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多学科合作快速康复外科理念在腹腔镜腹股沟疝修补术围手术期的应用 被引量：144
1
作者 欧阳剑波 黄耿文 +5 位作者 何文 阳建怡 魏伟 纪连栋 高红梅 彭淑平 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期506-513,共8页
目的:探讨以多学科团队(MDT)合作为基础的快速康复外科(ERAS)在腹腔镜腹股沟疝修补术围手术期应用的可行性及有效性。方法:将782例行择期腹腔镜腹股沟疝修补术的患者按入院顺序随机分为ERAS组(392例)和对照组(390例)。对照组接受常规治... 目的:探讨以多学科团队(MDT)合作为基础的快速康复外科(ERAS)在腹腔镜腹股沟疝修补术围手术期应用的可行性及有效性。方法:将782例行择期腹腔镜腹股沟疝修补术的患者按入院顺序随机分为ERAS组(392例)和对照组(390例)。对照组接受常规治疗护理;ERAS组接受MDT合作ERAS理念的治疗护理,主要干预措施包括住院模式选择,医护一体化健康教育,饮食要求,胃肠道准备,尿潴留预防,术后早期活动,伤口疼痛预防,麻醉前给药,防止术中低温,围手术期补液管理,术后恶心、呕吐预防及1个月患者舒适度评价等。比较两组患者术后疼痛、恢复情况、并发症与应激反应发生率、术后舒适度等。结果:与对照组比较,ERAS组术后次日清晨NRS疼痛评分降低,恢复正常饮食时间、下床活动时间、住院时间均减少,术后满意率增加,血清肿、尿潴留、伤口感染等并发症与不适感、恶心反应的发生率降低,术后1个月中位腹股沟疼痛调查表评分降低(均P<0.05)。结论:在腹腔镜腹股沟疝修补术患者围手术期中采用MDT合作ERAS理念可以减轻患者不适,加速康复,缩短住院时间,提高患者满意度及舒适度。 展开更多
关键词 疝 腹股沟 疝修补术 腹腔镜 围手术期
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用氧化铁磁性纳米颗粒作为基因载体的研究 被引量：49
2
作者 向娟娟 朱诗国 +4 位作者 吕红斌 阮建明 张必成 李江 李桂源 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1009-1014,共6页
目的:评价氧化铁磁性纳米颗粒(nanoparticles)作为基因载体的可行性。方法:应用沉淀法制成外包葡聚糖的氧化铁磁性生物纳米颗粒DextranCoatedIronOxideNanoparticlesDCIONP。用分光光度计及琼脂糖凝胶电泳分析氧化铁磁性生物纳米颗粒的... 目的:评价氧化铁磁性纳米颗粒(nanoparticles)作为基因载体的可行性。方法:应用沉淀法制成外包葡聚糖的氧化铁磁性生物纳米颗粒DextranCoatedIronOxideNanoparticlesDCIONP。用分光光度计及琼脂糖凝胶电泳分析氧化铁磁性生物纳米颗粒的DNA结合力及抵抗DNASEⅠ消化的作用。以绿色荧光蛋白基因为报道基因,进行用氧化铁磁性纳米颗粒作为基因载体的体外细胞转染实验。结果:电镜检测证实DCIONP的直径在10纳米(nanometernm)左右。在酸性条件下,这种纳米颗粒表现出DNA结合力和抵抗DNASEⅠ消化的作用从而证明DCIONP与DNA的结合是静电引力的作用。在氧化铁磁性生物纳米颗粒表面修饰阳离子聚合物多聚赖氨酸DextranCoatedIronOxideNanoparticlesmodifiedwithPolyLLysine,PLLDCIONP在中性及碱性的条件下,亦可与带阴性电荷的DNA结合及抵抗DNASEⅠ消化的作用。PLLDCIONP可作为基因载体将报道基因转染入细胞,用荧光显微镜可观察到发绿色荧光的细胞。在PLLDCIONP和质粒的质量成一定的比例时,PLLDCIONP的转染效率高于脂质体。结论:PLLDCIONP可作为DNA转移载体。 展开更多
关键词 氧化铁磁性纳米颗粒 表面修饰 多聚赖氨酸 基因载体 基因治疗
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LPS所介导的信号转导通路研究进展 被引量：49
3
作者 杨一新 李桂源 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期141-145,共5页
