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超声联合微泡增强脂质体介导基因转染RPE细胞的实验研究 被引量:1
1
作者 伍瑛 杜联芳 +3 位作者 顾青 王惠萍 王丰 李凡 《中华超声影像学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第5期448-451,共4页
目的比较声诺维联合超声与脂质体法介导基因转染RPE细胞的转染率和安全性,探讨超声联合微泡增强脂质体转染率的可行性。方法RPE细胞培养在24孔板,质粒用量2μg/YL,分为对照组、超声辐照组、超声联合微泡组(包括2W/cm^2和3W/cm^2... 目的比较声诺维联合超声与脂质体法介导基因转染RPE细胞的转染率和安全性,探讨超声联合微泡增强脂质体转染率的可行性。方法RPE细胞培养在24孔板,质粒用量2μg/YL,分为对照组、超声辐照组、超声联合微泡组(包括2W/cm^2和3W/cm^2两个亚组)、脂质体组、脂质体+超声+微泡组5组,每组10孔细胞。荧光显微镜观察基因转染情况,流式细胞仪检测基因转染率,Annexin V-FITC和PI双染流式细胞法检测凋亡率。结果单纯超声辐照组基因转染率为(1.06±0.13)%,超声联合微泡组分别为(15.81±1.70)%和(20.86±2.63)%,脂质体组为(30.06±3.49)%,明显高于超声联合微泡组(P〈0.05)。脂质体+超声+微泡组为(44.51±1.28)%,明显高于脂质体组(P〈0.05)。结论脂质体介导EGFP转染RPE细胞的效率高于超声联合微泡的转染率。超声联合微泡能明显提高脂质体的转染率。 展开更多
关键词 超声检查 微气泡 脂质体 转染 色素上皮
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体外培养的人视网膜母细胞瘤细胞株及其肿瘤血管生成相关因子表达的实验研究 被引量:17
2
作者 吴继红 徐萍 +3 位作者 易苗英 王丰 王晓莉 黄倩 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期419-422,共4页
目的 探讨调控视网膜母细胞瘤(RB)新生血管的相关因素。方法 HXO -Rb- 44细胞株接种到裸鼠后腿皮下,采用免疫组织化学染色方法对RB肿瘤内促血管生成因子(VEGF -A、VEGF- C、VEGF -D)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),血管内皮细胞膜酪... 目的 探讨调控视网膜母细胞瘤(RB)新生血管的相关因素。方法 HXO -Rb- 44细胞株接种到裸鼠后腿皮下,采用免疫组织化学染色方法对RB肿瘤内促血管生成因子(VEGF -A、VEGF- C、VEGF -D)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),血管内皮细胞膜酪氨酸激酶受体(Flt- 1、Flk- 1、Flt- 4、Tie2及FGFR),转录调控因子Hif 1及促进或抑制细胞外基质降解的基质金属蛋白酶MMP- 2、MMP -7、MMP -9和基质金属蛋白酶抑制因子TIMP- 1、TIMP -2的阳性染色细胞种类、数量、分布及强度进行检测分析。结果 RB肿瘤内有较丰富的毛细血管和小血管,部分肿瘤细胞Hif 1染色阳性,大多数肿瘤细胞高水平表达VEGF,特别是VEGF- D,肿瘤内血管内皮细胞表达Flt -1、Flt- 4和FGFR。肿瘤细胞高水平表达多种基质金属蛋白酶,但不表达基质金属蛋白酶组织抑制因子。结论 VEGF信号传导通路及MMP表达上调、TIMP表达下调在RB肿瘤新生血管形成过程中起重要作用,可考虑作为治疗RB的靶点。 展开更多
关键词 肿瘤血管生成 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 基质金属蛋白酶组织抑制因子 实验研究 相关因子 瘤细胞株 体外培养 基质金属蛋白酶抑制因子 免疫组织化学染色方法 视网膜母细胞瘤 促血管生成因子 酪氨酸激酶受体 血管内皮细胞膜
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腺病毒载体研究进展与展望 被引量:7
3
作者 韦芳 黄倩 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期506-509,共4页
基因治疗自1990年第一个基因治疗方案在美国被批准进入临床试验以来,一直在稳步发展.据不完全统计,目前在全世界范围内已有918个基因治疗方案进入临床试验,特别是在疑难疾病的治疗方面显示出巨大的应用潜力.
