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中国不同来源狂犬病病毒野毒株G基因主要功能区的序列分析 被引量：11
1
作者 钱爱东 侯世宽 +3 位作者 何昭阳 李红卫 涂长春 殷震 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期262-267,共6页
对我国不同来源的狂犬病病毒野毒株８２０２、ＢＲＶ、ＭＲＶ的Ｇ基因４０５～１１４６位核苷酸序列，进行了逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增、克隆和序列测定，并应用计算机对这３个毒株的测定序列和已发表的中国人源毒株（... 对我国不同来源的狂犬病病毒野毒株８２０２、ＢＲＶ、ＭＲＶ的Ｇ基因４０５～１１４６位核苷酸序列，进行了逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增、克隆和序列测定，并应用计算机对这３个毒株的测定序列和已发表的中国人源毒株（ＣＧＸ８９）的相应序列进行了分析比较。结果表明，这４个中国不同来源狂犬病病毒的Ｇ基因同源性较低，８２０２与ＢＲＶ的核苷酸同源性只有７９．５％，与ＭＲＶ的氨基酸同源性亦只有８２．２％；同一地区自不同动物分离的ＭＲＶ株与ＢＲＶ株其亲缘关系较远。４个野毒株的糖基化位点和主要的诱导中和抗体产生的抗原决定簇内某些氨基酸亦不同，从而证明我国存在亲缘关系较远的狂犬病野毒株。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 糖蛋白基因 RT-PCR 克隆 测序
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MTT法和FCM测定鼠淋巴细胞功能和亚类数量方法的建立
2
作者 陈创夫 余兴龙 +3 位作者 李敏 高申 乔军 马正海 《塔里木大学学报》 1999年第3期1-5,共5页
建立了应用MTT法和FCM技术分别测定鼠淋巴细胞功能和T淋巴细胞亚类数量的方法。MTT法条件：ConA和LPS诱导剂量为20μg／ml，37℃作用48小时。MTT用量20μl，37℃作用4小时、FCM技术条件：抗鼠T淋巴细胞表面抗原CD4+、CD8+抗体用量0．1μ... 建立了应用MTT法和FCM技术分别测定鼠淋巴细胞功能和T淋巴细胞亚类数量的方法。MTT法条件：ConA和LPS诱导剂量为20μg／ml，37℃作用48小时。MTT用量20μl，37℃作用4小时、FCM技术条件：抗鼠T淋巴细胞表面抗原CD4+、CD8+抗体用量0．1μg，4℃C作用1小时。通过实验表明两种方法确实可行，数据稳定可靠。 展开更多
关键词 鼠 MTT法 淋巴细胞功能 FCM技术 CD44+ CD8+
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基因导入的脂质体转染法和磷酸钙转染法之比较 被引量：14
3
作者 李华 刘维全 +1 位作者 王太一 殷震 《中国实验动物学杂志》 2000年第2期65-68,共4页
将外源基因导入真核细胞的方法很多。我们通过对绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因在真核细胞中表达的研究 ,比较了较常用的两种方法—脂质体转染法和磷酸钙转染法。研究结果表明 :脂质体转染法的转染效率较磷酸钙转染法高 ,且简单易行 ,是外... 将外源基因导入真核细胞的方法很多。我们通过对绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因在真核细胞中表达的研究 ,比较了较常用的两种方法—脂质体转染法和磷酸钙转染法。研究结果表明 :脂质体转染法的转染效率较磷酸钙转染法高 ,且简单易行 ,是外源基因导入体外培养细胞内较理想的方法。 展开更多
关键词 磷酸钙转染法 脂质体转染法 真核细胞 体外培养细胞 转染效率 研究结果 表达 绿色荧光蛋白(GFP) 报告基因 外源基因
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用杆状病毒表达系统表达的HIV-2 gp105和gp36的反应原性与抗原特异性分析 被引量：3
4
作者 张应玖 金宁一 +3 位作者 王宏伟 黄薇 张东威 沈家骢 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期105-107,共3页
用ELISA方法分析由杆状病毒 昆虫细胞表达系统表达的HIV 2外膜蛋白gp1 0 5和跨膜蛋白gp36的反应原性和特异性 .结果表明 ,二者均具有很好的反应原性和抗原特异性 。
关键词 人体免疫缺陷病毒Ⅱ型 外膜蛋白gp105 跨膜蛋白gp36 反应原性 抗原特性 基因表达 杆状病毒
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类风湿性关节炎的基因治疗 被引量：1
5
作者 李华 刘维全 殷震 《生物技术》 CAS CSCD 2000年第4期39-42,共4页
关键词 类风湿性关节炎 细胞机制 基因治疗
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表达HIV-1 gp160膜蛋白靶细胞的制备及鉴定 被引量：1
6
作者 王宏 金宁一 +3 位作者 金洪涛 徐一鸣 张立树 宋英今 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期155-157,共3页
目的获得表达INV-1 gp160膜蛋白的靶细胞,用于HIV-1特异性细胞毒性淋巴细胞(CTL)和抗HIV-1重组毒素细胞杀伤活性检测。方法采用PCR方法,从质粒pJen 10中扩增HIV-1 gp160基因,插入pGEM-T载体,测序后克隆入pIRESl neo载体中构建成重组质粒... 目的获得表达INV-1 gp160膜蛋白的靶细胞,用于HIV-1特异性细胞毒性淋巴细胞(CTL)和抗HIV-1重组毒素细胞杀伤活性检测。方法采用PCR方法,从质粒pJen 10中扩增HIV-1 gp160基因,插入pGEM-T载体,测序后克隆入pIRESl neo载体中构建成重组质粒pIRE160,酶切鉴定正确后,转染人肝癌细胞(SMMG-7721),CA18加压筛选至细胞不再死亡为止,并采用Western blot和间接免疫荧光法对制备的靶细胞进行检测。结果HIV-1 gp160在SMMC7721表面表达,并裂解为gp120和gp41蛋白。结论已成功得到稳定表达HIV-1 gp160的靶细胞,且表达的蛋白具有良好的特异性。 展开更多
关键词 HIV-1 gp160 膜蛋白 靶细胞 特异性细胞毒性淋巴细胞 毒素 人类获得性免疫缺陷综合征
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