LPS是革兰氏阴性细菌的细胞壁主要组成成分,对LPS的识别与信号转导是机体自身防御反应的重要环节,同时也是导致内毒素性休克、全身炎症反应综合征和多器官功能衰竭等疾病的重要机制。LPS可通过LPS-LBP-sCD14三联复合物作用于TLR4并激活M... LPS是革兰氏阴性细菌的细胞壁主要组成成分,对LPS的识别与信号转导是机体自身防御反应的重要环节,同时也是导致内毒素性休克、全身炎症反应综合征和多器官功能衰竭等疾病的重要机制。LPS可通过LPS-LBP-sCD14三联复合物作用于TLR4并激活MyD88,活化的MyD88可聚集并结合IRAK1和IRAK2,然后作用于肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6),进一步激活MAPK和NF-κB信号转导通路。活化的MAPK和NF-κB信号转导通路是LPS所导致的细胞反应与炎症细胞因子如TNF-,αIL-6和IL-8等产生的重要分子机制。 展开更多
关键词 LPS MAPK信号转导 NF-κB信号转导
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双向凝胶电泳-飞行时间质谱法分析人肺鳞癌细胞NCI-H520蛋白质组成分 被引量：34
4
作者 詹显全 陈主初 +5 位作者 关勇军 李萃 何春梅 梁宋平 谢锦云 陈平 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期575-582,共8页
目的：建立和优化肿瘤蛋白质组研究的方法系统，并分析人肺鳞癌细胞蛋白质组。方法：用固相 ｐＨ梯度双向凝胶电泳分离人肺鳞癌细胞系ＮＣＩ－Ｈ５２０总蛋白，银染显色，ＰＤＱｕｅｓｔ ２ＤＥ软件分析，对部分蛋白质 点用基质辅助激... 目的：建立和优化肿瘤蛋白质组研究的方法系统，并分析人肺鳞癌细胞蛋白质组。方法：用固相 ｐＨ梯度双向凝胶电泳分离人肺鳞癌细胞系ＮＣＩ－Ｈ５２０总蛋白，银染显色，ＰＤＱｕｅｓｔ ２ＤＥ软件分析，对部分蛋白质 点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（ｍａｔｒｉｘ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｌａｓｅｒ　ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ ｏｆ　ｆｌｙｉｎｇ　ｍａｓｓ　 ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ， ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ－ＭＳ）测定其胶内酶解后的肽质指纹图谱，用 ＰｅｐｔＩｄｅｎｔ软件查询 ＳＷＩＳＳ－ＰＲＯＴ数据库。结果：获得了分辨 率和重复性均较好的双向电泳银染图谱，图像分析探测到３块胶的平均蛋白质点数为（１１４６±１１６），平均匹配的点 数为（８５１±９５），匹配率达 ７３． ７％， ３ 块胶在蛋白质点位置上具有较好的重复性， ＩＥＦ方向的平均偏差为（１． ５２± ０．２２）ｍｍ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ方向的平均偏差为（１．９７ ± ０．１３）ｍｍ。随机取６０个蛋白质点进行胶内原位酶解－质谱指纹图 分析得到了５４个蛋白质点的肽质指纹图，查询数据库初步鉴定了４４个蛋白质，其中部分是与细胞周期有关的蛋 白，部分是与信号传导有关的蛋白。 展开更多
关键词 双向电泳 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 肺肿瘤 鳞癌细胞 NCI-G520
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鼻咽癌癌变的分子机理 被引量：33
5
作者 李桂源 刘华英 +2 位作者 周鸣 周后德 李小玲 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期922-931,共10页
鼻咽癌是一种多基因遗传性肿瘤,在中国南方和国外中国南方移民及后裔中发病率极高,严重危害了我国南方地区人民生命健康.对于这样一种具有明显民族聚集现象和地域差异的恶性肿瘤,目前认为其病理发病机制与遗传和环境因素的共同作用密切... 鼻咽癌是一种多基因遗传性肿瘤,在中国南方和国外中国南方移民及后裔中发病率极高,严重危害了我国南方地区人民生命健康.对于这样一种具有明显民族聚集现象和地域差异的恶性肿瘤,目前认为其病理发病机制与遗传和环境因素的共同作用密切相关.现主要阐述鼻咽癌作为一种多基因遗传性肿瘤的病因发病机制,初步建立鼻咽癌易感基因群的概念和鼻咽癌发生发展过程中易感基因群主导的多阶段性多米诺骨牌效应分子机制假说,为寻找鼻咽癌遗传易感风险因子,筛选鼻咽癌高危人群以及探索鼻咽癌靶向性及个体化的诊断和治疗手段奠定实验与理论基础. 展开更多
关键词 鼻咽癌 病因发病机制 易感基因群 多阶段性多米诺骨牌效应
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细胞周期与肿瘤 被引量：28
6
