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穿孔素基因启动子的克隆及体外区域性高甲基化
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作者 袁娟 肖嵘 +7 位作者 陆前进 李亚萍 杨心洁 汪峰 湛意 张桂英 张静 周英 《中国医师杂志》 CAS 2009年第7期871-874,共4页
目的克隆穿孔素基因启动子区域(PRF1),并对PRF1进行体外区域性高甲基化,为探讨穿孔素基因调控序列高甲基化能否引起穿孔素表达下调奠定基础。方法PCR扩增穿孔素基因启动子区域(PRFI)后,先将PRFI克隆到T载体,再定向亚克隆至报告... 目的克隆穿孔素基因启动子区域(PRF1),并对PRF1进行体外区域性高甲基化,为探讨穿孔素基因调控序列高甲基化能否引起穿孔素表达下调奠定基础。方法PCR扩增穿孔素基因启动子区域(PRFI)后,先将PRFI克隆到T载体,再定向亚克隆至报告基因载体;然后对PRF1片段进行体外区域性高甲基化。结果(1)克隆PRF1到报告基因载体pGL3-Basic后双酶切及测序鉴定结果正确。(2)对PRF1片段进行体外区域性高甲基化后鉴定显示PRF1片段区域性高甲基化完全。结论成功克隆PRF1至报告基因载体pGL3-Basic并对PRF1片段进行体外区域性高甲基化,为今后研究奠定了基础。 展开更多
关键词 膜糖蛋白类/生物合成 克隆 分子 DNA甲基化
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