2010年全国家畜血吸虫病疫情状况 被引量：15

1

作者 刘金明 宋俊霞 +11 位作者 马世春 朱春霞 贺亮 周煜 刘一平 阳爱国 董国栋 任雪峰 池丽娟 石耀军 李浩 林矫矫 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第3期53-56,共4页

本文通报了2010年中国家畜血吸虫病疫情状况。在湖南省、湖北省、江西省、安徽省、江苏省、四川省、云南省7个流行省,共对715 733头牛、39 524只羊以及20 822头(匹)其他家畜用粪便毛蚴孵化法进行了检测,血吸虫阳性率分别为1.11%、1.00%... 本文通报了2010年中国家畜血吸虫病疫情状况。在湖南省、湖北省、江西省、安徽省、江苏省、四川省、云南省7个流行省,共对715 733头牛、39 524只羊以及20 822头(匹)其他家畜用粪便毛蚴孵化法进行了检测,血吸虫阳性率分别为1.11%、1.00%和0.03%。根据各省放牧家畜数和阳性率计算,全国共有14 980头(只、匹)家畜感染血吸虫,其中84.92%为病牛(12 721头)。从病牛的地域分布看,湖南省、湖北省、江西省、安徽省4省病牛数占全国病牛数的95.81%。调查结果显示病牛依然是血吸虫病疫区的主要传染源,湖沼型流行区是当前防控血吸虫病的重点地区。 展开更多

关键词 血吸虫病 家畜 疫情 中国

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中国家畜血吸虫病防治 被引量：12

2

作者 林矫矫 胡述光 刘金明 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第3期75-81,共7页

本文对家畜血防在中国血吸虫病防控中的作用与地位、家畜/农业血防发展历程以及中国血吸虫病防治科研进展、面临的主要难点与挑战等方面进行了论述,并对今后家畜血防工作提出了建议。

关键词 血吸虫 家畜 防治

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日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库的构建 被引量：8

3

作者 孙毅 贾人初 +7 位作者 刘金明 苑纯秀 石耀军 陆珂 傅志强 孙焕 蔡幼民 林矫矫 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期406-410,共5页

目的构建日本血吸虫成虫T7噬菌体展示cDNA文库。方法用Trizol试剂提取日本血吸虫成虫总RNA,分离纯化mRNA,经随机引物反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头,再用EcoRⅠ和HindⅢ消化,使其成为两端分别带有EcoRⅠ... 目的构建日本血吸虫成虫T7噬菌体展示cDNA文库。方法用Trizol试剂提取日本血吸虫成虫总RNA,分离纯化mRNA,经随机引物反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头,再用EcoRⅠ和HindⅢ消化,使其成为两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端的双链cDNA。收集300bp以上的双链cDNA片段,与T7Select 10-3b载体连接,经体外包装后,以大肠埃希菌BLT5403为宿主菌构建T7噬菌体展示cDNA文库。通过滴度测定及PCR技术鉴定文库质量,用7种特异性引物以PCR法从文库中钓取目的基因以检测文库的代表性。结果原始文库的库容量为4.98×106pfu,扩增后文库滴度为3.85×1011pfu/ml。对随机挑取的96个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为93.8%,其中95.6%的插入片段大于300bp。7种特异性引物均能从文库中钓取到日本血吸虫成虫相关基因。结论构建了日本血吸虫成虫T7噬菌体展示cDNA文库。 展开更多

关键词 日本血吸虫 噬菌体展示cDNA文库 成虫

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日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt-4基因的克隆、表达及功能分析 被引量：6

4

作者 陶丽红 姚利晓 +6 位作者 傅志强 冯新港 刘金明 石耀军 苑纯秀 蔡幼民 林矫矫 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期392-397,共6页

