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对香豆酸抑制肺癌细胞增殖、迁移并诱导其凋亡的机制研究 被引量:1
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作者 彭勇波 李甜甜 +1 位作者 祝小峰 吕岩 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第2期180-186,共7页
探究了对香豆酸(p-coumaric acid,p-CA)对人肺癌细胞细胞A549和H1299增殖、凋亡和迁移的影响及作用机制.结果显示,添加0~10 mM p-CA能显著抑制两种肺癌细胞的生长和迁移,并呈剂量和时间依赖性(P<0.001).p-CA显著抑制了细胞周期发生,... 探究了对香豆酸(p-coumaric acid,p-CA)对人肺癌细胞细胞A549和H1299增殖、凋亡和迁移的影响及作用机制.结果显示,添加0~10 mM p-CA能显著抑制两种肺癌细胞的生长和迁移,并呈剂量和时间依赖性(P<0.001).p-CA显著抑制了细胞周期发生,并将细胞周期阻滞在G1期,且细胞凋亡发生明显增加(P<0.05).p-CA显著抑制了CDK2、CDK6、Cyclin D1等周期正调控因子表达,并诱导细胞周期负调控因子p21、p27等基因的表达上调;与此同时,p-CA还诱导了促凋亡因子Bax表达上升和抗凋亡因子Bcl-2表达水平的降低且caspase-3和caspase-9的表达上调,而对迁移相关基因表达的检测结果也显示p-CA抑制了β-连环蛋白(β-catenin)的表达并促进钙粘附蛋白E(E-cadherin)表达上升.上述结果表明,p-CA具有抑制肺癌细胞生长、诱导凋亡并抑制其迁移的作用,它主要是通过促进Bax、caspase-3、caspase-9、p21、p27、E-cadherin等蛋白的表达而抑制Bcl-2、Cyclin D1、β-catenin等蛋白的表达发挥其作用. 展开更多
关键词 对香豆酸 A549细胞 H1299细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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基于CRISPR/Cas9技术建立敲除Plac9基因的人胚肾细胞株 被引量:1
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作者 薛璐 欧阳聪 +1 位作者 孙宁远 秦绪慧 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2019年第2期189-192,共4页
目的:通过CRISPR/Cas9基因编辑技术和流式细胞术相结合,获得可编辑Plac9基因敲除的人胚肾细胞株(293T).方法:根据Plac9外显子设计了4个sgRNAs(S1,S2,S3,S4),分别将其与PX458载体连接,构建了PX458-S1(S2/S3/S4)载体.通过转染试剂lipo200... 目的:通过CRISPR/Cas9基因编辑技术和流式细胞术相结合,获得可编辑Plac9基因敲除的人胚肾细胞株(293T).方法:根据Plac9外显子设计了4个sgRNAs(S1,S2,S3,S4),分别将其与PX458载体连接,构建了PX458-S1(S2/S3/S4)载体.通过转染试剂lipo2000将表达载体分别转染至293T细胞中,并以流式细胞术对带绿色荧光蛋白标记的细胞进行单细胞分选,分选后的细胞培养一段时间后,用基因组测序和错配酶酶切进行筛选.从筛选好的细胞中提取蛋白,进行WesternBlot检测敲除效率.结果:采用CRISPR/Cas9和流式细胞术结合技术成功构建了Plac9蛋白表达缺失的人胚肾细胞株.结论:该方法简便快捷、效率高,可广泛地用于编辑各种细胞和细胞功能研究. 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 基因编辑技术 基因敲除 Plac9
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