK基因的研究及其缺失载体的构建、IRT的功能研究等等。全面而深入的分子生物学和免疫学基础的研究,将为发展更为有效的检测诊断方法,并为安全有效的亚单位疫苗、重组疫苗及核酸疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 羊痘病毒 毒力相关基因及蛋白 ITR基因及分子诊断 疫苗
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高致病性猪蓝耳病病毒GS/LZh/07株的分离、鉴定及其非结构蛋白Nsp2基因特性分析 被引量：19
9
作者 吴锦艳 田宏 +9 位作者 尚佑军 刘湘涛 郑海学 靳野 尹双辉 满自萍 赵娜 蔡承茹 蔺芳 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期438-443,共6页
将高致病性猪蓝耳病疑似病料接种Marc145细胞,发现该病料可使Marc145细胞产生CPE,应用猪蓝耳病病原检测试剂盒从细胞培养物中检测到PRRSV,命名为Gs/Lzh/07株。同时应用RT-PCR方法扩增该分离毒株的非结构蛋白Nsp2基因,并进行了序列测定,... 将高致病性猪蓝耳病疑似病料接种Marc145细胞,发现该病料可使Marc145细胞产生CPE,应用猪蓝耳病病原检测试剂盒从细胞培养物中检测到PRRSV,命名为Gs/Lzh/07株。同时应用RT-PCR方法扩增该分离毒株的非结构蛋白Nsp2基因,并进行了序列测定,发现所扩增到的Nsp2基因有90个核苷酸的缺失。序列比对结果表明:该分离病毒Nsp2基因与经典毒株PRRSV-ch-1a核苷酸同源性为83.0%,氨基酸同源性为72.7%;与高致病性变异毒株NX和SD核苷酸同源性为95.5%,氨基酸同源性为90.9%,可见该毒来源于2006-2007年流行毒株,说明高致病性猪蓝耳病变异病毒已经在甘肃省存在。该毒株的成功分离为高致病性猪蓝耳病流行病学调查分析提供数据,也为预防控制该病积累了资料。Nsp2的特性分析为揭示高致病性猪蓝耳病PRRSV在甘肃省的流行特点提供参考。 展开更多
关键词 高致病性猪蓝耳病病毒 分离 鉴定 NSP2 特性分析
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羊传染性脓疱病毒湖北株的鉴定及分子特征分析 被引量：21
10
作者 张克山 何继军 +7 位作者 尚佑军 郭建宏 郑海学 田宏 靳野 刘永杰 王光祥 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1154-1157,共4页
为了确诊疑似羊传染性脓疱病例,分析羊传染性脓疱病毒(Orfvirus,ORFV)的分子特征,作者以湖北某羊场疑似传染性脓疱病料为对象,进行了电镜观察、病理切片染色、特异性目的基因扩增和序列测定及遗传进化关系分析。结果在电镜下观察到ORFV... 为了确诊疑似羊传染性脓疱病例,分析羊传染性脓疱病毒(Orfvirus,ORFV)的分子特征,作者以湖北某羊场疑似传染性脓疱病料为对象,进行了电镜观察、病理切片染色、特异性目的基因扩增和序列测定及遗传进化关系分析。结果在电镜下观察到ORFV样粒子,切片HE染色可见有炎性细胞浸润,自病料中扩增出特异性目的ORFVB2L基因片段(GenBank序列号GU320351)。结果表明该病例为黑山羊传染性脓疱病毒引起,序列遗传进化分析表明该病毒和2007年分离于中国台湾的毒株(DQ904351)遗传关系最近,和印度2004到2005年分离于绵羊(DQ263306、DQ263305)、山羊(DQ263304、DQ263303)的ORFV同属于一个进化分支。本研究为ORFV分子流行病学研究积累了资料。 展开更多
关键词 羊传染性脓疱病毒 鉴定 分子特征分析
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猪繁殖与呼吸综合征·猪瘟和猪圆环病毒Ⅱ型混合感染的鉴定及病原特性分析 被引量：18
11
作者 吴锦艳 田宏 +6 位作者 尚佑军 王光祥 靳野 尹双辉 陈研 何建辉 刘湘涛 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第10期5244-5247,共4页
[目的]鉴定由猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)引发的猪疫病并进行病原特性分析。[方法]采集湖南湘潭(编号为HN/XT)发病猪的组织和脏器,进行DNA、RNA提取,然后进行PCR扩增、测序;同时采用细胞分离... [目的]鉴定由猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)引发的猪疫病并进行病原特性分析。[方法]采集湖南湘潭(编号为HN/XT)发病猪的组织和脏器,进行DNA、RNA提取,然后进行PCR扩增、测序;同时采用细胞分离技术进行毒株的分离、鉴定。[结果]测序分析结果表明,CSFV、PRRSV和PCV2与目前流行毒序列及GenBank下载序列氨基酸同源性分别为90%、94%和96%左右,可见该次猪病疫情至少是由CSFV、PRRSV和PCV23种病毒混合感染引起。[结论]该研究可对当前危害养猪业混合感染疾病的流行病学研究和净化控制提供数据。 展开更多