由Wnt基因家族产物与其它相关基因产物构成的Wnt信号通路,是细胞发育和生长调节的一个关键途径,对动物的发育特别是生殖系统的发育起重要的调节作用。在人类和小鼠中,Wnt4蛋白是性腺分化过程中主要调节因子,在胚胎发育中起着关键作用。... 由Wnt基因家族产物与其它相关基因产物构成的Wnt信号通路,是细胞发育和生长调节的一个关键途径,对动物的发育特别是生殖系统的发育起重要的调节作用。在人类和小鼠中,Wnt4蛋白是性腺分化过程中主要调节因子,在胚胎发育中起着关键作用。利用RACE技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个Wnt家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含1311bp,编码436个氨基酸,理论分子量49.6kD。同源性分析结果表明,该基因的氨基酸序列具有典型Wnt家族蛋白特征,与日本三角涡虫、人Wnt4的氨基酸序列相似性分别达43%、37%,推测为血吸虫的Wnt4基因,命名为Sjwnt4(GenBank登陆号DQ643829)。实时定量PCR分析显示该基因在14d童虫、19d童虫、31d虫体、44d雌虫及44d雄虫中均有表达,其中19d童虫中的表达量明显高于其它发育阶段,44d雌虫中的表达量明显高于雄虫。构建了该基因的原核表达载体pGEX-4T-2-Sjwnt4,应用大肠杆菌系统进行了表达,表达蛋白以包涵体形式存在,Western印迹显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别。Sjwnt4基因及其表达产物的获得,为探索Wnt信号通路对血吸虫发育、生殖的调节提供了重要基础。 展开更多

关键词 日本血吸虫 信号转导 Wnt4 发育 差异表达

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日本血吸虫磷酸甘油酸变位酶SjPGAM基因的克隆、表达及功能分析 被引量：5

5

作者 周岩 林矫矫 +6 位作者 姚利晓 王欣之 石耀军 陆珂 刘金明 傅志强 陶丽红 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1550-1555,共6页

磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglyceratemutas)是糖酵解过程中的一种重要酶,主要催化3-磷酸甘油酸转化为2-磷酸甘油酸。利用PCR技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个PGAM家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含753bp,编码250个氨基... 磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglyceratemutas)是糖酵解过程中的一种重要酶,主要催化3-磷酸甘油酸转化为2-磷酸甘油酸。利用PCR技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个PGAM家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含753bp,编码250个氨基酸,理论分子量28.26kD,理论等电点7.01。同源性分析结果表明,该基因的氨基酸序列具有典型PGAM家族特征,推测为血吸虫的PGAM基因,命名为SjPGAM(GenBank Accession No.EU374631)。实时定量PCR分析显示该基因在14d和19d童虫中的表达量明显高于其他发育阶段,42d雄虫中的表达量高于雌虫。构建了该基因的原核重组表达质粒pET-28a(+)-PGAM,在大肠杆菌系统中成功获得了表达,重组蛋白以包涵体形式存在,Western blotting显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别。SjPGAM基因及其表达产物的获得,为探索PGAM基因家族在血吸虫能量代谢过程中碳水化合物转运、新陈代谢调节和生长发育提供了重要基础。 展开更多

关键词 日本血吸虫 糖酵解 磷酸甘油酸变位酶 克隆

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实现2015年家畜血吸虫病疫情控制目标的风险分析 被引量：5

6

作者 刘金明 朱春霞 +13 位作者 喻华 周煜 刘一平 阳爱国 董国栋 池丽娟 石耀军 李浩 金亚美 傅志强 马世春 陈国胜 胡述光 林矫矫 《中国动物传染病学报》 CAS 2013年第2期61-67,共7页

