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变性梯度凝胶电泳的原理、应用及其进展 被引量:16
1
作者 刘上峰 傅俊江 《国外医学(遗传学分册)》 2002年第2期74-76,共3页
变性梯度凝胶电泳 (DGGE)主要是基于突变型和野生型核酸序列的不同而导致其变性浓度的差异 ,利用变性梯度胶进行分离。恒定变性凝胶电泳 (CDGE)、瞬时温度梯度电泳 (TTGE)和温度梯度凝胶电泳 (TGGE)是由 DGGE经改进而成。
关键词 变性梯度凝胶电泳 恒定变性凝胶电泳 瞬时温度梯度电泳 温度梯度凝胶电泳
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双向电泳技术原理及其应用 被引量:16
2
作者 刘上峰 傅俊江 李麓芸 《国外医学(生理病理科学与临床分册)》 2002年第2期197-199,共3页
双向电泳技术是蛋白质组研究的核心技术之一 ,本文对其基本原理、分辨率、可重复性、相关数据库、减法分析等作了介绍 。
关键词 双向电泳 蛋白质组 数据库 减法分析
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表皮生长因子受体(EGFR)的细胞内信号传导 被引量:11
3
作者 谭玉梅 范立青 卢光琇 《生命科学研究》 CAS CSCD 2002年第S1期29-33,共5页
表皮生长因子受体(EGFR)是一种存在于细胞表面的多功能跨膜蛋白分子,具有酪氨酸蛋白激酶活性,EGFR与配体结合后启动细胞内信号传导通路,不同的通路之间存在交叉对话(Cross-talks)共同完成细胞生理功能.对EGFR的深入研究,不仅可阐明... 表皮生长因子受体(EGFR)是一种存在于细胞表面的多功能跨膜蛋白分子,具有酪氨酸蛋白激酶活性,EGFR与配体结合后启动细胞内信号传导通路,不同的通路之间存在交叉对话(Cross-talks)共同完成细胞生理功能.对EGFR的深入研究,不仅可阐明细胞生长和发育等重要的生命过程,而且在医药和工业上也将有广泛的应用. 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 信号传导通路 酪氨酸蛋白激酶
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授精时机、活动精子总数对宫腔内人工授精临床妊娠率影响的研究 被引量:18
4
作者 朱文兵 范立青 +2 位作者 曾亚荣 罗克莉 卢光琇 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期110-112,共3页
目的 探讨在宫腔内人工授精 (IUI)过程中 ,授精时间、处理后A、B级精子总数与IUI妊娠率的关系。方法 回顾了我室 2 0 0 1年 4月 30日~ 2 0 0 1年 11月 1日 2 0 8例IUI的资料 ,比较了不同授精时间、处理后A、B级精子总数对IUI临床妊... 目的 探讨在宫腔内人工授精 (IUI)过程中 ,授精时间、处理后A、B级精子总数与IUI妊娠率的关系。方法 回顾了我室 2 0 0 1年 4月 30日~ 2 0 0 1年 11月 1日 2 0 8例IUI的资料 ,比较了不同授精时间、处理后A、B级精子总数对IUI临床妊娠率的影响。结果 IUI的授精时间与预期排卵时间在 6小时以内组的妊娠率显著高于 8小时组 (P <0 .0 5 ) ;而处理后A、B级精子总数分为 3组① 1× 10 6<精子总数 <2× 10 6;② 2× 10 6<精子总数 <10×10 6;和③精子总数 >10× 10 6。 3组间比较表明 ,其临床妊娠率无显著性差异 (P >0 .1)。结论 IUI治疗过程中 ,A +B级精子总数 >1× 10 6时 ,其数量增加对临床妊娠率的增加并不显著 ,但授精时间愈接近排卵期 。 展开更多
关键词 授精时机 活动精子总数 临床妊娠 妊娠率 精子总数 排卵时间 宫腔内人工授精 IUI 不育
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钙粘连素的结构和功能 被引量:9
5
作者 黄跃龙 宋增璇 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期338-342,共5页
