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松嫩平原盐碱地中耐(嗜)盐菌的生物多样性 被引量：14
1
作者 潘媛媛 黄海鹏 +7 位作者 孟婧 肖鸿禹 李成 孟琳 洪闪 刘贺男 王雪枫 姜巨全 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1187-1194,共8页
【目的】分离纯化松嫩平原盐碱地中可培养的耐盐菌和嗜盐菌,并分析其生物多样性。【方法】采用纯培养法和定向富集法从该地区盐碱土样中分离耐盐菌和嗜盐菌,然后通过16S rRNA基因同源性比对鉴定所分离细菌的系统发育学地位,从而获取松... 【目的】分离纯化松嫩平原盐碱地中可培养的耐盐菌和嗜盐菌,并分析其生物多样性。【方法】采用纯培养法和定向富集法从该地区盐碱土样中分离耐盐菌和嗜盐菌,然后通过16S rRNA基因同源性比对鉴定所分离细菌的系统发育学地位,从而获取松嫩平原盐碱地中耐盐菌和嗜盐菌的多样性信息。【结果】共分离到细菌40株,分属于细菌域中3个门(Actinobacteria,Firmicutes,γ-Proteobacteria)、8个科、16个属、34个种。其中多数菌株属于厚壁菌门(Firmicutes),最优势属为葡球菌属(Staphylococcus)(8株,占总菌株的20%),其次依次为盐单胞菌属(Halomonas)(5株,12.5%)、芽胞杆菌属(Bacillus)(4株,10%)、大洋芽胞杆菌属(Oceanbacillus)(4株,10%)、库克菌属(Kocuria)(4株,10%)和假单胞菌属(Pseudomonas)(3株,7.5%)等。其中9株细菌的16S rRNA基因序列与最近缘种的同源性在97.2%-99.0%之间,可能为新种。菌株耐盐能力主要在5%-10%之间,其中62.5%的菌株为耐盐菌,其余则为中度嗜盐菌。所有菌株的耐碱能力在pH 9-12之间,其中60%的菌株耐碱能力则高达pH 12,除两株为嗜碱菌,其余均为耐碱菌。【结论】研究结果表明,松嫩平原盐碱地中耐盐菌与嗜盐菌种群丰富,主要以葡萄球菌和盐单胞菌为主,菌株不仅耐盐能力高而且耐碱能力也高,并且该地区可能含有丰富的耐盐菌和嗜盐菌的新物种。 展开更多
关键词 耐盐菌 嗜盐菌 16S RRNA基因序列 生物多样性 松嫩平原盐碱地
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IBDV强、弱毒VP2诱饵载体构建及在酵母双杂交系统中自激活作用的检测 被引量：3
2
作者 李铁强 高玉龙 +3 位作者 高宏雷 邓小芸 王笑梅 王立群 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期1-4,共4页
采用Gateway技术将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)Gx株和Gt株vp2基因分别克隆到载体pDEST-32构建诱饵载体,通过酶切和PCR鉴定并测序正确后,用醋酸锂法转化酵母菌株MaV203,通过缺陷型平板筛选和X-gal颜色筛选检测诱饵载体有无自激活作用。... 采用Gateway技术将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)Gx株和Gt株vp2基因分别克隆到载体pDEST-32构建诱饵载体,通过酶切和PCR鉴定并测序正确后,用醋酸锂法转化酵母菌株MaV203,通过缺陷型平板筛选和X-gal颜色筛选检测诱饵载体有无自激活作用。结果表明,成功构建了诱饵载体pDEST-32-Gxvp2和pDEST-32-Gtvp2,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活作用。为下一步利用酵母双杂交方法从鸡法氏囊B淋巴细胞和鸡胚成纤维细胞cDNA表达文库中筛选与强、弱毒VP2诱饵载体作用的分子奠定了基础。 展开更多
关键词 IBDV 酵母双杂交 诱饵载体 自激活
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肺癌基因治疗新思路:肺癌细胞血管内皮生长因子表达的抑制 被引量：2
3
作者 李春艳 成小松 +3 位作者 崔美芝 王颖 李曦 李景鹏 《中国临床康复》 CAS CSCD 2004年第32期7215-7217,共3页
目的:探讨硫修饰和脂质体包裹的反义寡核苷酸(ASODN)抑制Lewis肺癌细胞血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因表达的效应,减少肺切除导致的呼吸功能衰竭发生的可能性。方法:将经脂质体包裹并部分硫代修饰后的VEGF... 目的:探讨硫修饰和脂质体包裹的反义寡核苷酸(ASODN)抑制Lewis肺癌细胞血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因表达的效应,减少肺切除导致的呼吸功能衰竭发生的可能性。方法:将经脂质体包裹并部分硫代修饰后的VEGFASODN,正义寡核苷酸(SODN),错义寡核苷酸(MODN)加入培养的Lewis肺癌细胞中,采用免疫组织化学SP法及RT-PCR技术检测肺癌细胞中VEGF蛋白及VEGFmRNA表达,同时测定各上清液刺激血管内皮细胞生长的受抑情况。结果:VEGFASODN能明显抑制Lewis肺癌细胞VEGF蛋白及VEGFm-RNA的表达,而且可以通过抑制VEGF的表达抑制内皮细胞的生长,并对内皮细胞的抑制作用存在浓度依赖性,5,10,20μmol/L浓度组的内皮细胞生长抑制率分别约为13.77%,48.85%,76.29%。VEGFSODN和VEGFMODN却无此作用。结论:VEGFASODN抑制肺癌细胞表达VEGF,进而抑制内皮细胞生长,可以成为肺癌基因治疗的一种新的策略。 展开更多
关键词 寡核苷酸类 反义 内皮生长因子 肺肿瘤 病理学 肿瘤细胞 培养的 脂质体
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