作者于2012年采用问卷调查和现场调查相结合的方式,在湖南、湖北、江西、安徽、四川和云南6省28个县调研家畜血吸虫病疫情分析实现国务院提出的2015年控制目标的风险态势和主要风险因素。结果显示,如果未采取特别措施,家畜血吸虫病疫情... 作者于2012年采用问卷调查和现场调查相结合的方式,在湖南、湖北、江西、安徽、四川和云南6省28个县调研家畜血吸虫病疫情分析实现国务院提出的2015年控制目标的风险态势和主要风险因素。结果显示,如果未采取特别措施,家畜血吸虫病疫情要在全国范围内全面实现2015年控制目标的风险态势极为严峻。对20种主要风险因素重要性、风险因素可控度(即通过努力,到2015年能否根本改变)和13项措施的重要性得分进行统计分析后,提出了5点控制风险的对策建议。 展开更多

关键词 血吸虫病 家畜 风险分析

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农业部家畜血吸虫病流行病学观测点2011年观测结果情况 被引量：3

7

作者 石耀军 李浩 +23 位作者 林矫矫 郭成玲 朱春霞 贺亮 董长华 周煜 田慧云 曹晋蓉 刘一平 阳爱国 郭莉 董国栋 马坤 任雪枫 王玉龙 傅志强 陆珂 朱传刚 杨健美 金亚美 苑纯秀 程国锋 冯新港 刘金明 《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第3期82-86,共5页

2011年对8个家畜血吸虫病观测点血吸虫感染、野粪污染情况以及螺情进行了调查。全年共检测了21 091头牛、1425只羊以及1760头(匹)其他家畜,血吸虫病感染率分别为0.42%、0.63%和0%。在97头(只)感染家畜中,90.72%(88头)为牛,9.28%(9只)为... 2011年对8个家畜血吸虫病观测点血吸虫感染、野粪污染情况以及螺情进行了调查。全年共检测了21 091头牛、1425只羊以及1760头(匹)其他家畜,血吸虫病感染率分别为0.42%、0.63%和0%。在97头(只)感染家畜中,90.72%(88头)为牛,9.28%(9只)为羊。江西省吴城镇和湖南省南大膳镇的牛血吸虫感染率超过4%。在湖南省和江西省的观测点中发现家畜粪便有血吸虫虫卵污染,其中96.15%阳性野粪为牛粪。所有观测点都有钉螺分布,但阳性钉螺主要分布在湖南省和江西省的观测点。观测结果显示湖南省洞庭湖和江西省鄱阳湖地区是目前防控家畜血吸虫病的重点地区,且病牛依然是血吸虫病疫区(尤其是湖沼型地区)的主要传染源。 展开更多

关键词 家畜 血吸虫病 疫情调查

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家畜血吸虫病查治方案实施情况、投入与需求情况调查分析 被引量：3

8

作者 刘金明 喻华 +14 位作者 刘一平 周煜 阳爱国 董国栋 朱春霞 池丽娟 石耀军 李浩 金亚美 陆珂 傅志强 马世春 陈国胜 胡述光 林矫矫 《中国动物传染病学报》 CAS 2013年第4期33-39,共7页

采用问卷调查方式,于2012年在湖南省、湖北省、江西省、安徽省、四川省和云南省的28个县开展目前家畜血吸虫病查治方案及实施状况、需求与投入状况调查。通过对诊断和治疗状况、治疗实施主体、时间节点、需求和投入等分析,得出如下三点... 采用问卷调查方式,于2012年在湖南省、湖北省、江西省、安徽省、四川省和云南省的28个县开展目前家畜血吸虫病查治方案及实施状况、需求与投入状况调查。通过对诊断和治疗状况、治疗实施主体、时间节点、需求和投入等分析,得出如下三点结论:家畜血吸虫病查治投入严重不足,羊血吸虫病查治没有引起足够重视和家畜血吸虫病查治方案有待优化。 展开更多

关键词 血吸虫病 家畜 查治方案 投入 需求

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东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库的构建 被引量：4

9

作者 贾人初 孙毅 +8 位作者 刘金明 苑纯秀 傅志强 石耀军 陆珂 孙焕 李浩 蔡幼民 林矫矫 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2007年第4期252-256,共5页

