目的 获取大鼠小脑特异表达的 c DNA序列 ,比较 SSH方法的特点。方法 以大鼠大脑和脑干 m RNA逆转录 c DNA作为 driver(驱动 ) c DNA,大鼠小脑 m RNA逆转录 c DNA作为 Tester(测试 ) c DNA,经抑制性消减杂交法 ,去除与大脑及脑干相同...目的 获取大鼠小脑特异表达的 c DNA序列 ,比较 SSH方法的特点。方法 以大鼠大脑和脑干 m RNA逆转录 c DNA作为 driver(驱动 ) c DNA,大鼠小脑 m RNA逆转录 c DNA作为 Tester(测试 ) c DNA,经抑制性消减杂交法 ,去除与大脑及脑干相同的 c DNA,从而获得大鼠小脑特异表达基因。然后克隆制备成大鼠小脑特异表达 c DNA文库。结果 经消减杂交、克隆 ,挑选出 32个阳性质粒。最后用反 Northern杂交去除假阳性 ,筛选出 8个有意义的差异表达 c DNA基因片段。同时 ,将测序结果进行同源性比较 ,发现其中 6个 c DNA是新 EST序列。结论 用 SSH方法筛选差异表达序列非常有效 。展开更多
文摘目的 获取大鼠小脑特异表达的 c DNA序列 ,比较 SSH方法的特点。方法 以大鼠大脑和脑干 m RNA逆转录 c DNA作为 driver(驱动 ) c DNA,大鼠小脑 m RNA逆转录 c DNA作为 Tester(测试 ) c DNA,经抑制性消减杂交法 ,去除与大脑及脑干相同的 c DNA,从而获得大鼠小脑特异表达基因。然后克隆制备成大鼠小脑特异表达 c DNA文库。结果 经消减杂交、克隆 ,挑选出 32个阳性质粒。最后用反 Northern杂交去除假阳性 ,筛选出 8个有意义的差异表达 c DNA基因片段。同时 ,将测序结果进行同源性比较 ,发现其中 6个 c DNA是新 EST序列。结论 用 SSH方法筛选差异表达序列非常有效 。