钙粘连素 (cadherin)是主要的细胞黏附分子之一 ,钙粘连素家族由功能结构相似的分子组成 ,它们介导细胞黏附作用。近年的研究发现 ,钙粘连素分子的作用不仅仅局限于黏附功能 ,还具有识别细胞、调控组织器官形态发生、介导细胞信号转导... 钙粘连素 (cadherin)是主要的细胞黏附分子之一 ,钙粘连素家族由功能结构相似的分子组成 ,它们介导细胞黏附作用。近年的研究发现 ,钙粘连素分子的作用不仅仅局限于黏附功能 ,还具有识别细胞、调控组织器官形态发生、介导细胞信号转导甚至神经传导等更广泛的生物学功能 ,与肿瘤的发生及转移机制也有关 ,而且不断有新的家族成员被发现。 展开更多
关键词 钙粘连素 细胞黏附分子 信号转导 生物学功能
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睾丸生精细胞凋亡相关基因TSARG1与Mtsarg1的分子克隆及Mtsarg1基因的表达谱分析 被引量:9
6
作者 傅俊江 卢光琇 +3 位作者 李麓芸 刘刚 邢晓为 刘上峰 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期25-29,共5页
从已获得的在隐睾和正常睾丸对照中表达量有明显差异的EST片段 (GenBank登录号 :BE64 45 3 8)出发 ,利用生物信息学和实验技术 ,克隆了小鼠睾丸生精细胞凋亡相关新基因Mtsarg1及相应的人类新基因TSARG1,Gen Bank登录号分别为AF3 99971和... 从已获得的在隐睾和正常睾丸对照中表达量有明显差异的EST片段 (GenBank登录号 :BE64 45 3 8)出发 ,利用生物信息学和实验技术 ,克隆了小鼠睾丸生精细胞凋亡相关新基因Mtsarg1及相应的人类新基因TSARG1,Gen Bank登录号分别为AF3 99971和AY0 3 2 92 5。小鼠Mtsarg1与人类TSARG1基因在氨基酸水平有 5 5 %的一致性和 61%相似性 ,与其他已知蛋白质无明显同源性。小鼠 10种组织的RT -PCR分析结果表明 ,Mtsarg1基因在睾丸中高表达 ,在附睾中呈微弱表达 ,在其他组织不表达 。 展开更多
关键词 睾丸生精细胞 凋亡相关基因 TSARG1 Mtsarg1 Mtsarg1基因 分子克隆 表达谱分析
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精子发生相关基因的分子遗传学研究进展 被引量:12
7
作者 傅俊江 李麓芸 卢光琇 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期367-371,共5页
特发性无精、严重少精症的分子遗传学研究越来越广泛深入。近年来,控制精子发生的相关基因,主要包括位于Y染色体AZFa区的USP9Y和DBY、AZFb区的RBM基因、AZFc区的DAZ基因,和位于常染色体的DAZLA基因等在分子遗传学研究方面均取得了可喜... 特发性无精、严重少精症的分子遗传学研究越来越广泛深入。近年来,控制精子发生的相关基因,主要包括位于Y染色体AZFa区的USP9Y和DBY、AZFb区的RBM基因、AZFc区的DAZ基因,和位于常染色体的DAZLA基因等在分子遗传学研究方面均取得了可喜的进展。对这方面的研究进展及其展望进行了综述。 展开更多
关键词 男性不育 精子发生 基因 遗传学
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108例原发或继发闭经者的染色体分析 被引量:12
8
作者 谭玉梅 范立青 卢光琇 《中国医师杂志》 CAS 2003年第6期739-740,共2页
目的 分析不孕专科门诊中原发闭经和继发闭经患者中的染色体异常 ,为其生育提供指导。方法 按常规方法制备患者外周血淋巴细胞染色体 ,进行核型分析。结果 在 10 8例病人中共检出染色体异常 2 4例 ,异常检出率为 2 2 2 % ,主要涉及... 目的 分析不孕专科门诊中原发闭经和继发闭经患者中的染色体异常 ,为其生育提供指导。方法 按常规方法制备患者外周血淋巴细胞染色体 ,进行核型分析。结果 在 10 8例病人中共检出染色体异常 2 4例 ,异常检出率为 2 2 2 % ,主要涉及X染色体的数目和结构异常。结论 染色体异常是导致原发和继发闭经的重要原因之一 ,且主要涉及性染色体的异常 ,在对原发闭经和继发闭经患者进行助孕生殖前常规细胞遗传学检查十分必要。 展开更多
关键词 原发闭经 继发闭经 染色体异常
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人类睾丸生殖细胞凋亡相关基因的分子遗传学研究进展 被引量:5