目的构建东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫感染抗性相关基因奠定基础。方法用TRIzol试剂提取东方田鼠肺脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoR Ⅰ/Hind Ⅲ接头并用EcoR Ⅰ和H... 目的构建东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫感染抗性相关基因奠定基础。方法用TRIzol试剂提取东方田鼠肺脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoR Ⅰ/Hind Ⅲ接头并用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ消化,使其两端分别带EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ黏性末端。用Mini Column纯化,收集300bp以上的双链cDNA片段,再连接于带有EcoR和Hind末端的T7 Select 10-3b载体,经体外包装后,以BLT5403为受体菌构建T7噬菌体展示cDNA文库。结果经测定,库容量为1.5×106pfu,扩增后文库滴度为1.1×1012pfu/ml。对从原始文库中随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为91%,阳性克隆片段长度分布在200-1500bp,其中有90%的插入片段〉300bp。结论成功构建了东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库。 展开更多

关键词 日本血吸虫 T7噬菌体展示cDNA文库 东方田鼠 肺脏

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东方田鼠血清筛选噬菌体展示抗原对小鼠日本血吸虫病免疫效果观察 被引量：4

10

作者 宋震宇 刘金明 +6 位作者 何金桃 孙帅 石耀军 李浩 陆珂 林矫矫 岳城 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期963-968,共6页

本研究利用前期研究中东方田鼠血清筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库获得的10个阳性克隆中的8个噬菌体克隆单独或联合免疫BALB/c小鼠,观察对日本血吸虫病的免疫预防效果,以筛选其中具有发展成疫苗的候选抗原编码基因。研究发现与... 本研究利用前期研究中东方田鼠血清筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库获得的10个阳性克隆中的8个噬菌体克隆单独或联合免疫BALB/c小鼠,观察对日本血吸虫病的免疫预防效果,以筛选其中具有发展成疫苗的候选抗原编码基因。研究发现与空白对照组相比,展示血吸虫锌指蛋白的1号噬菌体克隆免疫组在两次实验中分别获得了32.10%和31.25%的减虫率、61.14%和47.31%的肝脏减卵率,虫体合抱率分别由92.59%、57.39%下降到69.09%、41.03%;其它噬菌体克隆单独免疫组或联合免疫组在第一次实验中均获得了8.02%～32.72%的减虫率和40.19%～69.53%的减卵率,但在第二次实验中未能得到验证。研究结果提示,日本血吸虫环状锌指蛋白(1号克隆)编码基因在疫苗方面具有重要研究价值。 展开更多

关键词 日本血吸虫 噬菌体展示抗原 免疫 环状锌指蛋白

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日本血吸虫抱雌沟蛋白筛选噬菌体展示抗原对小鼠血吸虫病免疫效果观察 被引量：3

11

作者 何金桃 金亚美 +4 位作者 刘金明 吴启进 宋震宇 石耀军 岳城 《新疆农业大学学报》 CAS 北大核心 2009年第5期1-5,共5页

在前期研究中我们利用日本血吸虫抱雌沟蛋白筛选日本血吸虫噬菌体展示cDNA文库,共获得10种阳性噬菌体克隆。本研究选择其中5种噬菌体克隆单独或联合免疫小鼠,观察其对血吸虫成虫合抱的影响以及对血吸虫病的免疫预防效果。结果显示,19号... 在前期研究中我们利用日本血吸虫抱雌沟蛋白筛选日本血吸虫噬菌体展示cDNA文库,共获得10种阳性噬菌体克隆。本研究选择其中5种噬菌体克隆单独或联合免疫小鼠,观察其对血吸虫成虫合抱的影响以及对血吸虫病的免疫预防效果。结果显示,19号克隆单独免疫和6号、18号混合免疫在预防实验中分别取得了40.53%和31.14%的减虫率及35.31%,44.65%的肝脏减卵率。研究结果提示,19号、6号和18号噬菌体展示的EST序列编码基因具有一定的抗血吸虫生殖免疫效果,在血吸虫疫苗研究方面具有重要价值。 展开更多