关键词 肿瘤 腺病毒 遗传载体 基因疗法
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影响帕金森病患者生活质量的相关因素和分析 被引量:10
4
作者 陈志青 赵新峰 +3 位作者 陆新茹 倪夏珺 丁正同 邬剑军 《中国临床神经科学》 2008年第4期387-393,共7页
目的:研究影响帕金森病(PD)患者生活质量的相关因素。方法:对92例门诊PD患者,采用PDQ-39、UPDRSⅠ~Ⅳ、H&Y、SE、MMSE、HAMD(17项)和HAMA(14项)分别进行评定,并进行统计学分析。结果:PDQ39(PDQ运动能力、PDQ日常生活、PDQ情绪健康... 目的:研究影响帕金森病(PD)患者生活质量的相关因素。方法:对92例门诊PD患者,采用PDQ-39、UPDRSⅠ~Ⅳ、H&Y、SE、MMSE、HAMD(17项)和HAMA(14项)分别进行评定,并进行统计学分析。结果:PDQ39(PDQ运动能力、PDQ日常生活、PDQ情绪健康、PDQ耻辱感及PDQ社会支持)、UPDRS(Ⅱ和Ⅲ)、医药费用支出、抑郁和焦虑情绪、认知水平以及左旋多巴每日剂量等均是影响生活质量的主要因素。同时女性比男性更易有耻辱感;<55岁和>65岁的患者的生活质量更差。结论:运用药物改善PD患者的运动障碍是提高生活质量的重要前提,但同时还要关注患者的情绪、社会功能等情况,尤其对女性、年龄>55岁和<65岁的患者。 展开更多
关键词 帕金森病 生活质量 抑郁
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四种中间丝蛋白在大鼠视网膜发育过程中表达的时间顺序和结构特征 被引量:5
5
作者 吴继红 易苗英 黄倩 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期765-769,共5页
目的 研究视网膜内神经干细胞的标志物及其表达的时间和空间分布特征。方法 利用免疫组化染色 ,检测四种中间丝蛋白 (Nestin、Vimentin、GFAP及NF)在新生至 12月龄大鼠视网膜内表达的时间顺序、空间分布和强度变化。结果 大鼠视网膜... 目的 研究视网膜内神经干细胞的标志物及其表达的时间和空间分布特征。方法 利用免疫组化染色 ,检测四种中间丝蛋白 (Nestin、Vimentin、GFAP及NF)在新生至 12月龄大鼠视网膜内表达的时间顺序、空间分布和强度变化。结果 大鼠视网膜结构的分化要到出生后 2周才能完成。在 2周内Nestin的表达可见于视网膜的神经细胞、胶质细胞、血管内皮细胞内。 2周后表达水平明显降低。 4周时完全转阴。但在睫状体的少数突起内 ,Nestin持续高水平表达 ,成年时 ,阳性细胞以色素上皮细胞为主。此外 ,在成年大鼠的视神经内也可见散在的Nestin阳性细胞。Vimentin在神经胶质细胞和睫状体的无色素上皮细胞中一直呈强阳性。除了文献报道的水平细胞外 ,我们还发现Vimentin在 4周内的M櫣ller细胞和无长突细胞内表达?牵疲粒泻停危平鲈诜⒂墒斓纳窬褐氏赴蜕窬谙赴闹嵬荒诒泶铩=崧邸estin可作为视网膜神经干细胞的标志 ,成年时视网膜的神经干细胞分布在少数睫状突及视神经内。 (中华眼科杂志 ,2 0 0 4 ,4 0 :76 5 76 9) 展开更多
关键词 视网膜 表达 大鼠 神经干细胞 睫状体 NF 色素上皮细胞 高水平 时间顺序 成年
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STAT3短发卡RNA表达载体对胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响 被引量:10
6
作者 裘正军 黄陈 +5 位作者 裘玮 曹俊 黄克俭 张放 朱麟 江弢 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2007年第2期126-129,共4页
目的探讨信号转导与转录激活因子-3(signal transduction and activators of transcription,STAT3)短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体对STAT3表达及胰腺癌细胞SW1990增殖和凋亡的影响。方法针对人STAT3的基因序列设计... 目的探讨信号转导与转录激活因子-3(signal transduction and activators of transcription,STAT3)短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体对STAT3表达及胰腺癌细胞SW1990增殖和凋亡的影响。