目的建立高效液相色谱质谱联用(HPLC-MS/MS)法测定人血浆奈玛特韦和利托那韦的血药浓度,并应用于治疗药物监测。方法血浆样品经蛋白沉淀后测定,流动相为0.1%甲酸水溶液(A相)、乙腈(B相),采用等度洗脱,流速为0.3 m L·min^(-1),柱温...目的建立高效液相色谱质谱联用(HPLC-MS/MS)法测定人血浆奈玛特韦和利托那韦的血药浓度,并应用于治疗药物监测。方法血浆样品经蛋白沉淀后测定,流动相为0.1%甲酸水溶液(A相)、乙腈(B相),采用等度洗脱,流速为0.3 m L·min^(-1),柱温为40℃,使用EC-C18色谱柱,正离子模式下进行多反应监测。结果用于定量分析的离子通道分别为m/z 500→110(奈玛特韦),m/z721.2→296.3(利托那韦),m/z 614.4→421(内标瑞德西韦)。人血浆中奈玛特韦在0.01~10μg·mL^(-1)、利托那韦在0.01~2.0μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,提取回收率分别为79.56%~89.91%、82.03%~89.56%,日间及日内的RSD均小于15%,并且稳定性良好。采用该方法检测了34例新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者口服Paxlovid后的血药浓度,血药浓度范围在1.04~18.0μg·mL^(-1)之间。结论本研究建立的HPLC-MS/MS方法检测快速,灵敏度高,准确性好,能应用于COVID-19患者服用Paxlovid后的血药浓度监测。展开更多
目的探讨舒血宁注射液对大鼠肝纤维化的防治作用及NF-κB/IκBα信号通路影响的研究。方法将SD大鼠随机分为正常对照组(简称对照组)、肝纤维化模型组(简称模型组)、舒血宁注射液给药组(简称给药组),每组12只。每周2次50%CCl4花生油溶液(...目的探讨舒血宁注射液对大鼠肝纤维化的防治作用及NF-κB/IκBα信号通路影响的研究。方法将SD大鼠随机分为正常对照组(简称对照组)、肝纤维化模型组(简称模型组)、舒血宁注射液给药组(简称给药组),每组12只。每周2次50%CCl4花生油溶液(1 m L·kg-1)灌胃6周建立大鼠肝纤维化模型。同时,给药组每日一次腹腔注射舒血宁注射液15 mg·kg-1。观察大鼠的生活状况、肝脏大体形态;HE染色检测大鼠肝脏病理学的变化;全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST);放射免疫法检测血清透明质酸(HA)、IV型胶原(CIV)、层黏蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原肽(PⅢP);Western blot检测肝脏组织细胞核中NF-κB和细胞质中NF-κB、IκBα蛋白的表达。结果舒血宁注射液治疗后大鼠肝功能指标有明显下降,血清肝纤维化指标有显著降低,并且大鼠肝脏病理组织学结构有明显改善(P<0.05)。与模型组相比,舒血宁注射液能够上调肝组织细胞质中NF-κB和IκBα蛋白的表达,下调细胞核中NF-κB蛋白的表达(P<0.05)。结论舒血宁注射液可通过抑制NF-κB/IκBα信号通路发挥抗肝纤维化的作用。展开更多
目的利用二代测序技术筛选出具有显著性变化的基因,并探讨月腺大戟素A在转录组学层面上抗乳腺癌活性的作用机制。方法从月腺大戟药材中提取乙酰间苯三酚类化合物月腺大戟素A,对MCF-7细胞(乳腺癌细胞的luminal A型)进行干扰,观察被干扰...目的利用二代测序技术筛选出具有显著性变化的基因,并探讨月腺大戟素A在转录组学层面上抗乳腺癌活性的作用机制。方法从月腺大戟药材中提取乙酰间苯三酚类化合物月腺大戟素A,对MCF-7细胞(乳腺癌细胞的luminal A型)进行干扰,观察被干扰后的细胞与正常细胞差异基因表达,采用二代高通量测序平台(IlluminaHi-Seq)测序技术分别对对照组和实验组各3个样本进行高通量转录组测序并进行数据分析。结果对照组和实验组分别总获得123656848、123974262个干净序列(clean reads),分别对比到参考基因组上的序列为119762214、119881622,各占总数的96.85%、96.69%;2组转录组对照可得:差异基因总数为1695个,其中上调基因770个,下调基因925个,可清楚注释的基因有3874个。应用基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)进行生物功能富集分析,GO分析发现这3874个基因主要涉及生物过程(1270个)、细胞组成(1322个)与分子功能(1282个)3个大类的45个小类,包括细胞的生长发育过程、信号蛋白活性、膜以及基因表达的调控等过程;KEGG分析发现差异表达基因涉及263条信号通路,主要代谢通路为PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路;以及碳水化合物代谢、心肌系统和细胞生殖系统等生物过程。结论利用二代高通量测序平台测序技术一共筛选、鉴定出差异基因1695个,更深入了解了月腺大戟素A与MCF-7细胞基因之间的相互关系,为乳腺癌治疗提供了一些理论基础。展开更多