作者 曹亚 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 2002年第2期103-105,共3页
肿瘤是环境因素和遗传因素共同作用 ,导致细胞周期紊乱 ,细胞失控性生长所致的一类疾病。细胞周期紊乱与基因组不稳定性、癌变的多阶段相关 ;致瘤病毒编码的产物通过不同的机制参与细胞周期调控 ,介导多种肿瘤的发病过程。细胞周期与肿... 肿瘤是环境因素和遗传因素共同作用 ,导致细胞周期紊乱 ,细胞失控性生长所致的一类疾病。细胞周期紊乱与基因组不稳定性、癌变的多阶段相关 ;致瘤病毒编码的产物通过不同的机制参与细胞周期调控 ,介导多种肿瘤的发病过程。细胞周期与肿瘤发病理论上的重大突破 。 展开更多
关键词 细胞周期 肿瘤 细胞周期素 细胞周期素依赖性激酶 细胞周期素依赖性激酶抑制子
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诱导性多潜能干细胞(iPS cells)——现状及前景展望 被引量：34
7
作者 申红芬 姚志芳 +3 位作者 肖高芳 贾俊双 肖东 姚开泰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第8期950-960,共11页
主要从iPS细胞发展历程、获得iPS细胞的几个关键步骤(如基因导入方式、诱导iPS细胞所需因子组合与小分子化合物运用和体细胞种类选择等)、病人或疾病特异性iPS细胞、iPS细胞体内外诱导分化与其衍生物的临床应用和制备无遗传修饰的(genet... 主要从iPS细胞发展历程、获得iPS细胞的几个关键步骤(如基因导入方式、诱导iPS细胞所需因子组合与小分子化合物运用和体细胞种类选择等)、病人或疾病特异性iPS细胞、iPS细胞体内外诱导分化与其衍生物的临床应用和制备无遗传修饰的(genetic modification-free)iPS细胞的可行性与前景等方面对iPS细胞最新研究进展做评述.日本和美国研究小组先后用4种基因将小鼠(2006年8月)和人(2007年11～12月)的体细胞在体外重编程为诱导性多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS cells),此后在短短两年多时间内,iPS细胞的研究和关注度呈爆炸式增长.体细胞重编程、去分化和多潜能干细胞来源等一系列热点问题再次成为干细胞和发育生物学等研究的热点和焦点.与胚胎干细胞(embryonic stem cells,EScells)一样,iPS细胞在体内可分化为3个胚层来源的所有细胞,进而参与形成机体所有组织和器官.迄今,在体外已由iPS细胞定向诱导分化出功能性的多种成熟细胞.因此,iPS细胞研究不仅具有重要理论意义,而且在再生医学、组织工程和药物发现与评价等方面极具应用价值. 展开更多
关键词 体细胞重编程 胚胎干细胞 诱导性多潜能干细胞 分化 细胞治疗 无遗传修饰的重编程方法 小分子
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鼻咽癌分子标志物研究 被引量：32
8
作者 张文玲 周艳宏 +5 位作者 肖岚 范松青 曾朝阳 李小玲 武明花 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第1期7-13,共7页
鼻咽癌严重危害人类健康,寻找其早期诊断及预后相关的分子标志物迫在眉睫.在总结本课题组运用基因组学、转录组学、蛋白质组学和组织微阵列等高通量技术对不同分化阶段、不同组织类型和不同临床分期的鼻咽癌标本进行大规模筛选工作的基... 鼻咽癌严重危害人类健康,寻找其早期诊断及预后相关的分子标志物迫在眉睫.在总结本课题组运用基因组学、转录组学、蛋白质组学和组织微阵列等高通量技术对不同分化阶段、不同组织类型和不同临床分期的鼻咽癌标本进行大规模筛选工作的基础上,结合近年国际上有关进展,初步构建了鼻咽癌不同发病阶段的分子靶标系统:a.证实SPLUNC1、p16、EBER-1、p27、RASSF1A和CDH13是鼻咽癌早期诊断的理想分子靶标;b.鼻咽癌上调基因RB1,STMN1和DSP及下调基因SERPINB6,AGTRL1和SYTL2的分类预测模型是区分正常鼻咽上皮和鼻咽癌的分子靶标;c.NGX6、Ezrin、LTF、OPN、THY1和Tiam-1是鼻咽癌侵袭与转移预测的候选分子靶标;d.Cyclin D1、Survivin和HPA是与鼻咽癌预后相关的候选分子标志物;e.证实Bcl-2、EGFR和Ki67是预测鼻咽癌放疗敏感与否的候选分子靶标;f.SAA和cox-2是监测鼻咽癌复发的候选分子标志物;g.发现BRD7、NGX6、NOR1和UBAP1的6个SNP改变是鼻咽癌遗传易感风险因子;h.建立了由139个基因组成的鼻咽癌不同临床分期分子靶标系统.这些在大样本基础上的分子靶标筛选为鼻咽癌分子分型研究奠定了重要工作基础. 展开更多