方法针对人STAT3的基因序列设计合成三对含有小发夹结构的寡核苷酸序列,将其连入pRNAT—U6.1/Neo质粒中,构建STAT3 shRNA表达载体,并转染SW1990细胞,RT—PCR和Western blot观察SW1990细胞STAT3 mRNA和蛋白表达的改变,噻唑蓝(MTF)检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果三种STAT3 shRNA表达载体转染SW1990细胞后,STAT3 mRNA和蛋白的表达水平与未转染组相比均明显下降(P〈0.05),细胞增殖活性与未转染组相比显著降低(P〈0.05),而细胞凋亡率较未转染组显著升高(P〈0.05)。结论STAT3 shRNA表达载体能有效抑制STAT3的表达,且显著抑制人胰腺癌细胞增殖并促进凋亡;RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默STAT3的治疗策略可能为胰腺癌治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 RNA干扰 胰腺肿瘤 STAT3 增殖 凋亡
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胃癌中PTEN和p-AKT蛋白的表达及其临床意义与预后分析 被引量:7
7
作者 薛鹏 周翡 +2 位作者 李宁 李敏 王理伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期281-285,共5页
目的:探讨PTEN(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosometen)和磷酸化AKT(phosphorylated-AKT,p-AKT)蛋白在胃癌中的表达及其临床意义,评价其在胃癌预后方面的作用。方法:收集229例随访超过5年的胃癌患者肿瘤组织标本,... 目的:探讨PTEN(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosometen)和磷酸化AKT(phosphorylated-AKT,p-AKT)蛋白在胃癌中的表达及其临床意义,评价其在胃癌预后方面的作用。方法:收集229例随访超过5年的胃癌患者肿瘤组织标本,制作成组织芯片,应用免疫组织化学的方法检测PTEN和p-AKT蛋白的表达,并将检测结果与患者的临床病理特征和生存期进行统计分析。结果:胃癌组织中PTEN和p-AKT蛋白的阳性表达率分别为45.9%和55.9%,均高于相应癌旁组织(P<0.05)。PTEN和p-AKT蛋白表达与肿瘤TNM分期、浸润深度和脉管浸润有关(P<0.05);PTEN蛋白在肠型胃癌组织中的阳性表达率较弥漫型胃癌组织中高,差异有统计学意义(P<0.05);p-AKT蛋白表达与Lauren分型无关,但与淋巴结转移有关(P<0.01)。PTEN蛋白阳性表达和阴性表达患者的生存率无明显差异(P>0.05),p-AKT蛋白阳性表达患者的生存率低于阴性表达者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PTEN和p-AKT蛋白表达与胃癌的发生、发展、侵袭和转移有关。p-AKT蛋白表达是胃癌的预后因素。 展开更多
关键词 胃肿瘤 微阵列分析 基因表达 免疫组织化学
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神经营养因子和生长因子等对培养的成人视网膜神经细胞的影响 被引量:5
8
作者 刘文文 徐萍 黄倩 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期545-549,共5页
目的 探讨成人视网膜神经细胞体外培养条件 ,脑源性神经营养因子 (BDNF)、神经营养素 (NT 4 )、表皮生长因子 (EGF)、成纤维细胞生长因子 (FGF)、诱导分化因子全反式视黄酸 (RA)等对成人视网膜神经细胞生长、增殖、凋亡的影响及调控机... 目的 探讨成人视网膜神经细胞体外培养条件 ,脑源性神经营养因子 (BDNF)、神经营养素 (NT 4 )、表皮生长因子 (EGF)、成纤维细胞生长因子 (FGF)、诱导分化因子全反式视黄酸 (RA)等对成人视网膜神经细胞生长、增殖、凋亡的影响及调控机制。方法 胰蛋白酶消化结合机械吹打分离成人视网膜神经细胞 ,在培养基中加入或不加入BDNF、NT 4、EGF、FGF、RA。根据细胞形态、生长方式及免疫细胞化学特征确定细胞类型。比较各组中神经元的数目、转录调控因子c fos、c jun及细胞凋亡调控因子Bcl 2、Bax表达水平。结果 与对照组相比 ,BDNF、FGF处理组存活的神经元特异性烯醇酶、Thy1.1抗体和Bcl 2、c fos及c jun表达阳性细胞数也增多 (均P <0 0 1) ,培养的视网膜神经细胞在体外存活时间可长达 8个月 ;RA处理组c fos、c jun阳性细胞数较对照组增多 (均P <0 0 1) ;而NT 4、EGF处理组各项指标与对照组比较 ,差异无显著意义 (均P >0 0 5 )。结论 BDNF、FGF、RA能显著提高体外培养的成人视网膜神经细胞的存活 ,其机制可能涉及上调转录调控因子c fos、c jun及凋亡抑制因子Bcl 2的表达 ,或下调凋亡促进因子Bax的表达。但EGF、NT 4对体外培养的视网膜神经细胞存活状态无明显改善作用。 展开更多
