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5-脱氧杂氮胞苷抑制肝癌细胞株生物学行为的机制 被引量：9
1
作者 刘丽华 肖文华 杨金亮 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第4期420-423,共4页
目的 DNA甲基化模式的改变伴随着永生性细胞系的确立,生长调控基因CpG岛的重新甲基化可能导致了其转录的不活跃,在体外培养的情况下,使得肿瘤细胞选择了有利于生长的条件,我们用DNA甲基转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷处理两株肝癌细胞,研... 目的 DNA甲基化模式的改变伴随着永生性细胞系的确立,生长调控基因CpG岛的重新甲基化可能导致了其转录的不活跃,在体外培养的情况下,使得肿瘤细胞选择了有利于生长的条件,我们用DNA甲基转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷处理两株肝癌细胞,研究其对肝癌细胞的影响,探讨DNA甲基化异常与肝细胞癌间的相关性及5-脱氧杂氮胞苷对肝癌细胞株恶性生物学行为的影响及其机制。 方法 用5-脱氧杂氮胞苷处理肝癌细胞株SMMC-7721和HePG2,然后采用相差显微镜观察药物处理前后细胞的形态变化,采用MTT法观察细胞的生长速度变化,采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率、P16蛋白表达的变化,采用RT-PCR法比较p16和甲基转移酶mRNA表达量的变化,比较裸鼠致瘤性的大小。 结果 5-脱氧杂氮胞苷处理后细胞形态趋于规则,生长速度减慢,SMMC-7721细胞,G1期细胞增加了8.5％,而S期和C_2/M朗细胞分别减少了47.8％和10.4％,HePG2细胞,G_1期细胞增加了3.5％,S期减少了46.2％,G_2/M期增加了23.7％,两细胞凋亡率分别增加了91.6％和133.3％,P16蛋白表达分别增加了23.4％和20.9％,p16 mRNA表达增高,而DNA甲基转移酶mRNA表达明显降低,裸鼠皮下移植瘤生长减慢。 结论 肝细胞癌的发生与DNA甲基化异常有关,甲基化酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷可能通过抑制甲? 展开更多
关键词 肝肿瘤细胞株 5-脱氧杂氮胞苷 甲基转移酶
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应用RNA干扰沉默血管内皮生长因子基因抑制HCT116细胞增殖的实验研究 被引量：1
2
作者 吕伟 张超 +2 位作者 郭红 刘伟 郝迎学 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第24期2870-2873,共4页
目的:观察Pavu6+27-VEGFsiRNA重组体在细胞体内表达的血管内皮生长因子短发夹状RNA(shRNA)能否有效地抑制人大肠癌HCT116细胞株的增殖.方法:将自行构建的表达短发夹状RNA的重组质粒转染到大肠癌HCT116细胞株中,以空质粒Pavu6+27转染为对... 目的:观察Pavu6+27-VEGFsiRNA重组体在细胞体内表达的血管内皮生长因子短发夹状RNA(shRNA)能否有效地抑制人大肠癌HCT116细胞株的增殖.方法:将自行构建的表达短发夹状RNA的重组质粒转染到大肠癌HCT116细胞株中,以空质粒Pavu6+27转染为对照,经G418筛选,流式细胞技术分析细胞周期分布,MTT比色法检测细胞的生长抑制率.结果:Pavu6+27-VEGFsiRNA重组体能有效地抑制HCT116细胞株的生长增殖,24、48、72h移植率分别为15.32±2.02%、28.54±3.29%、40.32±3.56%,与对照组(5.64±1.42%、8.65±2.30%、15.32±3.52%)相比有显著差异(P<0.05).细胞周期中G0/G1比例升高,S期比例明显下降,而空质粒Pavu6+27转染对HCT116细胞株增殖无抑制作用,对细胞周期改变无影响.结论:Pavu6+27-VEGFsiRNA重组体在细胞内表达的短发夹状RNA能有效抑制人大肠癌细胞的增殖,为质粒介导的RNAi技术运用于大肠癌的基因治疗提供一定的实验依据. 展开更多
关键词 RNA干扰 短发夹状RN&血管内皮生长因子 细胞增殖
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