关键词 日本血吸虫 噬菌体展示抗原 小鼠 免疫

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酵母双杂交诱饵蛋白日本血吸虫抱雌沟蛋白重组质粒的构建及鉴定 被引量：3

12

作者 吴启进 金亚美 +4 位作者 李勉 刘金明 王小波 石火英 林矫矫 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第3期51-55,共5页

为筛选与血吸虫抱雌沟蛋白相互作用的因子,本研究以抱雌沟蛋白(gynecophoral canal protein ofSchistosoma japonicum,SjGCP)为诱饵蛋白构建了用于酵母双杂交筛选系统的重组质粒。根据日本血吸虫抱雌沟蛋白的基因序列设计引物,经过PCR... 为筛选与血吸虫抱雌沟蛋白相互作用的因子,本研究以抱雌沟蛋白(gynecophoral canal protein ofSchistosoma japonicum,SjGCP)为诱饵蛋白构建了用于酵母双杂交筛选系统的重组质粒。根据日本血吸虫抱雌沟蛋白的基因序列设计引物,经过PCR扩增、酶切回收,与经相应酶切的线性化载体pBGKT7-BD连接构建重组质粒。随后将重组质粒pGBKT7-BD-SjGCP转化酵母菌株,测定融合蛋白BD-SjGCP在酵母菌中的自激活活性、对酵母菌生长的影响及在酵母中的表达情况。结果显示构建的重组诱饵蛋白质粒pGBKT7-BD-SjGCP能够在酵母细胞内正确表达,没有独自激活报告基因表达的活性,且其表达对酵母细胞没有毒性,不影响酵母细胞的生长。可见,重组质粒pGBKT7-BD-SjGCP可用于筛选与血吸虫抱雌沟蛋白相互作用的物质。 展开更多

关键词 酵母双杂交技术 抱雌沟蛋白 自激活

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日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt10a基因的克隆及其在童虫和成虫中mRNA表达量的变化 被引量：1

13

作者 陶丽红 姚丽晓 +6 位作者 苑纯秀 傅志强 冯新港 刘金明 石耀军 蔡幼民 林矫矫 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期93-97,共5页

利用RACE技术从19日龄的日本血吸虫童虫中扩增了1个Wnt家族基因,并对其进行了生物信息学分析。同源性分析表明,该基因为日本血吸虫新基因,完整开放阅读框(ORF)长1896 bp,编码631个氨基酸,理论分子质量为73.3 ku。该基因编码的氨基酸序... 利用RACE技术从19日龄的日本血吸虫童虫中扩增了1个Wnt家族基因,并对其进行了生物信息学分析。同源性分析表明,该基因为日本血吸虫新基因,完整开放阅读框(ORF)长1896 bp,编码631个氨基酸,理论分子质量为73.3 ku。该基因编码的氨基酸序列具有Wnt家族蛋白的典型特征,与人、鼠Wnt10a的氨基酸序列同源性均为26%,推测为血吸虫的Wnt10a基因,命名为Sjwnt10a(Gen BanK登录号DQ643829)。利用实时荧光定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体中的表达情况,结果显示该基因在19日龄的日本血吸虫童虫中表达量最高,在14日龄童虫和44日龄雄虫中也有表达,但分别仅为19日龄童虫表达量的8.8%和5.0%,而在31日龄成虫和44日龄雌虫中没有检测到该基因。结果提示,童虫差异表达的Sjwnt10a基因可能对童虫的生长、发育至关重要。 展开更多