关键词 成人视网膜神经细胞 脑源性神经营养因子 神经营养素 表皮生长因子 成纤维细胞生长因子 体外培养
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变性高效液相色谱技术在视网膜母细胞瘤基因诊断中的应用 被引量:6
9
作者 徐萍 黄倩 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期564-566,共3页
视网膜母细胞瘤(RB)的发生与13q14的Rb1基因失活有关,其中约90%的Rb1基因失活是由于Rb1基因的缺失、点突变或甲基化所致。新近的变性高效液相色谱技术(DHPLC)可简便、快速、准确检测基因的点突变、甲基化状态及其含量。目前DHPLC... 视网膜母细胞瘤(RB)的发生与13q14的Rb1基因失活有关,其中约90%的Rb1基因失活是由于Rb1基因的缺失、点突变或甲基化所致。新近的变性高效液相色谱技术(DHPLC)可简便、快速、准确检测基因的点突变、甲基化状态及其含量。目前DHPLC已经在RB患者及其家庭成员的基因诊断和遗传咨询中起重要作用。(中华眼科杂志,2007,43:564-566) 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 基因 视网膜母细胞瘤 色谱法 高压液相
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1型及2型腺相关病毒对视网膜细胞转导效率的比较研究 被引量:4
10
作者 吴继红 张圣海 +4 位作者 刘焰 陈霞芳 徐萍 吴小兵 黄倩 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第40期2841-2846,共6页
目的探讨不同血清型的重组腺相关病毒(rAAV)对视网膜细胞的转导效率、基因表达水平以及感染细胞类型的差异,为眼底病基因治疗选择适当的载体提供实验依据。方法采用携带绿色荧光蛋白报告基因的血清型1型(rAAV2/1-EGFP)和2型(rAAV2-EGFP)... 目的探讨不同血清型的重组腺相关病毒(rAAV)对视网膜细胞的转导效率、基因表达水平以及感染细胞类型的差异,为眼底病基因治疗选择适当的载体提供实验依据。方法采用携带绿色荧光蛋白报告基因的血清型1型(rAAV2/1-EGFP)和2型(rAAV2-EGFP)rAAV感染体外培养的RPE细胞株、原代培养的SD大鼠视网膜神经细胞和原代培养的成人RPE细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察和检测EGFP荧光出现的时间、阳性率及荧光强度。分别将二种不同血清型的rAAV注射到SD大鼠视网膜下间隙,通过荧光体视镜观察眼底出现EGFP荧光的时间、范围、强度和分布特点等。最后通过眼组织切片和免疫组织化学染色观察被AAV感染的视网膜细胞的类型,以及是否有炎症反应和免疫反应。结果流式细胞仪检测rAAV2-EGFP转导体外培养的RPE细胞株后第7、14天时EGFP阳性率分别为13.5%±1.7%和15.6%±0.8%,平均亮度为2.75±0.12和3.80±0.72;rAAV2/1-EGFP转导RPE细胞株后第7和14天时EGFP阳性率分别为1.1%±0.5%和2.0%±0.4%,平均亮度为1.12±0.09和1.75±0.20。rAAV2-EGFP感染活体视网膜后7、14、28、75d和4个月时,视网膜内EGFP荧光面积分别为(5389±211)μm2、(9832±364)μm2、(14454±446)μm2、(20528±648)μm2和(20264±683)μm2;rAAV2/1-EGFP感染活体视网膜后在相同时间点测得EGFP荧光面积分别为(9666±348)μm2、(12160±439)μm2、(19794±621)μm2、(26172±923)μm2、(26022±965)μm2。每相同时间点的两组数据间差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论2型rAAV能有效转导体外培养的视网膜细胞和活体视网膜细胞;但在活体视网膜内1型rAAV是一种比2型AAV更为有效的基因传递载体。 展开更多