关键词 鼻咽癌 癌基因 抑癌基因 分子靶标
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一种新型的非病毒DNA传递载体:多聚赖氨酸-硅纳米颗粒 被引量：21
9
作者 朱诗国 吕红斌 +5 位作者 向娟娟 唐珂 张必成 周鸣 谭琛 李桂源 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第3期193-197,共5页
ＤＮＡ传递是基因表达与功能研究及其医学应用的重要技术．安全高效的ＤＮＡ传递一直是人们梦寐以求的目标，伴随纳米生物技术发展而产生的纳米ＤＮＡ传递载体为此带来了新的希望．通过ＯＰ－１０／环己烷／氨水微乳液体系合成了不同粒... ＤＮＡ传递是基因表达与功能研究及其医学应用的重要技术．安全高效的ＤＮＡ传递一直是人们梦寐以求的目标，伴随纳米生物技术发展而产生的纳米ＤＮＡ传递载体为此带来了新的希望．通过ＯＰ－１０／环己烷／氨水微乳液体系合成了不同粒径的硅纳米颗粒，并利用正交分析阐明了该体系中各组分对硅纳米颗粒粒径及其分布的影响；成功地在小粒径（约２０　ｎｍ）硅纳米颗粒表面修饰上多聚赖氨酸，研制出复合纳米材料──多聚赖氨酸－硅纳米颗粒．ＤＮＡ结合分析及ＤＮａｓｅⅠ消化实验发现，多聚赖氨酸－硅纳米颗粒能有效结合和保护ＤＮＡ．细胞转染实验发现，它能高效传递ＤＮＡ进入ＨＮＥ１细胞，并产生高水平的绿色荧光蛋白表达．这些结果表明多聚赖氨酸－硅纳米颗粒是一种新型的非病毒纳米ＤＮＡ传递载体，并将可能在基因表达与功能研究及基因治疗等领域发挥重要作用． 展开更多
关键词 纳米DNA传递载体 多聚赖氨酸-硅纳米颗粒 制备
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EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞系中通过NF-κB、AP-1促进MMP9表达 被引量：29
10
作者 王承兴 邓锡云 +5 位作者 李晓艳 顾焕华 易薇 翁新宪 夏林庆 曹亚 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期9-13,共5页
目的　探讨EB病毒 (Epstein BarrVirus,EBV)LMP1是否通过NF κB和AP 1促进MMP9表达 ,为全面阐明LMP1的分子致瘤机制提供实验依据。方法　将MMP9 CAT表达质粒导入HNE2 pSG5、HNE2 LMP1、HNE2 LMP1(1 185 )、HNE2 LMP1(1 2 31)、HNE2 ... 目的　探讨EB病毒 (Epstein BarrVirus,EBV)LMP1是否通过NF κB和AP 1促进MMP9表达 ,为全面阐明LMP1的分子致瘤机制提供实验依据。方法　将MMP9 CAT表达质粒导入HNE2 pSG5、HNE2 LMP1、HNE2 LMP1(1 185 )、HNE2 LMP1(1 2 31)、HNE2 LMP1Δ187 35 1鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma ,NPC)细胞系 ,比较各组细胞系的氯霉素乙酰转移酶 (CAT)活性 ,以确定LMP1或其不同的结构域是否上调MMP9转录 ;采用明胶Zymography法检测上述细胞产生MMP9的活性 ,以确定LMP1或其不同的结构域是否促进MMP9蛋白表达 ;借助报道基因分析法确定在NPC中野生型LMP1能否激活NF κB和AP 1的活性 ,进一步将突变了NF κB或AP 1结合位点的MMP9 CAT表达质粒导入上述细胞系 ;比较相应的CAT活性 ,以确定LMP1或其不同的结构域是否通过NF κB或AP 1上调MMP9表达。结果　与导入载体pCDNA3比较 ,HNE2 LMP1、HNE2 LMP1(1 185 )、HNE2 LMP1(1 2 31)和HNE2 LMP1Δ187 35 1NPC细胞系CAT活性分别提高 7.2 ,1.3,3.3和 4.0倍。明胶Zymography法检测显示 ,在HNE2 LMP1、HNE2 LMP1(1 2 31)和HNE2 LMP1Δ187 35 1细胞系中 ,均可检测到 92 0 0 0MMP9活性 ,而HNE2 pSG5、HNE2 LMP1(1 2 31)几乎均为阴性。较之母细胞 ,野生型LMP1活化NF 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 EB病毒 LMP1 NF-ΚB AP-1 信号传导 鼻咽癌
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比较基因组杂交研究鼻咽癌遗传变异 被引量：20
11
