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IFN-γ对人脐带间充质干细胞细胞因子分泌和免疫调节蛋白表达的体外细胞学研究 被引量:5
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作者 王立林 傅泽钦 +7 位作者 廖延 胡隽源 曾桂芳 胡樾 曾伟杰 谢长峰 曾劲峰 刘沐芸 《中国输血杂志》 CAS 2020年第9期865-871,共7页
目的从细胞学方面探讨治疗新冠肺炎患者临床使用的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)在体外连续制备过程中其细胞因子和免疫调节蛋白的基础分泌水平,以及探究IFN-γ刺激hUC-MSCs后对细胞因子和免疫调节蛋白的影响。方法首先,利用ELISA等方... 目的从细胞学方面探讨治疗新冠肺炎患者临床使用的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)在体外连续制备过程中其细胞因子和免疫调节蛋白的基础分泌水平,以及探究IFN-γ刺激hUC-MSCs后对细胞因子和免疫调节蛋白的影响。方法首先,利用ELISA等方法检测在连续传代扩增hUC-MSCs中多种细胞因子(IL-6、IL-1β、TGF-β、HGF和PGE-2)和免疫调节蛋白(PD-L1和IDO1)的基础表达水平和稳定性;其次,探究hUC-MSCs受到炎症因子IFN-γ刺激后因子分泌和蛋白表达的变化情况。结果 hUC-MSCs在连续传代中其9种MSC相关表面标志物没有明显改变;P0代hUC-MSCs分泌高水平的HGF和TGF-β,但会随着传代增加而分泌水平显著下降;而IL-6和PGE-2则会随着传代增加而分泌上升;IL-1β总体基础表达水平不高;同时,WB和流式结果显示,免疫抑制相关的蛋白IDO1和PD-L1在正常情况下几乎不表达。而当hUC-MSCs受到炎症因子IFN-γ刺激后,细胞因子分泌普遍没有明显上调,其中HGF和PGE-2刺激后还出现了显著下降的趋势;但是免疫抑制相关蛋白IDO1和PD-L1的表达却显著上升,具有统计学意义。结论 hUC-MSCs在连续传代过程中不同细胞因子的表达水平变化具有一定的差别。在受到炎症因子IFN-γ的激活后,可能通过提高IDO1和PD-L1的蛋白表达来发挥免疫抑制的作用。此结果为hUC-MSCs治疗新冠肺炎临床疗效提供理论依据。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 新型冠状病毒肺炎 细胞因子风暴 干扰素-Γ
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中、美脐带血造血干细胞质量控制标准比对分析 被引量:2
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作者 曾庆想 李婵 +1 位作者 李佩芳 徐绍坤 《中国标准化》 2021年第15期191-196,共6页
脐带血造血干细胞移植技术在人类血液疾病、先天性疾病方面的应用越来越多,而作为一种直接输注入人体的产品,脐带血造血干细胞的质量控制必须考虑采集、运输、制备等各个环节存在的风险。本文研究了中、美两国在脐带血造血干细胞质量控... 脐带血造血干细胞移植技术在人类血液疾病、先天性疾病方面的应用越来越多,而作为一种直接输注入人体的产品,脐带血造血干细胞的质量控制必须考虑采集、运输、制备等各个环节存在的风险。本文研究了中、美两国在脐带血造血干细胞质量控制方面的标准现状,并对两国相关的主要质量控制标准检测指标进行对比分析,从标准化的角度找出两国之间的差异并提出参考建议。 展开更多
关键词 脐带血造血干细胞 质量 标准比对
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干细胞标准化的研究进展
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作者 曾庆想 李淳伟(综述) +1 位作者 李婵 徐绍坤(审校) 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1143-1148,1152,共7页
干细胞是一类具有无限自我更新能力的细胞,可分化成多种功能细胞,因此已广泛应用于细胞替代治疗、系统重建、组织工程、基因治疗及美容抗衰老等方面的研究,应用前景广阔。标准化是组织现代化生产的重要手段和必要条件,是科研、生产、应... 干细胞是一类具有无限自我更新能力的细胞,可分化成多种功能细胞,因此已广泛应用于细胞替代治疗、系统重建、组织工程、基因治疗及美容抗衰老等方面的研究,应用前景广阔。标准化是组织现代化生产的重要手段和必要条件,是科研、生产、应用三者之间的桥梁。各国在不断加强对干细胞技术深入研究的同时,也已开启了干细胞相关标准化研究工作。本文就干细胞技术的应用和市场发展现状及干细胞领域标准化研究进展情况作一综述,以期为行业相关从业人员提供参考。 展开更多