关键词 腺病毒科 视网膜 转导效率
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小干扰RNA抑制雄激素受体基因表达对人膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响 被引量:5
11
作者 吴吉涛 韩邦旻 +5 位作者 赵福军 王慧萍 李惠明 卓见 韦芳 夏术阶 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期502-504,共3页
目的 观察小干扰RNA技术(siRNA)抑制雄激素受体(AR)基因的表达对人膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响。方法化学合成针对AR的siRNA,用脂质体转染T24细胞。采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和Westernblot检测ARmRNA和... 目的 观察小干扰RNA技术(siRNA)抑制雄激素受体(AR)基因的表达对人膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响。方法化学合成针对AR的siRNA,用脂质体转染T24细胞。采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和Westernblot检测ARmRNA和蛋白的变化。转染细胞48h后用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞体外增殖活性的变化,流式细胞术检测细胞的凋亡状况。结果成功的转染T24细胞,实时荧光定量RT—PCR筛选出一条ARmRNA抑制效率最高的siRNA,行Westernblot检测可抑制AR蛋白表达至70.3%。转染细胞48h后,T24细胞增殖活性抑制率达到(25.9±5.4)%,细胞凋亡率达到21.61%。结论应用siRNA干扰技术能有效的抑制AR基因的表达,同时可抑制人膀胱癌T24细胞的体外增殖活性及促进其凋亡的发生。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 雄激素受体 RNA干扰 脱噬作用
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超声辐照人血白蛋白微球与腺相关病毒感染人视网膜色素上皮细胞 被引量:4
12
作者 李红丽 杜联芳 +2 位作者 王慧萍 顾青 陈霞芳 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2010年第5期793-795,共3页
目的探讨超声辐照全氟丙烷人血白蛋白微球促进携带增强型绿色荧光蛋白的2型重组腺相关病毒(rAAV2-EGFP)感染人视网膜色素上皮(RPE)细胞的价值。方法HRPE细胞隔孔接种于24孔板中(2×105/孔),加入微球与rAAV2-EGFP的混合液,在不同条... 目的探讨超声辐照全氟丙烷人血白蛋白微球促进携带增强型绿色荧光蛋白的2型重组腺相关病毒(rAAV2-EGFP)感染人视网膜色素上皮(RPE)细胞的价值。方法HRPE细胞隔孔接种于24孔板中(2×105/孔),加入微球与rAAV2-EGFP的混合液,在不同条件下进行超声辐照。48h后,应用流式细胞仪测定阳性细胞比例,并且评估不同辐照条件对细胞增殖有无影响。结果在声强1.0W/cm2,辐照持续时间60s,微泡细胞比值60∶1的条件下,全氟丙烷人血白蛋白微球组EGFP阳性细胞比例较对照组显著提高(P<0.001),MTS染色细胞生存率大于90%。结论超声辐照全氟丙烷人血白蛋白微球能够安全地提高rAAV2-EGFP对人RPE细胞的感染效率。 展开更多
关键词 超声 微泡 依赖病毒 视网膜色素上皮细胞
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表达睫状神经营养因子的人胚肺成纤维细胞视网膜下间隙移植延缓RCS大鼠光感受器变性 被引量:3
13
作者 黄倩 徐萍 +3 位作者 夏欣 胡宏惠 王丰 李惠明 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期127-130,共4页