9
作者 刘上峰 《国外医学(遗传学分册)》 2002年第3期169-173,共5页
人类睾丸生殖细胞的凋亡是一个多基因参与的复杂的过程 ,Bcl- 2 / Bax基因族、p5 3基因、CREM基因、Fas/ Apo- 1基因、HSP基因族、线粒体相关基因、i NOS基因、TRAIL及其受体基因以及 c- m yc基因等都在人类睾丸生殖细胞的凋亡过程中起... 人类睾丸生殖细胞的凋亡是一个多基因参与的复杂的过程 ,Bcl- 2 / Bax基因族、p5 3基因、CREM基因、Fas/ Apo- 1基因、HSP基因族、线粒体相关基因、i NOS基因、TRAIL及其受体基因以及 c- m yc基因等都在人类睾丸生殖细胞的凋亡过程中起到一定的作用。研究人类睾丸生殖细胞凋亡相关基因对一些临床疾病和抗生育都具有十分重要的意义。 展开更多
关键词 人类睾丸 生殖细胞 分子遗传学 研究进展 细胞凋亡 相关基因
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13q部分三体的分子细胞检测及其与斜颈体征的可能关系 被引量:9
10
作者 杜娟 谭跃球 +1 位作者 李麓芸 卢光琇 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 2003年第3期189-192,共4页
目的 探讨斜颈与 13号染色体部分三体的可能关系。方法 应用染色体显带技术结合荧光原位杂交确诊两个具有 13q部份三体典型临床症状病例的核型 ,并比较他们的临床表型与已报道病例的异同。结果 两例患者均为 13q14→qter的部分三体 ... 目的 探讨斜颈与 13号染色体部分三体的可能关系。方法 应用染色体显带技术结合荧光原位杂交确诊两个具有 13q部份三体典型临床症状病例的核型 ,并比较他们的临床表型与已报道病例的异同。结果 两例患者均为 13q14→qter的部分三体 ,尽管另一条衍生染色体不同 ,但他们都有斜颈临床体征。结论  13q14→ qter可能与斜颈相关 ,结合以前报道过的一篇文献 ,该基因更精确的定位可能为 展开更多
关键词 13q部分三体 分子细胞检测 斜颈 体征 荧光原位杂交
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类平衡易位综合征的发现及临床遗传学研究 被引量:10
11
作者 陈胜湘 刘丽 伍汉文 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第2期95-98,共4页
目的 :探讨大Y ,inv( 9) ,S+及 qh± 特殊的染色体结构异常板块的临床遗传学特征和染色体平衡易位二者之间的内在遗传学规律。方法 :采用二项分布四格表方式 ,对 980例平衡易位 ,大Y ,inv( 9) ,S+及qh± 进行统计学处理 ,并将 1... 目的 :探讨大Y ,inv( 9) ,S+及 qh± 特殊的染色体结构异常板块的临床遗传学特征和染色体平衡易位二者之间的内在遗传学规律。方法 :采用二项分布四格表方式 ,对 980例平衡易位 ,大Y ,inv( 9) ,S+及qh± 进行统计学处理 ,并将 10 0 9例的临床表现划分为四大主征 :自然流产、性发育异常、生育疾患及本人是病残者。结果 :10 0 9例平衡易位 ,大Y ,inv( 9) ,S+及 qh± 各自导致的主要临床特征具有高度的相似性 (P >0 .2~ 0 .5 0 )。结论 :该研究发现大Y ,inv( 9) ,S+及 qh± 导致的主要临床特征属“类平衡易位”综合征 ,表明了有性生殖过程中 ,配子之间分子水平的微小不等交换可能对后代产生遗传学效应 ,并可导致相应的临床特征 ,同时可能发生不同程度的性分化异常或影响个体表型和健康。这类携带者生育后代应做产前诊断。 展开更多
关键词 类平衡易位综合征 遗传学 研究 产前诊断
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用聚合酶链反应技术对脆性X综合征进行筛查与诊断 被引量:9
12
作者 李辉 李麓芸 +4 位作者 倪斌 吴嵩龄 殷照初 邹永华 陈敏 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期519-521,共3页