关键词 干细胞 标准化 应用
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人脐带间充质干细胞在Balb/c裸鼠体内的分布情况研究 被引量:1
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作者 谢长峰 马炜 +5 位作者 彭浩 杨晓菲 曾桂芳 刘云城 刘沐芸 胡祥 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2018年第1期6-11,共6页
目的研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)在Bal B/c裸鼠体内的分布。方法采用DiR标记hUCMSCs,以MTT法检测标记hUCMSCs体外培养的生长增殖,流式细胞术检测标记hUCMSCs的细胞表型,以诱导分化法检测标记hUCMSCs的成骨、成脂、成软骨诱导分化能... 目的研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)在Bal B/c裸鼠体内的分布。方法采用DiR标记hUCMSCs,以MTT法检测标记hUCMSCs体外培养的生长增殖,流式细胞术检测标记hUCMSCs的细胞表型,以诱导分化法检测标记hUCMSCs的成骨、成脂、成软骨诱导分化能力,小动物活体成像法检测DiR标记hUCMSCs尾静脉给药后在小鼠体内的分布情况。采用t检验对测得的hUCMSCs增殖数据进行统计分析。结果 0,24,48,72,96,120 h MTT法测得的DiR标记hUCMSCs吸光度值与未标记组相比差异无统计学意义,DiR标记对hUCMSCs细胞表型没有明显影响,对其成骨、成脂、成软骨多向诱导分化能力没有影响,DiR标记hUCMSCs尾静脉给药后,荧光首先分布于肺脏,随时间逐渐迁移至肝脏和脾脏,最终归巢和分布于肝脏、脾脏和肺脏,荧光强度肝脏>脾脏>肺脏,随时间逐渐减弱,至4周时动物肝脏、脾脏和肺脏仍有荧光存在。结论 DiR标记不影响hUCMSCs体外增殖、细胞表型表达和多向诱导分化能力,DiR标记hUCMSCs尾静脉注射后首先分布在肺脏,存在明显的首过效应,然后逐渐迁移至肝脏和脾脏,主要分布和归巢在肝脏、脾脏和肺脏。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 分布 归巢 活体成像
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冻存前后人脐带间充质干细胞对T和B淋巴细胞免疫抑制能力的差异比较 被引量:1
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作者 曾伟杰 廖延 +7 位作者 胡樾 胡隽源 曾桂芳 傅泽钦 伍世铎 梁晓 谢长峰 刘沐芸 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2021年第4期200-206,共7页
目的探讨冻存前和复苏后人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对T和B淋巴细胞免疫抑制能力的差异。方法分离健康人外周血单个核细胞,使用Anti-CD3和Anti-CD28单克隆抗体体外激活T淋巴细胞,使用ODN2395,hCD40L,羊抗人IgM抗体和白介素2体外刺激经... 目的探讨冻存前和复苏后人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对T和B淋巴细胞免疫抑制能力的差异。方法分离健康人外周血单个核细胞,使用Anti-CD3和Anti-CD28单克隆抗体体外激活T淋巴细胞,使用ODN2395,hCD40L,羊抗人IgM抗体和白介素2体外刺激经过分选的B淋巴细胞,通过冻存前后hUCMSCs进行干预处理,与活化后的T和B淋巴细胞进行共培养,分为单独刺激组(激活后的T或B淋巴细胞单独培养)与hUCMSCs共培养组(激活后的T或B淋巴细胞分别与hUCMSCs共培养),分析hUCMSCs对激活的T和B淋巴细胞的免疫抑制作用,探究冻存前后hUCMSCs免疫调节作用的差异。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用重复测量设计方差分析。