目的以遗传性视网膜变性RCS大鼠为模型,探讨视网膜下间隙移植表达睫状神经营养因子(CNTF)的人胚肺(HFL)成纤维细胞治疗视网膜变性的可行性。方法通过脂质体将编码CNTF的表达质粒转入HFL成纤维细胞、MTX及ELISA筛选高水平表达CNTF的细胞... 目的以遗传性视网膜变性RCS大鼠为模型,探讨视网膜下间隙移植表达睫状神经营养因子(CNTF)的人胚肺(HFL)成纤维细胞治疗视网膜变性的可行性。方法通过脂质体将编码CNTF的表达质粒转入HFL成纤维细胞、MTX及ELISA筛选高水平表达CNTF的细胞克隆。手术显微镜直视下经角膜缘后1mm注射5μl含1×105个高水平表达CNTF的HFL成纤维细胞至4~5周龄RCS大鼠右眼视网膜下间隙,左眼不手术或注射PBS作为对照。分别于移植术后2、4、6、8、10、12及15周随机取1只鼠摘除眼球作光镜观察,随机取2只鼠摘除眼球作电镜观察。结果稳定转染CNTF的HFL成纤维细胞能高水平表达CNTF(91046.15pg/ml),7只经光镜观察的移植眼中的4只,其视网膜外颗粒层明显较对照眼厚,保存的光感受器数量明显较对照眼多(P≤0.002)。14只经电镜观察的移植眼中的10只,视网膜外颗粒层光感受器凋亡明显较对照眼少。在光感受器与视网膜色素上皮间堆积的盘膜碎片亦较少。宿主视网膜色素上皮细胞的形态保存较好,并可见吞噬小体。 展开更多
关键词 视网膜变性 细胞移植 光感受器 睫状神经营养因子 大鼠
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针灸治疗支气管哮喘的实验研究进展 被引量:4
14
作者 周俊梅 韦芳 +3 位作者 刘苗苗 徐斯伟 杨洋 张必萌 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期F0003-F0004,共2页
哮喘已经成为世界范围内的常见病、多发病。支气管哮喘是以嗜酸性粒细胞、肥大细胞和淋巴细胞等多种炎性细胞参与的慢性气道炎症,属于中医学哮病范畴。针灸治疗哮喘历史悠久、疗效肯定,其机理研究可为临床提供理论依据,现将近几年来的... 哮喘已经成为世界范围内的常见病、多发病。支气管哮喘是以嗜酸性粒细胞、肥大细胞和淋巴细胞等多种炎性细胞参与的慢性气道炎症,属于中医学哮病范畴。针灸治疗哮喘历史悠久、疗效肯定,其机理研究可为临床提供理论依据,现将近几年来的实验研究进展进行综述。 展开更多
关键词 哮喘 针灸 实验研究 综述
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血管及淋巴管生成相关基因表达与肿瘤转移率和转移途径的比较分析 被引量:4
15
作者 王丰 韦芳 +4 位作者 陈霞芳 田毓华 易苗英 谢匡成 黄倩 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期635-639,共5页
目的:研究促进血管及淋巴管生成因子——血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)-A、-C、-D表达水平与肿瘤转移率及转移途径的关系,探讨其在肿瘤转移方面所起的作用,以及是否可作为判断肿瘤转移和预后的指标... 目的:研究促进血管及淋巴管生成因子——血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)-A、-C、-D表达水平与肿瘤转移率及转移途径的关系,探讨其在肿瘤转移方面所起的作用,以及是否可作为判断肿瘤转移和预后的指标。方法:建立2种小鼠和4种人的肿瘤动物模型,观察肺、肝及腹股沟、腋下、髂血管和腹主动脉旁淋巴结大小及肿瘤转移情况。实时荧光定量.PCR(real—time fluorogentic quantitative PCR,RFQ—PCR)检测体外培养的肿瘤细胞及小鼠体内生长的肿瘤组织内VEGF—A、-C、-D及血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)-2、-3和淋巴管内皮细胞标志物——淋巴内皮细胞透明质酸受体-1(lymphatic vessel endothelial HA receptor—1,LYVE—1)的表达水平。结果:2种小鼠和4种人的肿瘤动物模型中61%~100%出现了肺转移,16%~100%出现了肝转移,2种小鼠肿瘤动物模型中26%~100%出现了淋巴结转移。结果表明,VEGF—A在肿瘤组织中表达量的增加将伴随着更高的肝、肺转移率。肿瘤组织中VEGF—C的表达水平与肿瘤的淋巴转移存在相关性,但VEGF—D表达水平增加与肿瘤淋巴结转移的发生率并不平行。结论:VEGF—A表达水平与肿瘤血道转移关系密切,VEGF—C在肿瘤淋巴结转移中起重要作用。 展开更多
关键词 肿瘤转移 血管生成 病理性 淋巴管生成 基因表达
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视网膜母细胞瘤基因治疗的研究进展 被引量:5
16
作者 季迅达 黄倩 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期378-380,共3页