作者 李忠花 王璐 +9 位作者 张小慧 张丽君 张必成 余鹰 曾朝阳 周鸣 黄薇 陈竺 陈赛娟 李桂源 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 2001年第5期338-342,共5页
目的　了解鼻咽癌遗传学改变的特征。方法　应用比较基因组杂交检测 2 0例鼻咽癌基因组的不平衡即DNA的丢失或扩增。结果　鼻咽癌常见的扩增的染色体是 1q、2、3q、7q、8q、12 ;常见的缺失的染色体为 3p、9p、11q、16 q。结论　鼻咽癌... 目的　了解鼻咽癌遗传学改变的特征。方法　应用比较基因组杂交检测 2 0例鼻咽癌基因组的不平衡即DNA的丢失或扩增。结果　鼻咽癌常见的扩增的染色体是 1q、2、3q、7q、8q、12 ;常见的缺失的染色体为 3p、9p、11q、16 q。结论　鼻咽癌细胞中存在多条染色体拷贝数的改变 ,由此引起相应瘤基因的扩增和抑癌基因的丢失可能参与了鼻咽癌的发生。 展开更多
关键词 鼻咽癌 比较基因组杂交 抑瘤基因 瘤基因
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Th1/Th2细胞炎性因子在大鼠溃疡性结肠炎治疗模型中的表达 被引量：33
12
作者 彭小青 李夏雨 +3 位作者 王玮 李楠 马健 沈守荣 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1020-1028,共9页
目的:探讨Th1/Th2细胞因子IL-2,干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ),IL-4和IL-10在葡聚糖酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的大鼠实验性溃疡性结肠炎治疗模型中的表达。方法:雄性Sprague Dawley大鼠40只,随机均分为正常组、模型组、... 目的:探讨Th1/Th2细胞因子IL-2,干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ),IL-4和IL-10在葡聚糖酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的大鼠实验性溃疡性结肠炎治疗模型中的表达。方法:雄性Sprague Dawley大鼠40只,随机均分为正常组、模型组、柳氮磺嘧啶治疗组(SASP组)、结肠宁治疗组(结肠宁组),每组各10只。对各组大鼠进行疾病活动指数评分(disease activity index,DAI)及结直肠组织损伤学评分,运用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)及real-time PCR检测血清及肠黏膜组织中细胞因子IL-2,IFN-γ,IL-4和IL-10含量水平。结果:与模型组比较,结肠宁组大鼠的DAI及结直肠组织损伤学评分均明显下降(均P<0.05);但与SASP组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。血清和组织中IL-2表达在治疗前后的各组间比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。SASP组和结肠宁组血清及肠黏膜组织IFN-γ水平较模型组下调,血清中差异均有统计学意义(均P<0.05),肠黏膜组织中仅结肠宁组差异均有统计学意义(均P<0.05)。SASP组和结肠宁组血清IL-4水平较模型组均上调,但只有结肠宁组差异有统计学意义(P<0.05);而肠黏膜组织中差异均无统计学意义(均P>0.05)。SASP组和结肠宁组血清及肠黏膜组织IL-10水平较模型组上升,差异均有统计学意义(均P<0.05)。SASP组和结肠宁组血清及肠黏膜组织中细胞因子IL-2,IFN-γ,IL-4和IL-10含量水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:DSS造模破坏Th1/Th2在结肠中的表达平衡。结肠宁能改善DSS所致的实验性溃结大鼠模型炎症,通过上调血清和肠黏膜组织IL-10水平、下调IFN-γ水平可保持Th1/Th2细胞间平衡,从而改善免疫功能。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 结肠宁灌肠剂 I类T辅助细胞 II类T辅助细胞 葡聚糖硫酸钠 大鼠模型
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磁性氧化铁纳米颗粒用于体外基因的转染及其外加磁场对于转染效率的影响 被引量：15
13
作者 向娟娟 聂新民 +7 位作者 唐敬群 王延金 李征 甘凯 黄河 熊炜 李小玲 李桂源 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期71-74,共4页