目的 建立脆性 X综合征大面积快速筛查与诊断的方法。方法 用 7- deza- d GTP的 PCR法扩增脆性位点智力低下 1基因 (fragile X mental retardation gene1,FMR1)的 (CGG) n 的重复区 ,检测CGG重复数的大小 ,对脆性 X综合征进行筛查 ;... 目的 建立脆性 X综合征大面积快速筛查与诊断的方法。方法 用 7- deza- d GTP的 PCR法扩增脆性位点智力低下 1基因 (fragile X mental retardation gene1,FMR1)的 (CGG) n 的重复区 ,检测CGG重复数的大小 ,对脆性 X综合征进行筛查 ;用甲基化特异性 PCR法直接检测 FMR1基因的 5′端 Cp G岛是否甲基化 ,对脆性 X综合征进行诊断。结果 在一家系 14个成员中 ,我们筛查出 2例脆性 X综合征携带者、5例患者 ;并用甲基化特异性 PCR法对筛查的结果进行了验证。结论 采用 7- deza- d GTP扩增 GC富集区的 PCR法可以对脆性 X综合征男性携带者及患者进行快速鉴定 ;用甲基化特异性 PCR法可以对脆性 X综合征患者进行快速诊断。两种方法也适用于脆性 X综合征的产前筛查与诊断。 展开更多
关键词 诊断 脆性X综合征 脆性位点智力低下1基因 三核苷酸重复 甲基化特异性聚合酶链反应
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植入前遗传学诊断的原理、方法及适应症 被引量:9
13
作者 李汶 卢光琇 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期315-319,共5页
植入前遗传学诊断是一种非常早的产前诊断 ,指在胚胎着床之前即对配子或胚胎的遗传物质进行分析 ,检测配子或胚胎是否有遗传物质异常 ,选择正常胚胎进行移植。与传统的产前诊断相比 ,能避免选择性流产异常妊娠给妇女带来的心身痛苦。本... 植入前遗传学诊断是一种非常早的产前诊断 ,指在胚胎着床之前即对配子或胚胎的遗传物质进行分析 ,检测配子或胚胎是否有遗传物质异常 ,选择正常胚胎进行移植。与传统的产前诊断相比 ,能避免选择性流产异常妊娠给妇女带来的心身痛苦。本文就该领域的发展及现状和其诊断原理、方法及适应症进行了总结和综述。 展开更多
关键词 植入前遗传学诊断 原理 方法 适应证 PCR FISH 产前诊断
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联合应用PCR-SSCP、PCR-限制性酶切和连锁分析法对脊髓性肌萎缩症进行产前基因诊断 被引量:6
14
作者 傅俊江 李麓芸 卢光琇 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期74-77,共4页
目的 建立脊髓性肌萎缩症 (SMA)的基因诊断方法 ,并且应用于SMA的产前基因诊断。方法 应用聚合酶链反应 (PCR) 单链构像多态性 (SSCP)分析和PCR 限制性酶切分析法对运动神经元存活基因 (SMNT)的第 7外显子进行缺失检测 ;应用紧靠SMN... 目的 建立脊髓性肌萎缩症 (SMA)的基因诊断方法 ,并且应用于SMA的产前基因诊断。方法 应用聚合酶链反应 (PCR) 单链构像多态性 (SSCP)分析和PCR 限制性酶切分析法对运动神经元存活基因 (SMNT)的第 7外显子进行缺失检测 ;应用紧靠SMN基因的微卫星标记进行单体型连锁分析。结果 家系 1的患者为两个SMNT基因的同源缺失 ,胎儿虽然未发现SMNT基因的同源缺失 ,但是从母亲那儿遗传了一条与患者相同的异常 5号染色体 ,是SMA携带者 ;家系 2的胎儿亦未发现SMNT基因的同源缺失。两家系先证者的母亲各生下了一名正常儿。结论 PCR SSCP分析、PCR 限制性酶切和单体型连锁分析法是诊断SMA的有效方法 ,三者联合使用可以相互验证、互为补充 ,提高产前基因诊断的准确率和成功率。 展开更多
关键词 脊髓性肌萎缩 聚合酶链反应 连锁 产前诊断
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应用荧光原位杂交技术检测人类APP_(SWE)基因在转基因小鼠染色体上的定位及位置效应 被引量:7
15
作者 刘薇 卢光琇 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第9期827-831,T001,T002,共7页