近年来视网膜母细胞瘤(RB)的综合治疗越来越受到重视。肿瘤基因治疗虽然在治疗基因的靶向性、可控性及高效表达等诸多方面还有待深入研究,却已显示了其良好的应用前景。随着上述方面的完善,基因治疗将会作为RB治疗的组成部分,发挥重... 近年来视网膜母细胞瘤(RB)的综合治疗越来越受到重视。肿瘤基因治疗虽然在治疗基因的靶向性、可控性及高效表达等诸多方面还有待深入研究,却已显示了其良好的应用前景。随着上述方面的完善,基因治疗将会作为RB治疗的组成部分,发挥重要作用。现就RB基因治疗的研究现状、存在的问题和发展方向作一综述。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤/治疗 基因 视网膜母细胞瘤 基因表达调控 肿瘤 基因 肿瘤抑制 综述文献
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脂肪酸合成酶及其mRNA在肺癌中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 阮征 花天放 +2 位作者 彭寿行 薛月华 胡宏慧 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期557-561,共5页
目的:本研究同期观察脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)及其 mRNA在肺癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学EnVisionTM法和逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)对67例肺癌组织进行FAS及其 mRNA的检测和分析,并与癌旁组织,正... 目的:本研究同期观察脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)及其 mRNA在肺癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学EnVisionTM法和逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)对67例肺癌组织进行FAS及其 mRNA的检测和分析,并与癌旁组织,正常肺组织进行对照研究。结果:FAS蛋白表达在肺癌组织中阳性率为41.8%(28/67),显著高于癌旁组织19.5%(8/41)和正常肺组织6.25%(2/32)(P<0.01)。FAS mRNA在肺癌组织中表达阳性率为67.2%(45/67),显著高于癌旁组织34.1%(14/41)和正常肺组织25.0%(8/32)(P<0.01)。半定量法测定发现FAS mRNA在阳性表达的肺癌组织中为0.975±0.326,显著高于癌旁组织0.475±0.167和正常组织0.261±0.050(P<0.01)。FAS蛋白和 mRNA的表达与患者性别,年龄,肿瘤部位,病理类型,分化程度无关(P>0.05);与肿瘤分期,淋巴结转移(P<0.01)有相关性。结论:FAS蛋白和 mRNA在肺癌组织中表达增强,提示在肿瘤的形成与演变的过程中可能存在着同步的脂肪酸代谢改变;FAS可能作为肺癌诊断的指标,同时也可为肺癌的治疗提供新的靶位。 展开更多
关键词 肺肿瘤 脂肪酸合成酶复合物 免疫组织化学法 逆转录聚合酶链反应 诊断
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肿瘤细胞表面柯萨奇病毒-腺病毒受体与5型腺病毒感染效率的关系 被引量:2
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作者 任鹏康 韦芳 +5 位作者 李惠明 王丰 张巨峰 陈霞芳 李宗海 黄倩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第3期209-213,共5页
目的:探讨不同肿瘤细胞系柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)和整合素的表达水平与5型腺病毒感染效率的关系,为腺病毒基因治疗研究奠定基础。方法:利用瞬时转染CAR的真核表达质粒提高肿瘤细胞表面CAR的表达,应用抗体封闭细胞表面的CAR和整合素... 目的:探讨不同肿瘤细胞系柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)和整合素的表达水平与5型腺病毒感染效率的关系,为腺病毒基因治疗研究奠定基础。方法:利用瞬时转染CAR的真核表达质粒提高肿瘤细胞表面CAR的表达,应用抗体封闭细胞表面的CAR和整合素后,通过流式细胞仪和荧光素酶分析法测定腺病毒Ad5-CMV-EGFP和Ad5-CMV-Luc对肿瘤细胞的感染效率和基因表达水平的变化。结果:不同肿瘤细胞表面CAR和整合素的表达水平是不同的,其中SMMC-7721和A549细胞CAR的表达量最高,而K562细胞CAR的表达水平最低;荧光显微镜和流式细胞仪检测Ad5-CMV-EGFP对肿瘤细胞的感染效率,结果显示5型腺病毒对于SMMC-7721和A549细胞的感染效率最高,而对于K562细胞则很低;瞬时转染表达CAR的真核质粒可提高多种肿瘤细胞表面CAR的表达,较大幅度提高了5型腺病毒的感染效率。而抗体封闭肿瘤细胞表面的CAR或整合素后,腺病毒感染效率显著下降。结论:肿瘤细胞表面CAR和整合素的表达水平决定了腺病毒对肿瘤细胞的感染效率。 展开更多