目的　评价氧化铁纳米颗粒 (IONP)作为体外基因载体的可行性及其外加磁场对于其转染效率的影响。方法　以碱沉淀法制成IONP ,在其表面修饰多聚赖氨酸制成多聚赖氨酸 氧化铁纳米颗粒 (IONP PLL)。应用荧光素酶报告基因系统 ,检测IONP PL... 目的　评价氧化铁纳米颗粒 (IONP)作为体外基因载体的可行性及其外加磁场对于其转染效率的影响。方法　以碱沉淀法制成IONP ,在其表面修饰多聚赖氨酸制成多聚赖氨酸 氧化铁纳米颗粒 (IONP PLL)。应用荧光素酶报告基因系统 ,检测IONP PLL将外源基因转染至不同的细胞系的转染特性 ,同时 ,应用钕 铁 硼稀土强磁场结合荧光素酶报告基因 ,评价外加磁场对于IONP PLL作为基因载体效率的影响。结果　IONP可将外源基因转染至多个细胞系并高效表达。不同细胞系的转染效率和时间各不相同。外加磁场可使转染效率提高 5～ 10倍。结论　磁性IONP是一种可用于体外转染的新型非病毒基因载体 ,外加磁场可提高其转染效率。 展开更多
关键词 磁性氧化铁纳米颗粒 体外基因 基因转染 外加磁场 转染效率 IONP 病毒载体
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鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白1活化cyclinD1的表达 被引量：27
14
作者 赵晓荣 王承兴 +7 位作者 罗非君 顾焕华 唐敏 夏林庆 邓琳 易薇 邓锡云 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期704-710,共7页
为了探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(EBV LMP1)促进细胞增殖 ,参与EBV相关疾病致瘤的分子机制 ,研究了LMP1在鼻咽癌细胞中调节cyclinD1表达 ,进而影响细胞周期行进及细胞恶性表型改变 ,并初步确定了LMP1发挥该功能的结构域 .利用已建株的... 为了探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(EBV LMP1)促进细胞增殖 ,参与EBV相关疾病致瘤的分子机制 ,研究了LMP1在鼻咽癌细胞中调节cyclinD1表达 ,进而影响细胞周期行进及细胞恶性表型改变 ,并初步确定了LMP1发挥该功能的结构域 .利用已建株的Tet on LMP1 HNE2鼻咽癌细胞系 ,蛋白质印迹实验分析LMP1诱导cyclinD1蛋白质表达的表达动力学 ,包括时间效应及剂量效应 ;利用三种LMP1功能区缺失的突变体及野生型LMP1,以载体型细胞为对照 ,确定LMP1活化cyclinD1表达的结构域 .同时结合基因诱导表达及反义寡聚核酸技术阻断基因表达的实验方法 ,进一步确定LMP1上调的cyclinD1功能 ,即对细胞周期行进及细胞恶性表型的影响 .结果表明LMP1确实可以诱导cyclinD1的表达 (2～ 4倍 ) ,且诱导具有时间依赖性及剂量依赖性 ;利用三种LMP1功能区缺失的突变体及野生型LMP1,以载体型细胞为对照 ,结合报道基因分析法 ,确定与空白载体细胞系比较 ,野生型LMP1从转录水平可反式激活cyclinD1报道基因活性约 11 2倍 ,其中CTAR1及CTAR2均可活化cyclinD1表达 ,但以CTAR2为主 ,与野生型LMP1诱导cyclinD1反式激活活性比较 ,CTAR1缺失导致cyclinD1报道基因活性下降 2 3 6 % ,CTAR2缺失导致cyclinD1活性下降约 80 7% ,C端均缺失时cyclinD1活性只? 展开更多
关键词 EB病毒 潜伏膜蛋白1 周期蛋白D1 鼻咽癌细胞
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胃癌和大肠癌中肿瘤相关基因NGX6的表达 被引量：24
15
作者 张晓梅 沈守荣 +2 位作者 王晓艳 王洁如 李江 《世界华人消化杂志》 CAS 2002年第8期873-876,共4页