应用荧光原位杂交技术研究了人类淀粉样前体蛋白基因瑞典型突变(APPSWE)在转基因小鼠首建、F1及F2代小鼠染色体上的整合及定位,结果在2只首建转基因小鼠中,分别观察80个分裂相,出现杂交信号的核型分别为34及36个... 应用荧光原位杂交技术研究了人类淀粉样前体蛋白基因瑞典型突变(APPSWE)在转基因小鼠首建、F1及F2代小鼠染色体上的整合及定位,结果在2只首建转基因小鼠中,分别观察80个分裂相,出现杂交信号的核型分别为34及36个,检出率为42.5%和45%;1只F1及1只F2代转基因小鼠中,分别观察100个分裂相,出现杂交信号的核型分别为33及30个,检出率为33%和30%。转基因分别整合在 8号、1号、17号和2号染色体上。提示转基因APPSWE已稳定整合到转基因小鼠的染色体上,并通过生殖细胞遗传给子代,证实转基因在小鼠染色体上的整合可能是随机的多位点整合。同时,对不同整合位点的转基因小鼠进行了表型研究,结果发现不同整合位点对表型具明显影响。 展开更多
关键词 荧光原位杂交 APPSWE 转基因小鼠 位置效应 染色体定位
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巴氏染色法在精子顶体研究中的应用 被引量:5
16
作者 朱文兵 范立青 +1 位作者 曾亚荣 卢光琇 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期430-431,434,共3页
目的应用巴氏染色方法对临床上精子顶体区是否正常进行区分。方法分别对该研究所门诊111例精子标本进行巴氏染色后,每例标本在显微镜油镜下记数200个精子,观察顶体区。结果111例标本中,5例为无顶体圆头精子,23例为小顶体区精子,83例顶... 目的应用巴氏染色方法对临床上精子顶体区是否正常进行区分。方法分别对该研究所门诊111例精子标本进行巴氏染色后,每例标本在显微镜油镜下记数200个精子,观察顶体区。结果111例标本中,5例为无顶体圆头精子,23例为小顶体区精子,83例顶体区正常精子。结论巴氏染色法在临床上可对精子顶体区是否正常作出准确的判断。 展开更多
关键词 精子 顶体 巴氏染色
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粘多糖贮积症Ⅱ型患者艾杜糖-2-硫酸酯酶基因常见突变的检测 被引量:8
17
作者 刘上峰 李麓芸 +2 位作者 傅俊江 钟昌高 卢光琇 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期243-245,共3页
目的 探讨并建立粘多糖贮积症 型 (mucopolysaccharidosis ,MPS )患者艾杜糖 - 2 -硫酸酯酶 (iduronate- 2 - sulphatase,IDS)基因常见突变的检测方法。方法 应用聚合酶链反应 -单链构象多态性(polymerase chain reaction- single st... 目的 探讨并建立粘多糖贮积症 型 (mucopolysaccharidosis ,MPS )患者艾杜糖 - 2 -硫酸酯酶 (iduronate- 2 - sulphatase,IDS)基因常见突变的检测方法。方法 应用聚合酶链反应 -单链构象多态性(polymerase chain reaction- single strand conformation polymorphism,PCR- SSCP)对 IDS基因突变热点外显子 3、8和 9进行点突变检测 ;应用 DNA测序对 PCR- SSCP检出的突变进行序列分析 ;应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (polymerase chain reaction- restriction fragment length polymorphism,PCR-RFL P)对 DNA测序的结果进行检测。结果 经 PCR- SSCP发现该患者的 IDS基因外显子 9有明显异常泳动的条带 ;DNA测序发现患儿的外显子 9发生点突变 (C16 72 T) ,从而导致患者艾杜糖 - 2 -硫酸酯酶蛋白发生氨基酸替换 (R46 8W) ;PCR- RFL P电泳检测结果显示粘多糖贮积症 型患者仅出现 5 5 4bp 1条带 ,而患儿父母出现 2 5 7bp和 2 97bp 2条带 ,进一步验证了序列分析的结果。结论  PCR- SSCP分析、DNA序列分析和 PCR- RFL P分析是诊断 MPS 的有效方法 ,三者联合使用可以相互验证、互为补充 ,提高基因诊断的准确率和成功率。 展开更多