结果与冻存前hUCMSCs对比,冻存后hUCMSCs在抑制CD3^(+)T细胞(37.60﹪±0.54﹪比39.40﹪±1.57﹪)、CD4^(+)T细胞(36.87﹪±0.54﹪比38.63﹪±1.39﹪)和CD8^(+)T细胞增殖能力(40.37﹪±1.14﹪比42.47﹪±1.90﹪)比较,差异无统计学意义(P均>0.05);在促进CD3^(+)T(18.07﹪±0.66﹪比16.77﹪±1.15﹪)、CD4^(+)T(26.47﹪±1.13﹪比24.60﹪±1.47﹪)和CD8^(+)T细胞凋亡能力(3.52﹪±0.22﹪比2.72﹪±0.06﹪),差异无统计学意义(P均>0.05);增加Treg细胞群比例能力(5.51﹪±0.71﹪比6.87﹪±0.27﹪),差异无统计学意义(P>0.05);降低Th1亚群(0.47﹪±0.09﹪比0.33﹪±0.04﹪)和Th17亚群比例能力(0.21﹪±0.04﹪比0.22﹪±0.03﹪),差异无统计学意义(P均>0.05);在对B淋巴细胞增殖能力(38.83﹪±0.25﹪比34.23﹪±4.12﹪),促进B淋巴细胞的凋亡能力(54.95﹪±1.45﹪比55.10﹪±3.80﹪),减少IgA[(1045.09±99.24)ng/mL比(1014.31±102.55)ng/mL]和IgG抗体的分泌能力[(120.51±4.94)ng/mL比(127.77±7.94)ng/mL],差异无统计学意义(P均>0.05)。而在降低Th2细胞亚群比例(0.73﹪±0.07﹪比0.49﹪±0.06﹪)和降低IgM抗体分泌[(739.70±28.39)ng/mL比(560.21±3.81)ng/mL]的能力上,冻存前hUCMSCs的作用能力弱于复苏后hUCMSCs,差异具有统计� 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 T淋巴细胞 B淋巴细胞 免疫调节
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脐血与老人外周血中TIMP2蛋白检测的影响因素及意义 被引量:1
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作者 曾桂芳 曾伟杰 +4 位作者 蔡菲子 胡樾 张沁坤 梁晓 刘沐芸 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2019年第4期211-215,共5页
目的探讨不同血浆处理方式对脐血和老人外周血血浆中TIMP2蛋白检测的影响,建立人血浆中TIMP2蛋白检测方法的同时为联合干细胞延缓衰老提供理论基础。方法采集了15份脐带血和15份老人外周血,利用不同的离心力、不同的储存温度和不同的检... 目的探讨不同血浆处理方式对脐血和老人外周血血浆中TIMP2蛋白检测的影响,建立人血浆中TIMP2蛋白检测方法的同时为联合干细胞延缓衰老提供理论基础。方法采集了15份脐带血和15份老人外周血,利用不同的离心力、不同的储存温度和不同的检测试剂盒对血浆中TIMP2蛋白最终检测含量的影响。多组均数差异比较采用单因素方差分析,两组比较采用独立样本t检验。结果1000×g、1500×g和2000×g离心力组组间TIMP2蛋白含量差异无统计学意义(P>0.05)。4℃、-20℃、-80℃保存组,保存一周或者两周TIMP2蛋白含量差异均无统计学意义(P>0.05)。利用R&D Systems、Abnova和Abcam检测试剂盒均不对全血中TIMP2蛋白最终检测量产生显著影响(P>0.05)。脐带血中的TIMP2蛋白含量(147.00±15.92)pg/ml高于老人外周血中TIMP2蛋白含量(79.56±10.80)pg/ml,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论不同离心力、血浆储存温度及检测试剂盒间均不影响脐血和老人外周血中TIMP2蛋白最终的检测含量,且脐血血浆中TIMP2蛋白含量高于老人外周血。显示TIMP2蛋白可能与衰老存在直接的相关性,具有与干细胞联合治疗并延缓衰老的潜在价值。 展开更多
关键词 脐血 老年人 外周血 TIMP2蛋白 干细胞 抗衰老
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标准创新示范基地评价对团体标准质量提升的启示
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作者 曾庆想 李淳伟 +2 位作者 李婵 李佩芳 徐绍坤 《中国标准化》 2021年第16期85-89,共5页
国务院2015年发布《深化标准化工作改革方案》,提出要培育发展团体标准后,团体标准在国内的发展速度急剧增加,与此同时也出现了一系列的问题,如标准质量水平参差不齐、管理不规范等问题。本文通过对深圳市标准创新示范基地评价的分析,... 国务院2015年发布《深化标准化工作改革方案》,提出要培育发展团体标准后,团体标准在国内的发展速度急剧增加,与此同时也出现了一系列的问题,如标准质量水平参差不齐、管理不规范等问题。本文通过对深圳市标准创新示范基地评价的分析,对照团体标准存在的问题,提出团体标准质量提升的建议。 展开更多
关键词 团体标准 评价 质量提升
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