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D-柠檬烯诱导人膀胱癌细胞周期阻滞及凋亡的研究 被引量：23
1
作者 徐耀庭 李劲松 +4 位作者 顾炜 和桂芬 李杜渐 黄汝强 许晓文 《中国医学工程》 2010年第3期6-9,共4页
目的探讨D-柠檬烯对人膀胱癌EJ细胞增殖、细胞周期分布以及凋亡的影响。方法用XTT法、流式细胞技术(碘化丙啶)和流式细胞仪AnnexinV法对D-柠檬烯处理后EJ细胞增殖、周期分布以及凋亡率进行检测。结果经2、4mmol/L浓度D-柠檬烯处理后,EJ... 目的探讨D-柠檬烯对人膀胱癌EJ细胞增殖、细胞周期分布以及凋亡的影响。方法用XTT法、流式细胞技术(碘化丙啶)和流式细胞仪AnnexinV法对D-柠檬烯处理后EJ细胞增殖、周期分布以及凋亡率进行检测。结果经2、4mmol/L浓度D-柠檬烯处理后,EJ细胞增殖活性(OD值)分别为0.801±0.016和0.148±0.008,与对照组(1.218±0.031)比较,生长受到明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞周期分析显示,给药组的合成期(S)细胞百分比为23.05%,而未给药的对照组为38.59%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。另外,D-柠檬烯作用24h后的EJ细胞出现典型的亚二倍体凋亡峰,药物浓度越高凋亡细胞越多,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 D-柠檬烯对人膀胱癌EJ细胞具有显著的抑制作用;它还能使EJ细胞停滞于S期,并能诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 D-柠檬烯 膀胱肿瘤 癌 细胞周期 细胞凋亡
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耐热对硝基苯磷酸酶的酶学性质
2
作者 冯从经 伏媛媛 +4 位作者 季朝能 顾少华 符文俊 谢毅 毛裕民 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期648-652,共5页
通过分离纯化和酶学性质测定 ,确定耐热对硝基苯磷酸酶 (p nitrophenylphosphatase)是金属酶蛋白 ,活性部位含有镁离子 ;该酶是中度耐热蛋白质 ,金属离子有助于提高其热稳定性 .该酶的Km 为 3 0 31mmol L ,Vmax为 313 5 μmol·min-... 通过分离纯化和酶学性质测定 ,确定耐热对硝基苯磷酸酶 (p nitrophenylphosphatase)是金属酶蛋白 ,活性部位含有镁离子 ;该酶是中度耐热蛋白质 ,金属离子有助于提高其热稳定性 .该酶的Km 为 3 0 31mmol L ,Vmax为 313 5 μmol·min-1·mg-1;二级结构中大约有 74 5 %α螺旋 ,2 5 5 % β转角 .在pH 7 0～ 12 0范围内相当稳定 .该酶在SDS溶液中稳定性较差 ,在TritonX 10 0溶液中较为稳定 ,在Tween 2 0溶液中很稳定 . 展开更多
关键词 耐热对硝基苯磷酸酶 酶学性质 热稳定性 金属离子 二级结构
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SMART技术构建白念珠菌全长cDNA文库 被引量：4
3
作者 徐铮 曹永兵 +5 位作者 高平挥 张军东 曹颖瑛 唐榕 应康 姜远英 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1090-1093,共4页
目的 :为克隆和研究白念珠菌新耐药相关基因 ,应用 SMART(switching m echanism at5′end of RNA transcript)技术 ,快速构建高质量的白念珠菌全长 c DNA文库。方法 :采用 TRIzol试剂提取不同生长期、不同药物刺激的白念珠菌 SC5 314的... 目的 :为克隆和研究白念珠菌新耐药相关基因 ,应用 SMART(switching m echanism at5′end of RNA transcript)技术 ,快速构建高质量的白念珠菌全长 c DNA文库。方法 :采用 TRIzol试剂提取不同生长期、不同药物刺激的白念珠菌 SC5 314的总 RNA,经 Oligotex试剂盒纯化得到 m RNA。利用含 Sfi B酶切位点的 CDS /3′PCR引物合成 c DNA第 1条链 ,而含Sfi A酶切位点的 SMART寡核苷酸作为 c DNA第 1条链在 m RNA5′端延伸出去的模板。 L D- PCR合成双链 c DNA,经Sfi 酶切和过柱分级分离后 ,与 p BSF质粒进行连接 ,随后转化大肠杆菌 ,构建成全长 c DNA文库。测序验证部分插入 c DNA的全序列 ,计算全长性比例。 结果 :构建好的文库中含有约 1.1× 10 6的重组子 ,重组率为 97.6 % ,插入 c DNA长度为 75 0～30 0 0 bp,且大部分在 1.5 kb以上。测定 6 0个克隆的全序列 ,经生物信息学分析 ,全长性比例在 5 0 %以上。结论 :成功构建了白念珠菌全长 c DNA文库 ,为进一步筛选、克隆白念珠菌耐药相关基因奠定了基础。 展开更多
关键词 全长CDNA文库 白念珠菌 抗药性 SMART
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