关键词 腺病毒 柯萨奇病毒-腺病毒受体 整合素 感染 基因治疗
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脉冲等离子体涂层神经导管修复周围神经缺损实验研究 被引量:3
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作者 沈尊理 张菁 +8 位作者 沈华 陈皓 张佩华 王文祖 陈南梁 黄一雄 张兆锋 贾万新 黄倩 《组织工程与重建外科杂志》 2005年第2期94-97,共4页
目的:探讨经脉冲等离子体涂层并固定睫状神经营养因子(CNTF)的聚羟基乙酸和聚乳酸共聚物(PGLA)神经导管修复周围神经缺损的效果。方法:应用脉冲等离子方法对PGLA膜片或神经导管表面进行处理,然后固定CNTF。该膜片表面种植人胚胎视神经细... 目的:探讨经脉冲等离子体涂层并固定睫状神经营养因子(CNTF)的聚羟基乙酸和聚乳酸共聚物(PGLA)神经导管修复周围神经缺损的效果。方法:应用脉冲等离子方法对PGLA膜片或神经导管表面进行处理,然后固定CNTF。该膜片表面种植人胚胎视神经细胞,经处理的神经导管修复SD大鼠坐骨神经1.5cm缺损。观察人胚胎视神经细胞在经处理的膜片上生长情况,并用电生理和轴突计数法评价经处理的神经导管内神经再生质量。设立未固定CNTF的PGLA膜片组和未经过脉冲等离子体涂层的神经导管组作为对照组比较。结果:在经处理的PGLA膜片上,人胚胎视神经细胞生长较对照组密集,且发现有轴突延伸相接现象。经处理的PGLA修复大鼠坐骨神经缺损,在1个月和3个月时,均发现神经导管内神经传导速度和再生神经轴突均明显大于对照组(P<0.05)。结论:经脉冲等离子体涂层并固定睫状神经营养因子(CNTF)的PGLA神经导管可能通过CNTF的接触诱导和持续缓释作用,促进周围神经再生。 展开更多
关键词 周围神经 神经再生 等离子体 睫状神经营养因子
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视网膜下间隙移植经基因修饰的视网膜色素上皮细胞对大鼠光感受器变性及视功能的保护作用 被引量:3
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作者 黄倩 吴继红 +4 位作者 王丰 徐萍 夏欣 易静 赵新峰 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期552-556,共5页
目的 以RCS大鼠作模型,研究经基因修饰的永生化视网膜色素上皮细胞(RPE)视网膜下移植对光感受器变性的保护作用。方法 在绿色荧光蛋白基因逆转录病毒感染的基础上,利用脂质体介导节状神经生长因子(CNTF)表达质粒转移,修饰成人RPE细胞系C... 目的 以RCS大鼠作模型,研究经基因修饰的永生化视网膜色素上皮细胞(RPE)视网膜下移植对光感受器变性的保护作用。方法 在绿色荧光蛋白基因逆转录病毒感染的基础上,利用脂质体介导节状神经生长因子(CNTF)表达质粒转移,修饰成人RPE细胞系CRL-2302。将1×105个表达绿色荧光蛋白(GFP)或GFP及CNTF的RPE细胞移植到4~5周龄RCS大鼠右眼视网膜下间隙,左眼不移植或注射。PBS作为对照。术后2、4、6、8、10和12周作荧光显微镜、光镜、电镜及电生理检查。结果 荧光显微镜观察,术后1周移植的人RPE细胞在RCS大鼠视网膜下间隙已扩散到几乎整个眼底,但随时间延长移植的细胞逐渐减少,术后6周仅残留少量移植细胞。光镜及电镜观察显示移植眼保留的光感受器数量明显较对照眼多,凋亡细胞则较对照跟少。此外,移植眼宿主RPE细胞形态较正常,并可见吞噬小体。视网膜电图(ERG)检查结果表明部分移植眼视网膜功能明显较对照眼好。结论 经过基因修饰的RPE细胞移植可延缓RCS大鼠视网膜光感受器变性,为治疗视网膜变性提供了新的途径。(中华眼科杂志,2004,40:552-556) 展开更多
关键词 视网膜下间隙移植 基因修饰 视网膜色素上皮细胞 大鼠 光感受器变性 视功能保护
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