关键词 日本血吸虫 信号转导 Sjwnt10a基因 差异表达

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洲垸型地区牛血吸虫病流行动态分析 被引量：3

14

作者 石耀军 陆珂 +6 位作者 王兰平 李浩 朱春霞 刘金明 刘竹清 曾少才 康赛娥 《中国兽医寄生虫病》 2008年第5期24-30,共7页

目的分析1993~2007年两个洲垸型血吸虫病流行病学观测点调查数据,评估各种防治措施实施的效果,为策划和调整防治对策提供科学依据。方法根据＂观测点方案＂要求开展人、畜血吸虫病疫情、螺情、野粪等调查,统计分析各项指标。结果2个洲... 目的分析1993~2007年两个洲垸型血吸虫病流行病学观测点调查数据,评估各种防治措施实施的效果,为策划和调整防治对策提供科学依据。方法根据＂观测点方案＂要求开展人、畜血吸虫病疫情、螺情、野粪等调查,统计分析各项指标。结果2个洲垸型观测点耕牛血吸虫病感染率分别由设点时（1993年）的28.5%和11.99%下降至2007年的6.13%和2.83%,人群血吸虫病血检阳性率仍在高水平上徘徊,垸内残存螺点极少且找不到感染性钉螺,垸外螺情变化不大。结论调查表明洲垸型地区仍是我国血吸虫病流行最严重的地区,垸外钉螺面积大,密度高,难以实施有效的药物灭螺,耕牛常年在湖洲上放牧感染血吸虫病并传播病原,这类地区是以畜源性为主的血吸虫病流行区,只有加强对放牧家畜的管理,才能有效地控制血吸虫病疫情。 展开更多

关键词 血吸虫病 洲垸型 流行病学调查 动态分析

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日本血吸虫童虫裂解物对东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库的筛选及阳性克隆分析 被引量：2

15

作者 贾人初 孙毅 +8 位作者 刘金明 傅志强 苑纯秀 石耀军 陆珂 孙焕 李浩 金亚美 林矫矫 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期733-739,共7页

东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为筛选和分析东方田鼠抗血吸虫抗性相关基因,以日本血吸虫童虫可溶性裂解物为探针,筛选东方田鼠肝脏噬菌体展示cDNA文库。经三轮筛选,特异性噬菌体得到有效富集(375倍)。随机挑取92个克隆进行序列测定,... 东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为筛选和分析东方田鼠抗血吸虫抗性相关基因,以日本血吸虫童虫可溶性裂解物为探针,筛选东方田鼠肝脏噬菌体展示cDNA文库。经三轮筛选,特异性噬菌体得到有效富集(375倍)。随机挑取92个克隆进行序列测定,获得了19条有效EST序列。其中13个条EST序列与已知基因或表达序列标签同源,6个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,为新的表达序列标签。将19个EST序列的阳性噬菌体克隆和血吸虫童虫共培养,其中4号(GenBank Accession No.:EW968294)、13号(GenBank Accession No.:EW968303)、14号(GenBank Accession No.:EW968304)、15号(GenBank Accession No.:EW968305)、18号(GenBank Accession No.:EW968308)克隆均诱导了显著的杀虫效果。综合生物信息学分析结果及体外杀伤试验结果,编码CASP8和FADD类似性细胞程序性死亡调节蛋白、α-2-HS-糖蛋白、M4蛋白、具有R3H结构域的一种mRNA结合蛋白以及三种未知蛋白的编码基因(14、15、18号克隆)可能是东方田鼠抗血吸虫病抗性相关基因。为进一步研究东方田鼠抗血吸虫机理奠定了基础。 展开更多

关键词 日本血吸虫 东方田鼠 肝脏 噬菌体展示cDNA文库 抗性基因

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东方田鼠肝脏裂解物筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库 被引量：2

16

作者 孙焕 刘金明 +6 位作者 孙帅 宋震宇 石耀军 陆珂 李浩 金亚美 林矫矫 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期592-596,617,共6页