关键词 湖南湘潭 猪病 混合感染 鉴定 病原特性
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牛疙瘩皮肤病概述 被引量：15
12
作者 芦晓立 颜新敏 张强 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第11期118-121,共4页
牛疙瘩皮肤病是20世纪发现的在牛群中传播的一种皮肤传染病,该病1929年最早发现于非洲,后传播到世界其他地区,常带来较大的经济损失。论文综述了牛疙瘩皮肤病病原学、流行病学、诊断和防控技术。
关键词 牛疙瘩皮肤病 羊痘病毒 诊断 防控
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我国家畜衣原体病流行状况 被引量：17
13
作者 周继章 邱昌庆 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第7期110-112,共3页
衣原体具有广泛的宿主,在家畜中以羊、牛、猪较为易感,感染母畜后主要引起流产,公畜引起睾丸炎、附睾炎。在我国羊衣原体病的流行达6个省市,猪的衣原体病流行达15个省市,牛衣原体病的流行达11个省市,造成巨大的经济损失。正确认识该病... 衣原体具有广泛的宿主,在家畜中以羊、牛、猪较为易感,感染母畜后主要引起流产,公畜引起睾丸炎、附睾炎。在我国羊衣原体病的流行达6个省市,猪的衣原体病流行达15个省市,牛衣原体病的流行达11个省市,造成巨大的经济损失。正确认识该病和预防该病在畜牧生产过程中必不可少。 展开更多
关键词 衣原体 羊 牛 猪 流行
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基因芯片技术及口蹄疫病毒基因芯片研究进展 被引量：16
14
作者 王建东 郭建宏 +1 位作者 杨春生 刘在新 《动物医学进展》 CSCD 2007年第B08期37-40,共4页
口蹄疫的暴发与流行给世界各国的畜牧生产、社会经济和国际贸易构成严重威胁并造成巨大的经济损失,经典的血清学和PCR检测方法越来越不适应进出口动物检疫的快速、准确、高通量的要求。建立一种快速的诊断方法,使其在很短时间能够区别... 口蹄疫的暴发与流行给世界各国的畜牧生产、社会经济和国际贸易构成严重威胁并造成巨大的经济损失,经典的血清学和PCR检测方法越来越不适应进出口动物检疫的快速、准确、高通量的要求。建立一种快速的诊断方法,使其在很短时间能够区别各血清型口蹄疫和其他水泡性疾病是非常必要的。口蹄疫病毒基因芯片包括155个寡核苷酸探针,总长35bp～45bp,设计在VP3-VP1-2A区,既有共有的病毒型别,也包含特异的血清型别。这项技术的优点是能在单一的芯片上检测多元病原体。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 基因芯片 检测
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多杀性巴氏杆菌的分离和PCR鉴定 被引量：13
15
作者 贺英 储岳峰 +2 位作者 赵萍 高鹏程 逯忠新 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期702-705,共4页
从甘肃省某县一猪场病死猪剖解肺部分离,经过涂片镜检观察,为革兰氏染色为阴性的球杆菌,经过生化试验鉴定初步定为多杀性巴氏杆菌。设计1对引物进行PCR扩增、克隆之后,送往大连宝生物公司测序,测序结果运用BLAST软件比对,与多杀性巴氏... 从甘肃省某县一猪场病死猪剖解肺部分离,经过涂片镜检观察,为革兰氏染色为阴性的球杆菌,经过生化试验鉴定初步定为多杀性巴氏杆菌。设计1对引物进行PCR扩增、克隆之后,送往大连宝生物公司测序,测序结果运用BLAST软件比对,与多杀性巴氏杆菌同源性为100%。对分离株进行药敏试验,其对青霉素、链霉素、四环素等抗生素和磺胺类药物敏感。 展开更多
关键词 分离 鉴定 多杀性巴氏杆菌 聚合酶链式反应
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羊霉形体与霉形体病 被引量：15
16
作者 储岳峰 赵萍 +2 位作者 高鹏程 贺英 逯忠新 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第19期8106-8108,共3页
列举目前已知从绵羊和山羊上分离出的霉形体种类,并概述这些霉形体的病原性和在疾病发生过程中的作用。
关键词 霉形体 霉形体病 传染性无乳症 山羊 传染性胸膜肺炎
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细菌生物被膜鉴定方法的研究进展 被引量：16
17