关键词 艾杜糖-2-硫酸酯酶 粘多糖贮积症Ⅱ型 聚合酶链反应-单链构象多态性 基因突变
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运用PCR对小鼠植入前胚胎进行性别诊断 被引量:5
18
作者 李汶 陆长富 卢光琇 《生命科学研究》 CAS CSCD 2001年第1期48-51,共4页
根据 C57BL6小鼠 Y染色体重复序列 1 4 5C5的碱基顺序 ,设计并合成一对引物 ,运用 PCR扩增昆明白小鼠植入前胚胎卵裂球 DNA,以确定其性别 .共对 1 0 8枚活检胚胎的相应卵裂球进行了性别诊断 ,获雄性胚 4 6枚 ,雌性胚 62枚 ,移植后分别... 根据 C57BL6小鼠 Y染色体重复序列 1 4 5C5的碱基顺序 ,设计并合成一对引物 ,运用 PCR扩增昆明白小鼠植入前胚胎卵裂球 DNA,以确定其性别 .共对 1 0 8枚活检胚胎的相应卵裂球进行了性别诊断 ,获雄性胚 4 6枚 ,雌性胚 62枚 ,移植后分别获雄性仔鼠 4只 ,准确率 1 0 0 % ( 4/4 ) ,雌性仔鼠 9只 ,准确率 70 %( 9/1 3) .本研究结果表明小鼠 Y染色体重复序列 1 4 5C5的碱基顺序在 C57BL6小鼠和昆明白小鼠中基本一致 ;为农牧业动物进行性别选择和运用 展开更多
关键词 植入前遗传学诊断 胚胎 聚合酶链反应 性别鉴定 小鼠
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染色体末端微小结构异常的分子细胞遗传检测 被引量:5
19
作者 谭跃球 李麓芸 卢光琇 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第9期753-756,T001,共5页
为检出易于被忽略的染色体末端微小结构异常 ,为生育提供指导 ,选取特异性 7号全染色体探针、X染色体长臂探针和 7q亚端粒 (7q36→qter)探针 ,用荧光原位杂交 (fluorescenceinsituhybridization ,FISH)结合G显带技术分析 2个病例 ,其中... 为检出易于被忽略的染色体末端微小结构异常 ,为生育提供指导 ,选取特异性 7号全染色体探针、X染色体长臂探针和 7q亚端粒 (7q36→qter)探针 ,用荧光原位杂交 (fluorescenceinsituhybridization ,FISH)结合G显带技术分析 2个病例 ,其中病例 1有不良妊娠史并疑有末端微小易位 ,病例 2在G显带水平已发现为X和 7号染色体易位的卵巢早衰患者。结果表明 ,FISH确诊病例 1为染色体末端的隐匿易位 ,病例 2的易位断点得到精确定位 ,它不在 7q36而在 7q末端。应用特异性染色体探针及亚端粒探针 ,通过FISH技术可以确诊染色体末端区域的微小结构异常 ,在临床遗传学中有广泛的应用 。 展开更多
关键词 FISH 隐匿易位 反复自然流产 卵巢早衰 染色体末端 微小结构异常 分子细胞遗传检测
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人原始生殖细胞体外培养的初步研究 被引量:5
20
作者 唐奕 卢光琇 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第5期473-476,共4页
目的 :探讨人原始生殖细胞体外培养条件 ,初步建立人原始生殖细胞体外培养体系及鉴定其部分生物学特性。方法 :从受精后 4~ 12周的人胚中分离原始生殖嵴 /腺获得原始生殖细胞 ,以昆明种小白鼠胚胎成纤维细胞为饲养层 ,在多种细胞因子... 目的 :探讨人原始生殖细胞体外培养条件 ,初步建立人原始生殖细胞体外培养体系及鉴定其部分生物学特性。方法 :从受精后 4~ 12周的人胚中分离原始生殖嵴 /腺获得原始生殖细胞 ,以昆明种小白鼠胚胎成纤维细胞为饲养层 ,在多种细胞因子的共同作用下培养。结果 :获得大量的原始生殖细胞集落。传至 6代后 ,细胞集落呈典型的鸟巢状 ,碱性磷酸酶检测呈阳性 ,表达SSEA 1,SSEA 3,SSEA 4 ,TRA 1 6 0和TRA 1 81抗原 ,同时在体外能自发分化为多种细胞。结论 :初步建立人原始生殖细胞体外培养体系 ,成功的将人原始生殖细胞在体外传 6代 。 展开更多
关键词 人胚 原始生殖细胞 体外培养 碱性磷酸酶 表面标记
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