东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为寻找东方田鼠抗血吸虫抗性相关靶基因,探索其分子机理,我们将日本血吸虫童虫与东方田鼠不同组织/器官裂解物共培养,比较它们对血吸虫童虫的杀伤效果,之后,以杀伤效果较好的肝脏裂解物为探针,以亲和淘... 东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为寻找东方田鼠抗血吸虫抗性相关靶基因,探索其分子机理,我们将日本血吸虫童虫与东方田鼠不同组织/器官裂解物共培养,比较它们对血吸虫童虫的杀伤效果,之后,以杀伤效果较好的肝脏裂解物为探针,以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫(44d)噬菌体展示cDNA文库。经三轮筛选后,随机挑取92个噬菌体克隆进行序列测定及生物信息学分析,获得了19个有效EST序列,其中15条EST序列与已知基因或表达序列标签同源,4个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,为新的表达序列标签。对19个有效EST编码蛋白的功能预测结果显示,其中6个为卵壳蛋白(Eggshell protein)相关基因,10个EST及其编码蛋白的功能与血吸虫基因表达调控及蛋白质加工修饰相关。研究结果提示,东方田鼠直接或间接地影响血吸虫基因表达,进而影响血吸虫的发育,可能是东方田鼠具有抗血吸虫特性的一个重要分子机理。 展开更多

关键词 日本血吸虫 东方田鼠 筛选 噬菌体展示cDNA文库

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间接血凝诊断家畜日本血吸虫病试剂的改进研究 被引量：2

17

作者 石耀军 李浩 +6 位作者 刘一平 吴庆东 陆珂 刘金明 朱传刚 汪彤 林矫矫 《中国兽医寄生虫病》 2007年第6期21-23,共3页

目的提供便于在现场诊断家畜血吸虫病的试剂。方法在原"间血"国家标准的基础上,将提取虫卵方法改为胰蛋白酶和胶原酶消化的方法,并将水剂抗原改为冻干抗原制备。结果按改进方法制备的诊断试剂(冻干)提高了诊断的准确性,阳性... 目的提供便于在现场诊断家畜血吸虫病的试剂。方法在原"间血"国家标准的基础上,将提取虫卵方法改为胰蛋白酶和胶原酶消化的方法,并将水剂抗原改为冻干抗原制备。结果按改进方法制备的诊断试剂(冻干)提高了诊断的准确性,阳性和阴性符合率均在95%以上,达到了诊断试剂检测家畜血吸虫病的药政要求[1],且更易保存。结论按新方法制备的诊断试剂可作为我国疫区家畜血吸虫病检测和传播阻断地区疫情监测的首选。 展开更多

关键词 血吸虫病 检测 间接血凝

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2012年家畜血吸虫病流行病学观测点观测情况通报

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作者 石耀军 李浩 +24 位作者 陆珂 贺亮 董长华 郭成玲 朱春霞 周煜 田慧云 曹晋蓉 刘一平 阳爱国 郭莉 董国栋 马坤 王玉龙 傅志强 朱传刚 杨健美 金亚美 程国锋 冯新港 苑纯秀 洪炀 罗荣 林矫矫 刘金明 《中国动物传染病学报》 CAS 2013年第4期57-60,共4页

2012年,在8个家畜血吸虫病观测点共检测了8170头牛、479只羊以及569头(匹)其他家畜,血吸虫病感染率分别为0.92%、1.88%和0%。在75头病牛中,年龄小于3岁的占72%(54头),低感染度(+、++)的占81.3%(61头)。江西省吴城和湖南省南大膳的牛血... 2012年,在8个家畜血吸虫病观测点共检测了8170头牛、479只羊以及569头(匹)其他家畜,血吸虫病感染率分别为0.92%、1.88%和0%。在75头病牛中,年龄小于3岁的占72%(54头),低感染度(+、++)的占81.3%(61头)。江西省吴城和湖南省南大膳的牛血吸虫感染率在3%以上。阳性野粪(全部为牛粪)和阳性钉螺均只在湖南省和江西省的观测点中发现。观测结果显示湖南省洞庭湖和江西省鄱阳湖地区牛血吸虫病的防控仍是目前农业血防的难点和重点。 展开更多