作者 胡锦松 陈豪泰 +6 位作者 张杰 刘永生 徐志文 朱玲 徐凯 年阳阳 古峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1194-1199,共6页
概述了生物被膜鉴定方法(包括试管法、银染法、扫描电镜和透射电镜法、激光共聚焦扫描显微镜法和微量板定量检测法)的主要操作步骤和注意事项,以及在生物被膜研究中取得的成果。阐明了以上鉴定方法在生物被膜研究中的优缺点,并提出了弥... 概述了生物被膜鉴定方法(包括试管法、银染法、扫描电镜和透射电镜法、激光共聚焦扫描显微镜法和微量板定量检测法)的主要操作步骤和注意事项,以及在生物被膜研究中取得的成果。阐明了以上鉴定方法在生物被膜研究中的优缺点,并提出了弥补上述鉴定方法缺点的建议。 展开更多
关键词 生物被膜 鉴定方法 扫描电镜 透射电镜
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高山冰缘植物粗脂肪、可溶性糖和类黄酮的含量变异与环境适应关系的研究 被引量：14
18
作者 刘艳红 安黎哲 +1 位作者 郭凤霞 徐世健 《冰川冻土》 CSCD 北大核心 2007年第6期947-952,共6页
以乌鲁木齐河源区3个植被垂直分布带的22种主要冰缘植物花期叶片为实验材料,分析了叶片的粗脂肪、可溶性糖和类黄酮的含量.研究结果表明:同一植被带有些植物之间的这3种生理抗性物质含量接近,有些植物的含量却存在显著差异,与植物自身... 以乌鲁木齐河源区3个植被垂直分布带的22种主要冰缘植物花期叶片为实验材料,分析了叶片的粗脂肪、可溶性糖和类黄酮的含量.研究结果表明:同一植被带有些植物之间的这3种生理抗性物质含量接近,有些植物的含量却存在显著差异,与植物自身的遗传特性和采取的生态对策有关.从样品平均含量值的统计分析看,高山流石堆植被的粗脂肪、可溶性糖和类黄酮含量高于垫状和高山草甸植被的含量,3个分布带植物的可溶性糖平均含量存在显著差异,类黄酮平均含量不存在显著差异.多数高山冰缘植物积累高含量的粗脂肪、可溶性糖和类黄酮,提高了植物的抗冻和抗紫外线辐射的能力,是植物适应冰缘环境的物质基础,这些生理抗性物质在含量上的差异说明可溶性糖是增加冰缘植物抗冻性的关键物质. 展开更多
关键词 高山冰缘植物 生理抗性物质 含量变异 环境适应
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口蹄疫病毒VP1基因在番茄中的表达及转基因番茄对豚鼠诱导免疫保护 被引量：10
19
作者 潘丽 张永光 +9 位作者 王永录 王宝琴 谢庆阁 方玉珍 王文秀 蒋守田 王炜 孙元 吕建亮 刘力宽 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期796-801,共6页
构建克隆有O型口蹄疫病毒China99株VP1基因的植物双元表达载体pBin438/VP1。通过农杆菌介导法转化番茄子叶,经卡那霉素抗性筛选,获得60株抗性植株。对抗性植株分别做PCR、RT-PCR检测目的基因的整合与转录,ELISA筛选约40%的卡那抗性植株... 构建克隆有O型口蹄疫病毒China99株VP1基因的植物双元表达载体pBin438/VP1。通过农杆菌介导法转化番茄子叶,经卡那霉素抗性筛选,获得60株抗性植株。对抗性植株分别做PCR、RT-PCR检测目的基因的整合与转录,ELISA筛选约40%的卡那抗性植株阳性,分别提取两株ELISA和Western blot检测阳性的转基因番茄叶片蛋白与弗氏佐剂乳化,于0、15、30d经肌肉途径免疫豚鼠,第三次免疫后28d用100ID50的同源强毒攻击,根据豚鼠抗体水平的消长动态和免疫豚鼠抗强毒攻击的保护率进行转基因植物疫苗免疫原性的评估。结果表明,双元表达载体pBin438/VP1构建正确,PCR、RT-PCR结果证实口蹄疫病毒VP1基因已整合到番茄基因组并在转录水平表达,ELISA和Western blot检测重组蛋白能够与FMDV阳性血清反应。转基因番茄第三次免疫豚鼠后21d血清效价最高可达1∶64,攻毒后两组免疫豚鼠保护率分别达80%和40%,证明转基因番茄表达的VP1蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 VP1基因 转基因番茄 豚鼠 免疫原性
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羊口疮病毒的研究进展 被引量：14
20
作者 颜新敏 张强 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第11期51-53,共3页
羊口疮（orf）病毒又称传染性脓疮（ecthyma contagiosum）病毒．属于痘病毒科副痘病毒属．能引起反刍动物和人发病．在我国西部地区流行比较广泛．是家畜疫病防控中重要的一种病原。
关键词 痘病毒 羊口疮 传染性脓疮 家畜疫病 西部地区 反刍动物 病原 防控
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