目的:研究肿瘤相关基因NGX6在胃癌与大肠癌组织以及其配对癌旁正常组织中的表达,探讨此基因在胃癌、大肠癌发生发展中的作用.方法:采用RT-PCR方法、点杂交、Northern-blot方法分别检测34例胃癌、34例大肠癌患者癌瘤组织、癌旁(手术切缘... 目的:研究肿瘤相关基因NGX6在胃癌与大肠癌组织以及其配对癌旁正常组织中的表达,探讨此基因在胃癌、大肠癌发生发展中的作用.方法:采用RT-PCR方法、点杂交、Northern-blot方法分别检测34例胃癌、34例大肠癌患者癌瘤组织、癌旁(手术切缘,距肿瘤5cm以上)正常组织NGX6基因表达.结果:RT-PCR显示:NGX6基因在73.5%的大肠癌组织(25/34)和93.8%的有淋巴结或远处转移的大肠癌组织(15/16)中存在表达减弱或不表达,其表达下调率明显高于相应的癌旁组织和无淋巴结或远处转移大肠癌(26.5%、55.6%,P<0.05)。但此基因表达与大肠癌病理类型无显著相关性。点杂交和Northern-blot证实了RT-PCR结果。而胃癌与配对癌旁正常组织中未发现NGX6表达水平改变(表达下调率:29.4%vs41.2%,P>0.05).结论:NGX6基因在大肠癌中表达下调,此基因的低表达在大肠癌的发生和转移中起着一定的作用,但可能与胃癌的发生无关. 展开更多
关键词 胃癌 大肠癌 肿瘤相关基因 NGX6 基因表达 RT-PCR方法 点杂交
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蛋白质组中蛋白质鉴定技术的研究近况 被引量：19
16
作者 詹显全 陈主初 《国外医学（分子生物学分册）》 CSCD 2002年第3期129-133,共5页
蛋白质组学的核心内容之一就是蛋白质的鉴定 ,基于双向凝胶电泳的图象分析技术可以对组织细胞蛋白质表达的量、表观分子量和等电点等特性进行初步的鉴定 ,但是对于蛋白质的结构和功能必须借助其它技术手段。目前逐渐形成了以生物质谱为... 蛋白质组学的核心内容之一就是蛋白质的鉴定 ,基于双向凝胶电泳的图象分析技术可以对组织细胞蛋白质表达的量、表观分子量和等电点等特性进行初步的鉴定 ,但是对于蛋白质的结构和功能必须借助其它技术手段。目前逐渐形成了以生物质谱为核心的鉴定技术 ,蛋白质微测序和氨基酸组成分析在表达模式分析中也有应用。关于蛋白质组功能模式研究目前可用的方法有酵母双杂交、噬菌体展示、生物传感芯片质谱、蛋白质工程中的定点突变技术等。这些技术对推动蛋白质组学的发展起了一定作用 ,但是单一技术通常不能确切的鉴定某一蛋白质 。 展开更多
关键词 蛋白质组 蛋白质鉴定 分析技术 表达模式
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JNK相互作用蛋白通过JNK途径影响鼻咽癌的增殖和凋亡(英文) 被引量：17
17
作者 胡智 陶永光 +5 位作者 唐发清 杨力芳 赵燕 曾亮 罗非君 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期579-585,共7页
EB病毒编码的瘤蛋白潜伏膜蛋白 (LMP1)所介导的活化蛋白 (AP 1)信号转导途径在细胞增殖、分化、转化与凋亡方面发挥着重要作用 .越来越多的证据表明 ,AP 1信号转导通路中上游激酶JNK在鼻咽癌的发生发展过程中起着重要作用 .最近克隆出来... EB病毒编码的瘤蛋白潜伏膜蛋白 (LMP1)所介导的活化蛋白 (AP 1)信号转导途径在细胞增殖、分化、转化与凋亡方面发挥着重要作用 .越来越多的证据表明 ,AP 1信号转导通路中上游激酶JNK在鼻咽癌的发生发展过程中起着重要作用 .最近克隆出来的JNK相互作用蛋白 (JIP 1)是一种能抑制JNK核移位的胞浆锚蛋白 .为探讨JIP在LMP1调控AP 1信号通路中的作用机制 ,采用间接免疫荧光法和报告基因法 ,发现JIP通过有效地抑制磷酸化的JNK从胞浆移位入核 ,从而抑制LMP1上调的AP 1活性 .同时 ,JIP导入鼻咽癌细胞中 ,MTT法发现JIP能够明显抑制鼻咽癌细胞的生长 .进一步发现转染JIP后细胞的集落形成率与对照组相比大约降低了 5 3 6 % ,也抑制了细胞 .提示JIP可明显抑制细胞的增殖作用 .进一步采用流式细胞术分析 ,结果发现JIP引起细胞G1/S期细胞阻滞 ,说明JIP是抑制细胞增殖的重要调节子 .进一步采用流式细胞术定量发现 ,转染JIP后细胞的 2 4h凋亡百分率由 1 2 5 %上升到 8 2 5 % ,上升约 6 6倍 ,4 8h由 1 0 4 %上升到 31 4 5 % ,上升约 30倍 .采用激光共聚焦显微镜发现 ,转染JIP后细胞核发生显著变化 ,核质由均匀状态固缩成高凝集状态 ,形成了典型的胞膜体 .提示JIP可有效地促进细胞凋亡 .结果表明 ,JIP可通过抑制活化的JNK? 展开更多
关键词 JNK 蛋白 鼻咽癌 增殖 凋亡 瘤蛋白潜伏膜蛋白 信号转导 细胞增殖
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周期蛋白D1在鼻咽癌细胞系中功能及意义的深入研究 被引量：20
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作者 赵晓荣 邓琳 +3 位作者 翁新宪 顾焕华 邓锡云 曹亚 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期373-375,共3页