关键词 家畜 血吸虫病 疫情调查

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日本血吸虫Sjzfp1基因的克隆表达及其表达产物的免疫效果 被引量：1

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作者 邢荣鹤 宋震宇 +5 位作者 刘金明 王素娟 石耀军 李浩 林矫矫 岳城 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期835-841,共7页

以PCR技术从日本血吸虫成虫mRNA反转录制备的cDNA中克隆日本血吸虫锌指蛋白编码基因Sjzfp1以及181～786bp的DNA片段,分别以pGEX-4T和pET-28a(+)为表达载体制备重组抗原rSjzfp1/GST和rSjzfp1-1/His。将重组抗原与206佐剂混合后免疫小鼠,... 以PCR技术从日本血吸虫成虫mRNA反转录制备的cDNA中克隆日本血吸虫锌指蛋白编码基因Sjzfp1以及181～786bp的DNA片段,分别以pGEX-4T和pET-28a(+)为表达载体制备重组抗原rSjzfp1/GST和rSjzfp1-1/His。将重组抗原与206佐剂混合后免疫小鼠,观察免疫预防效果。利用实时荧光定量PCR法检测Sjzfp1在不同发育期虫体中的表达情况。结果显示,获得了日本血吸虫Sjzfp1基因全长序列,其ORF为1017bp,编码338个氨基酸,推导的理论分子质量为38.5ku。生物信息学分析显示Sjzfp1为日本血吸虫环形锌指蛋白或PHD型锌指蛋白。以rSjzfp1/GST和rSjzfp1-1/His免疫小鼠,诱导的减虫率分别为50.43%和17.85%,肝虫卵减少率分别为72.64%和15.96%。实时荧光定量PCR分析表明Sjzfp1基因在各发育期虫体中均有表达,其中在尾蚴和毛蚴中表达量较高,在终末宿主体内各发育期虫体中,以42d成虫表达量最高。结果表明,Sjzfp1基因在抗血吸虫疫苗研究中具有进一步研究的潜力。 展开更多

关键词 日本血吸虫 Sjzfp1基因 克隆 表达 免疫保护

原文传递

阳性水牛、黄牛IgG筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库 被引量：1

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作者 冯金涛 韩愉 +8 位作者 袁炜 张欣 许瑞 李浩 陆珂 金亚美 林矫矫 程国锋 刘金明 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2016年第2期62-67,共6页

为寻找有效的家畜日本血吸虫病诊断抗原,从感染日本血吸虫的水牛、黄牛血清中纯化IgG,以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫(44日龄)噬菌体展示c DNA文库。经每种动物IgG三轮(总计六轮)筛选后,随机挑取53个阳性噬菌体克隆进行序列测定及生... 为寻找有效的家畜日本血吸虫病诊断抗原,从感染日本血吸虫的水牛、黄牛血清中纯化IgG,以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫(44日龄)噬菌体展示c DNA文库。经每种动物IgG三轮(总计六轮)筛选后,随机挑取53个阳性噬菌体克隆进行序列测定及生物信息学分析。获得了9个EST序列,其中7个EST序列与已知基因或表达序列标签同源,2个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,以噬菌体展示载体的10B衣壳蛋白开放阅读框(open reading frame,ORF)为依据,对上述7个与Gen Bank数据库资料同源的EST进行对码分析,结果 7个EST序列能和噬菌体展示载体阅读框对码,为有效展示序列。其中3个EST具有较高的重复度,在51个有效克隆中,25个为HSP70 homolog基因,15个为Keratin9基因有重复,6个为Ornithine--oxo-acid transaminase基因。研究结果显示,HSP70 homolog基因、Keratin9基因和Ornithine--oxo-acid transaminase基因作为诊断家畜血吸虫病候选抗原基因,值得进一步开展克隆、表达和诊断效果评估方面的研究。 展开更多

关键词 日本血吸虫 水牛 黄牛 筛选 噬菌体展示c DNA文库

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