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左归丸对去卵巢致骨质疏松症模型大鼠破骨细胞活性及miR-133b-3p/RhoA表达的影响 被引量：1
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作者 黄浩然 冯艳华 +7 位作者 王如然 黄胜男 许华颖 崔彦江 王玉红 李宏燕 曹戬 徐国营 《国际中医中药杂志》 2023年第9期1119-1126,共8页
目的研究左归丸对去卵巢致骨质疏松症大鼠破骨细胞中miR-133b-3p、RAS同源基因家族成员A(RhoA)表达的影响,探讨其作用机制。方法将SD雌性大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、假手术组、左归丸组,每组6只。模型组、左归丸组采用卵巢... 目的研究左归丸对去卵巢致骨质疏松症大鼠破骨细胞中miR-133b-3p、RAS同源基因家族成员A(RhoA)表达的影响,探讨其作用机制。方法将SD雌性大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、假手术组、左归丸组,每组6只。模型组、左归丸组采用卵巢切除术构建大鼠骨质疏松症模型。左归丸组灌胃左归丸水煎液10 g/kg,连续灌胃12周。采用比色法测定大鼠血清钙、磷水平,ELISA法检测ALP水平;骨密度仪检测各组大鼠股骨骨密度。培养各组破骨细胞,采用Western blot法检测RANKL、RUNX2蛋白表达。对各组大鼠骨组织进行miRNA测序及差异表达分析。采用miR-133b-3p类似物及其对照处理破骨细胞,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)方法检测破骨细胞增殖活力,采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞活性,双荧光素酶报告基因实验检测miR-133b-3p与RhoA的靶向关系,采用miR-133b-3p类似物及RhoA共表达的"挽救"实验研究左归丸影响破骨细胞活性的分子调控机制。结果与模型组比较,左归丸组骨密度增加(P<0.05或P<0.01),血清钙、磷水平增加(P<0.05),ALP水平下降(P<0.05),RANKL蛋白表达下降(P<0.01),RUNX2蛋白表达增加(P<0.05)。测序结果显示,左归丸组骨质疏松大鼠破骨细胞中rno-miR-133b-3p表达下调幅度最大(P<0.01)。左归丸组破骨细胞miR-133b-3p表达低于模型组。miR-133b-3p过表达可促进破骨细胞增殖和分化,RhoA过表达可逆转由miR-133b-3p过表达所引起的破骨细胞过度增殖和分化。结论RhoA是miR-133b-3p调控的靶基因,左归丸通过调控miR-133b-3p/RhoA抑制破骨细胞活性,从而缓解骨质疏松症状。 展开更多
关键词 左归丸 骨质疏松 miR-133b-3p 破骨细胞 细胞增殖 细胞分化
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miR-30a-5p通过靶向Runx2基因抑制成骨细胞分化 被引量：5
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作者 王如然 黄胜男 +8 位作者 曹戬 许华颖 李宏燕 黄浩然 赵杉 王玉红 冯艳华 徐国营 韩兵 《生物技术通讯》 CAS 2020年第2期142-147,共6页
目的:构建绝经后骨质疏松大鼠模型,分析miR-30a-5p在成骨细胞分化中的功能。方法:将SD大鼠分为雌激素组、假手术组和模型组;取胫骨组织进行miRNA测序并差异表达分析;检测miR-30a-5p在各组大鼠骨中的表达含量;通过qRT-PCR检测miR-30a-5p... 目的:构建绝经后骨质疏松大鼠模型,分析miR-30a-5p在成骨细胞分化中的功能。方法:将SD大鼠分为雌激素组、假手术组和模型组;取胫骨组织进行miRNA测序并差异表达分析;检测miR-30a-5p在各组大鼠骨中的表达含量;通过qRT-PCR检测miR-30a-5p表达对成骨分化标记相关蛋白胶原Ⅰ、骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)表达的影响,同时检测对碱性磷酸酶(ALP)活性的影响;双萤光素酶报告基因检测miR-30a-5p对RUNT相关转录因子2(Runx2)的靶向调控作用。结果:miRNA测序分析结果显示,相对于假手术组、雌激素组,模型组有33种共同miRNA表达上调,选取miR-30a-5p作为本研究对象;qRT-PCR进一步验证miR-30a-5p在模型组骨组织中高表达;miR-30a-5p靶向抑制Runx2的表达,且能够抑制OCN、OPN和胶原Ⅰ的表达,降低ALP活性;而同时过表达Runx2后,OCN、OPN和胶原Ⅰ的表达升高,ALP活性增加,Runx2过表达部分缓解miR-30a-5p对成骨细胞分化的抑制作用。结论:miR-30a-5p在骨质疏松大鼠骨组织中表达上调,并能够靶向抑制Runx2的表达,从而抑制成骨细胞分化,促进骨质疏松进展,为骨质疏松症的诊断提供新的生物标志物。 展开更多
关键词 miR-30a-5p RUNT相关转录因子2(Runx2) 成骨分化 骨质疏松
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