目的研究在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠肺组织中自噬相关蛋白的变化。方法单纯烟熏法构建慢阻肺大鼠动物模型,采用Real time PCR,Western blot技术检测检测大鼠肺组织中PI3K、AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR及自噬相关基因LC3Ⅱ/Ⅰ、...目的研究在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠肺组织中自噬相关蛋白的变化。方法单纯烟熏法构建慢阻肺大鼠动物模型,采用Real time PCR,Western blot技术检测检测大鼠肺组织中PI3K、AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR及自噬相关基因LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5、Beclin1、P62、Atg7、Atg12的mRNA及蛋白表达,探讨在慢阻肺大鼠肺组织中自噬水平及自噬相关蛋白的变化。用LC3B免疫组化比较COPD组与正常大鼠间自噬水平的变化。结果 Real time PCR分析结果显示,与正常组相比,慢阻肺组大鼠肺组织中自噬相关基因Beclin1、Atg5、Atg12的mRNA表达显著增高(P<0.05,其中Beclin1、Atg5两组比较P<0.01)。Atg7的mRNA表达在慢阻肺组与正常组之间差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot分析结果显示,慢阻肺组大鼠肺组织中PI3K蛋白、p-AKT/AKT及p-m TOR/m TOR蛋白表达显著降低(P<0.05)。自噬相关基因LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5、Beclin1蛋白表达增高(P<0.05,其中LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5两组比较P<0.01)。P62蛋白表达显著下降(P<0.01)。LC3B免疫组化显示,慢阻肺组LC3B表达高于正常组。结论烟熏12周的慢阻肺大鼠与正常组相比,自噬通路上游蛋白PI3K、p-AKT/AKT、p-m TOR/m TOR的表达降低,自噬蛋白表达增加,自噬水平增加。展开更多
目的研究PI3K/AKT/mTOR信号通路在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法采用单纯熏香烟法复制慢阻肺大鼠动物模型。采用Western blot技术检测慢阻肺大鼠趾长伸肌中PI3K/AKT/mTOR信号通路中PI3K、总的及磷酸化的mTO...目的研究PI3K/AKT/mTOR信号通路在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法采用单纯熏香烟法复制慢阻肺大鼠动物模型。采用Western blot技术检测慢阻肺大鼠趾长伸肌中PI3K/AKT/mTOR信号通路中PI3K、总的及磷酸化的mTOR(t-mTOR,p-mTOR)、总的及磷酸化的GSK-3β(t-GSK-3β,p-GSK-3β)、总的及磷酸化的4E-BP1(t-4E-BP1,p-4E-BP1)、总的及磷酸化的p70S6K1(t-p70S6K1,p-p70S6K1)蛋白表达变化。结果 Western blot分析结果显示,大鼠趾长伸肌组织中PI3K的蛋白表达在两组间差异不显著(P>0.05);t-mTOR、p-mTOR、t-GSK-3β和p-GSK-3β的蛋白表达慢阻肺组显著高于对照组(P<0.05,其中p-GSK-3β两组对照P<0.01);t-4E-BP1和t-p70S6K1的蛋白表达在两组间差异不显著(P>0.05),p-4E-BP1和p-p70S6K1的蛋白表达慢阻肺组显著高于对照组(P<0.05)。结论慢阻肺大鼠趾长伸肌组织内PI3K/AKT/mTOR信号通路被激活,可能是骨骼肌萎缩的代偿机制之一。展开更多
文摘目的研究在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠肺组织中自噬相关蛋白的变化。方法单纯烟熏法构建慢阻肺大鼠动物模型,采用Real time PCR,Western blot技术检测检测大鼠肺组织中PI3K、AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR及自噬相关基因LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5、Beclin1、P62、Atg7、Atg12的mRNA及蛋白表达,探讨在慢阻肺大鼠肺组织中自噬水平及自噬相关蛋白的变化。用LC3B免疫组化比较COPD组与正常大鼠间自噬水平的变化。结果 Real time PCR分析结果显示,与正常组相比,慢阻肺组大鼠肺组织中自噬相关基因Beclin1、Atg5、Atg12的mRNA表达显著增高(P<0.05,其中Beclin1、Atg5两组比较P<0.01)。Atg7的mRNA表达在慢阻肺组与正常组之间差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot分析结果显示,慢阻肺组大鼠肺组织中PI3K蛋白、p-AKT/AKT及p-m TOR/m TOR蛋白表达显著降低(P<0.05)。自噬相关基因LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5、Beclin1蛋白表达增高(P<0.05,其中LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5两组比较P<0.01)。P62蛋白表达显著下降(P<0.01)。LC3B免疫组化显示,慢阻肺组LC3B表达高于正常组。结论烟熏12周的慢阻肺大鼠与正常组相比,自噬通路上游蛋白PI3K、p-AKT/AKT、p-m TOR/m TOR的表达降低,自噬蛋白表达增加,自噬水平增加。
文摘目的研究PI3K/AKT/mTOR信号通路在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法采用单纯熏香烟法复制慢阻肺大鼠动物模型。采用Western blot技术检测慢阻肺大鼠趾长伸肌中PI3K/AKT/mTOR信号通路中PI3K、总的及磷酸化的mTOR(t-mTOR,p-mTOR)、总的及磷酸化的GSK-3β(t-GSK-3β,p-GSK-3β)、总的及磷酸化的4E-BP1(t-4E-BP1,p-4E-BP1)、总的及磷酸化的p70S6K1(t-p70S6K1,p-p70S6K1)蛋白表达变化。结果 Western blot分析结果显示,大鼠趾长伸肌组织中PI3K的蛋白表达在两组间差异不显著(P>0.05);t-mTOR、p-mTOR、t-GSK-3β和p-GSK-3β的蛋白表达慢阻肺组显著高于对照组(P<0.05,其中p-GSK-3β两组对照P<0.01);t-4E-BP1和t-p70S6K1的蛋白表达在两组间差异不显著(P>0.05),p-4E-BP1和p-p70S6K1的蛋白表达慢阻肺组显著高于对照组(P<0.05)。结论慢阻肺大鼠趾长伸肌组织内PI3K/AKT/mTOR信号通路被激活,可能是骨骼肌萎缩的代偿机制之一。
