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miR-296靶向FGFR1对卵巢癌细胞生长、迁移及侵袭的影响
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作者 李忆东 李婷婷 +1 位作者 赵珠峰 吴国忠 《西部医学》 2023年第5期648-653,共6页
目的探讨miR-296靶向成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)对卵巢癌细胞生长、迁移及侵袭的影响。方法体外培养人SK-OV-3细胞,并将细胞分为对照组、miR-296 NC组、miR-296 mimics组、miR-296 mimics+FGFR1 NC组、miR-296 mimics+FGFR1组。实... 目的探讨miR-296靶向成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)对卵巢癌细胞生长、迁移及侵袭的影响。方法体外培养人SK-OV-3细胞,并将细胞分为对照组、miR-296 NC组、miR-296 mimics组、miR-296 mimics+FGFR1 NC组、miR-296 mimics+FGFR1组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-296、FGFR1 mRNA水平;细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力;Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力;蛋白免疫印迹(WB)法检测增殖、迁移和侵袭蛋白的表达;双荧光素酶报告实验分析miR-296与FGFR1的靶向关系。结果与对照组比较,miR-296 mimics组miR-296表达显著升高,FGFR1 mRNA表达显著降低(P<0.05);与miR-296 mimics组比较,miR-296 mimics+FGFR1组miR-296表达差异无统计学意义(P>0.05),FGFR1 mRNA表达显著升高(P<0.05)。与对照组比较,miR-296 mimics组细胞活力、迁移和侵袭细胞数目、蛋白FGFR1、增殖蛋白β-catenin、CyclinD1、迁移蛋白MMP-2、侵袭蛋白N-cadherin表达显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05);与miR-296 mimics组比较,miR-296 mimics+FGFR1组细胞活力、迁移和侵袭细胞数目、蛋白FGFR1、β-catenin、CyclinD1、MMP-2、N-cadherin表达显著升高,E-cadherin蛋白表达显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告实验表明miR-296和FGFR1存在靶向关系。结论miR-296可能通过靶向FGFR1抑制SK-OV-3细胞EMT途径,抑制细胞生长、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 miR-296 成纤维细胞生长因子受体1 卵巢癌 迁移 侵袭
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miR-125b靶向Fas/FasL信号传导途径影响胃癌细胞增殖
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作者 李忆东 李婷婷 +1 位作者 赵珠峰 吴国忠 《中国医师杂志》 CAS 2022年第6期854-858,共5页
目的探究miR-125b在凋亡相关蛋白(Fas)/凋亡相关蛋白配体(FasL)信号介导胃癌细胞生长中的调控作用。方法体外培养胃癌SGC-7901细胞,将miR-125b inhibitor序列、NC序列、转染试剂分别转染至SGC-7901细胞中,分为miR-125b抑制组、NC组、Con... 目的探究miR-125b在凋亡相关蛋白(Fas)/凋亡相关蛋白配体(FasL)信号介导胃癌细胞生长中的调控作用。方法体外培养胃癌SGC-7901细胞,将miR-125b inhibitor序列、NC序列、转染试剂分别转染至SGC-7901细胞中,分为miR-125b抑制组、NC组、Control组。用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测转染后细胞miR-125b表达,CCK-8法检测细胞增殖情况;平板细胞克隆形成实验检测菌落形成情况;流式细胞术检测细胞凋亡以及周期情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Fas、FasL的蛋白表达;荧光素酶活性测定检测miR-125b对Fas的靶向调控作用。结果miR-125b抑制组细胞miR-125b表达水平及细胞菌落形成数量显著低于Control组、NC组,细胞增殖抑制率、凋亡率显著高于Control组、NC组(均P<0.05)。miR-125b抑制组G1期DNA含量显著高于Control组、NC组,S期细胞DNA含量显著低于Control组、NC组(均P<0.05)。miR-125b抑制组Fas、FasL蛋白表达显著高于Control组、NC组(均P<0.05)。Fas mRNA的3′-UTR中存在miR-125b的靶位点,与NC+Fas 3′UTR-Wt组相比,miR-125b抑制组+Fas 3′-UTR-Wt组荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。结论抑制miR-125b表达后可激活Fas/FasL信号进而抑制SGC-7901细胞增殖,引起细胞周期G1期阻滞,促进其凋亡。 展开更多
关键词 胃肿瘤 细胞系 肿瘤 miR-125b Fas相关死亡结构域蛋白质 Fas配体蛋白质
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胡椒碱对DMH/DSS诱导实验性结肠癌变的影响及其机制
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作者 李忆东 李婷婷 +1 位作者 赵珠峰 吴国忠 《中国医师杂志》 CAS 2022年第10期1493-1497,1503,共6页
目的探讨胡椒碱对1,2-二甲基肼(DMH)/右旋糖酐硫酸钠(DSS)诱导实验性结肠癌肿瘤细胞生长和增殖的影响及其具体机制。方法将36只小鼠分为对照组、模型组和胡椒碱组,每组12只。对照组给予生理盐水灌胃;模型组和胡椒碱组通过DMH/DSS复合法... 目的探讨胡椒碱对1,2-二甲基肼(DMH)/右旋糖酐硫酸钠(DSS)诱导实验性结肠癌肿瘤细胞生长和增殖的影响及其具体机制。方法将36只小鼠分为对照组、模型组和胡椒碱组,每组12只。对照组给予生理盐水灌胃;模型组和胡椒碱组通过DMH/DSS复合法建立实验性结肠癌模型后分别给予生理盐水和胡椒碱3.6 mg/(kg·d)灌胃。观察肿瘤负荷和体积,HE染色法观察小鼠结肠的组织学变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RAS/PI3K/AKT相关通路蛋白的表达。结果模型组体重增加值及cleaved PARP、cleaved caspase-3表达水平均显著低于对照组(均P<0.05),Bcl-2、Bax、pan-RAS、p-MEK、p-ERK、PI3K、p-AKT、NF-κBp65、c-Myc、cyclin D1蛋白表达水平均显著高于对照组(均P<0.05)。胡椒碱组体重增加值及cleaved PARP、cleaved caspase-3表达水平均显著高于模型组(均P<0.05);Bcl-2、Bax、pan-RAS、p-MEK、p-ERK、PI3K、p-AKT、NF-κBp65、c-Myc、cyclin D1蛋白表达水平均显著低于模型组(均P<0.05)。结论胡椒碱对DMH/DSS诱导的实验性结肠癌发生具有抑制作用,其抑制作用可能涉及到RAS/PI3K/AKT信号轴。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 胡椒碱 RAS/PI3K/AKT信号轴 二甲基肼 右旋糖酐硫酸钠
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