目的　深入研究周期蛋白D1在鼻咽癌细胞中的表达特征及其生物学功能。方法　以Westernblot方法确定D型周期蛋白在鼻咽癌细胞系中的表达谱及表达水平 ;利用流式细胞术双参数法 ,确定cyclinD1在鼻咽癌细胞中的表达分布模式 ;结合反义硫代... 目的　深入研究周期蛋白D1在鼻咽癌细胞中的表达特征及其生物学功能。方法　以Westernblot方法确定D型周期蛋白在鼻咽癌细胞系中的表达谱及表达水平 ;利用流式细胞术双参数法 ,确定cyclinD1在鼻咽癌细胞中的表达分布模式 ;结合反义硫代磷酸化寡聚脱氧核苷酸和抗体剔除实验 ,分别从mRNA及蛋白质水平抑制、中和cyclinD1的表达 ,探讨其在鼻咽癌细胞中的生物学功能。结果　在鼻咽癌细胞中 ,D型周期蛋白的表达谱为D1、D2、D3均表达型 ,cyclinD1在两株鼻咽癌细胞均有过表达。cyclinD1在鼻咽癌细胞系中的表达呈细胞周期依赖性 ,在G0 /G1期表达最高 ,S期及G2 /M期下降 ,但仍可检测到。反义cyclinD1硫代磷酸化寡聚脱氧核苷酸和抗体剔除实验可以有效抑制蛋白质表达 ,抑制细胞进入S期。结论　鼻咽癌细胞系中 ,D型周期蛋白的表达谱为D1、D2、D3均表达型 ,cyclinD1在鼻咽癌细胞中有过表达 ,且表达呈细胞周期依赖性 ,cyclinD1可能是鼻咽癌细胞G1/S期行进中必不可少的细胞周期调节因子。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 周期蛋白D1 细胞周期 生物学功能
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茶多酚抑制肿瘤细胞增殖的分子机制研究新进展 被引量：16
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作者 罗非君 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 2001年第4期251-253,共3页
茶多酚具有抗癌作用 ,但其分子机制尚未明了。近年来 ,茶多酚抑制肿瘤细胞增殖的研究取得了许多突破性进展。茶多酚能下调肿瘤细胞DNA拓扑异构酶与DNA引物酶的活性 ,抑制DNA的复制 ;茶多酚可明显促进WAF1/p2 1,KIP1/p2 7,p16,p18和p5 3... 茶多酚具有抗癌作用 ,但其分子机制尚未明了。近年来 ,茶多酚抑制肿瘤细胞增殖的研究取得了许多突破性进展。茶多酚能下调肿瘤细胞DNA拓扑异构酶与DNA引物酶的活性 ,抑制DNA的复制 ;茶多酚可明显促进WAF1/p2 1,KIP1/p2 7,p16,p18和p5 3蛋白表达 ,抑制cyclinD1,CDK4和CDK6表达 ,使细胞周期发生G1/S与G2 /M阻滞 ;茶多酚也能通过干预AP 1与NF κB信号转导通路、调控细胞内氧化还原状态、抑制端粒酶活性等多种机制导致肿瘤细胞增殖抑制。 展开更多
关键词 茶多酚 激活蛋白质1 信号转导 细胞周期 肿瘤 预防 治疗 肿瘤细胞增殖
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高血压脑出血肝阳化风证与肝阳上亢证患者血清蛋白质组学研究 被引量：16
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作者 熊新贵 梁清华 +4 位作者 侯俊良 陈疆 刘爱平 鄢东红 关勇军 《实用预防医学》 CAS 2007年第6期1649-1652,共4页
目的初步建立高血压脑出血肝阳化风证、高血压肝阳上亢证及健康对照的血清蛋白质组表达图谱,初步鉴定其差异表达的蛋白质。方法各组血清均以试剂盒去除白蛋白及IgG,以BCA法测血清蛋白浓度。以双向凝胶电泳分离各组血清蛋白质,考马斯亮... 目的初步建立高血压脑出血肝阳化风证、高血压肝阳上亢证及健康对照的血清蛋白质组表达图谱,初步鉴定其差异表达的蛋白质。方法各组血清均以试剂盒去除白蛋白及IgG,以BCA法测血清蛋白浓度。以双向凝胶电泳分离各组血清蛋白质,考马斯亮蓝染色,扫描凝胶成像,以PDQuest软件对各组血清蛋白质组表达图谱进行差异分析,选定差异点进行MALDI-TOF质谱分析。Mascot软件搜索MSDB和SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质。结果⑴初步建立三组血清蛋白质表达图谱。⑵8个蛋白质点在三组血清中呈现差异表达,初步鉴定其中的5个蛋白质:血清淀粉样前体蛋白,铜蓝蛋白,维生素D结合蛋白,载脂蛋白C-III和转铁蛋白。结论得到鉴定的5个蛋白质可能与高血压脑出血肝阳化风证发病过程相关。 展开更多
关键词 脑出血 肝阳化风证 蛋白质组学 血清
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