文摘目的建立高效液相色谱质谱联用(HPLC-MS/MS)法测定人血浆奈玛特韦和利托那韦的血药浓度,并应用于治疗药物监测。方法血浆样品经蛋白沉淀后测定,流动相为0.1%甲酸水溶液(A相)、乙腈(B相),采用等度洗脱,流速为0.3 m L·min^(-1),柱温为40℃,使用EC-C18色谱柱,正离子模式下进行多反应监测。结果用于定量分析的离子通道分别为m/z 500→110(奈玛特韦),m/z721.2→296.3(利托那韦),m/z 614.4→421(内标瑞德西韦)。人血浆中奈玛特韦在0.01~10μg·mL^(-1)、利托那韦在0.01~2.0μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,提取回收率分别为79.56%~89.91%、82.03%~89.56%,日间及日内的RSD均小于15%,并且稳定性良好。采用该方法检测了34例新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者口服Paxlovid后的血药浓度,血药浓度范围在1.04~18.0μg·mL^(-1)之间。结论本研究建立的HPLC-MS/MS方法检测快速,灵敏度高,准确性好,能应用于COVID-19患者服用Paxlovid后的血药浓度监测。
文摘目的探讨舒血宁注射液对大鼠肝纤维化的防治作用及NF-κB/IκBα信号通路影响的研究。方法将SD大鼠随机分为正常对照组(简称对照组)、肝纤维化模型组(简称模型组)、舒血宁注射液给药组(简称给药组),每组12只。每周2次50%CCl4花生油溶液(1 m L·kg-1)灌胃6周建立大鼠肝纤维化模型。同时,给药组每日一次腹腔注射舒血宁注射液15 mg·kg-1。观察大鼠的生活状况、肝脏大体形态;HE染色检测大鼠肝脏病理学的变化;全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST);放射免疫法检测血清透明质酸(HA)、IV型胶原(CIV)、层黏蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原肽(PⅢP);Western blot检测肝脏组织细胞核中NF-κB和细胞质中NF-κB、IκBα蛋白的表达。结果舒血宁注射液治疗后大鼠肝功能指标有明显下降,血清肝纤维化指标有显著降低,并且大鼠肝脏病理组织学结构有明显改善(P<0.05)。与模型组相比,舒血宁注射液能够上调肝组织细胞质中NF-κB和IκBα蛋白的表达,下调细胞核中NF-κB蛋白的表达(P<0.05)。结论舒血宁注射液可通过抑制NF-κB/IκBα信号通路发挥抗肝纤维化的作用。
文摘目的利用二代测序技术筛选出具有显著性变化的基因,并探讨月腺大戟素A在转录组学层面上抗乳腺癌活性的作用机制。方法从月腺大戟药材中提取乙酰间苯三酚类化合物月腺大戟素A,对MCF-7细胞(乳腺癌细胞的luminal A型)进行干扰,观察被干扰后的细胞与正常细胞差异基因表达,采用二代高通量测序平台(IlluminaHi-Seq)测序技术分别对对照组和实验组各3个样本进行高通量转录组测序并进行数据分析。结果对照组和实验组分别总获得123656848、123974262个干净序列(clean reads),分别对比到参考基因组上的序列为119762214、119881622,各占总数的96.85%、96.69%;2组转录组对照可得:差异基因总数为1695个,其中上调基因770个,下调基因925个,可清楚注释的基因有3874个。应用基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)进行生物功能富集分析,GO分析发现这3874个基因主要涉及生物过程(1270个)、细胞组成(1322个)与分子功能(1282个)3个大类的45个小类,包括细胞的生长发育过程、信号蛋白活性、膜以及基因表达的调控等过程;KEGG分析发现差异表达基因涉及263条信号通路,主要代谢通路为PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路;以及碳水化合物代谢、心肌系统和细胞生殖系统等生物过程。结论利用二代高通量测序平台测序技术一共筛选、鉴定出差异基因1695个,更深入了解了月腺大戟素A与MCF-7细胞基因之间的相互关系,为乳腺癌治疗提供了一些理论基础。
