血清肌红蛋白光激化学发光免疫测定法的建立 被引量：11

1

作者 马宏伟 赵卫国 潘柏申 《检验医学》 CAS 北大核心 2006年第1期55-57,共3页

目的采用光激化学发光免疫测定技术（LICI）建立定量检测肌红蛋白（Mb）的方法。方法使用针对Mb不同表位的2株单克隆抗体，一株包被发光微粒，另一株进行生物素化，与包被有链霉亲合素的感光微粒共同构成检测试剂，优化检测条件并评价... 目的采用光激化学发光免疫测定技术（LICI）建立定量检测肌红蛋白（Mb）的方法。方法使用针对Mb不同表位的2株单克隆抗体，一株包被发光微粒，另一株进行生物素化，与包被有链霉亲合素的感光微粒共同构成检测试剂，优化检测条件并评价检测性能。结果该方法的灵敏度为1．36ng／ml，在33．8～1521．0ng／ml的范围内线性良好。批内和日间变异系数分别为3．05％～4．41％和5．80％～6．56％。在血红蛋白浓度〈2．6g／L，总胆红素浓度〈342μmol／L、三酰甘油浓度〈11．3mmol／L时的干扰率无临床意义。与Roche Elecsys电化学发光法有较好的相关性（r=0．9971）。结论血清MbLICI的建立有助于进一步对检测试剂盒的研制。 展开更多

关键词 肌红蛋白 化学发光 微粒 免疫测定

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POCT的研究进展及应用 被引量：10

2

作者 张明明 郑佐娅 《国际检验医学杂志》 CAS 2006年第11期1021-1022,1025,共3页

该文简要介绍了POCT(point of care testing,POCT)在仪器、信息化、质量管理方面的研究进展及临床应用情况。

关键词 床旁诊断化验信息系统 仪器和设备 质量控制

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血清心肌肌钙蛋白Ⅰ光激化学发光免疫测定法的建立 被引量：7

3

作者 马宏伟 赵卫国 潘柏申 《检验医学》 CAS 北大核心 2007年第4期398-401,共4页

目的采用光激化学发光免疫测定法(LICLIA)建立血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)的定量检测方法。方法使用2株特异性的cTnI单克隆抗体,一株包被发光微粒,另一株进行生物素化,与包被有链霉亲合素的感光微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检... 目的采用光激化学发光免疫测定法(LICLIA)建立血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)的定量检测方法。方法使用2株特异性的cTnI单克隆抗体,一株包被发光微粒,另一株进行生物素化,与包被有链霉亲合素的感光微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检测性能。结果方法的分析灵敏度为0.05 ng/mL,在1.10～29.36 ng/mL范围内线性良好。批内和日间变异系数(CV)分别为4.89%～5.93%和6.76%～8.96%。cTnI浓度为161 ng/mL时方法无Hook效应。与Biocheck cTnI酶联免疫吸附试验(ELISA)具有较好的相关性(r=0.964)。结论血清cTnI的LICLIA定量检测方法的建立有助于急性心肌梗死诊断试剂盒的研制。 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白Ⅰ 化学发光 免疫测定 心肌梗死

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检测肌红蛋白的半定量金免疫层析法的研究 被引量：6

4

作者 郑佐娅 曹丹如 +4 位作者 陈悦 卢仁泉 刘德琮 朱晴晖 陶义训 《检验医学》 CAS 北大核心 2007年第6期645-647,共3页

目的建立一种半定量检测人血清肌红蛋白的金免疫层析方法,用于急性心肌梗死的快速检测。方法一株抗人肌红蛋白单克隆抗体标记胶体金,另一株抗人肌红蛋白单克隆抗体包被膜作为检测线,兔抗鼠IgG抗体包被膜作为对照线,建立半定量金免疫层... 目的建立一种半定量检测人血清肌红蛋白的金免疫层析方法,用于急性心肌梗死的快速检测。方法一株抗人肌红蛋白单克隆抗体标记胶体金,另一株抗人肌红蛋白单克隆抗体包被膜作为检测线,兔抗鼠IgG抗体包被膜作为对照线,建立半定量金免疫层析测定方法。结果本法测定结果分为3个半定量判定区段：〈70、70-150和〉150μg/L;与化学发光免疫测定对照检测83份血清标本,符合性良好。结论金免疫层析测定法具有半定量的特点,方法简便、快速、准确,适用于急性心肌梗死的早期检测。 展开更多

关键词 肌红蛋白 金免疫层析法 半定量测定

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尿微量白蛋白半定量金免疫层析试条的研制和临床评价 被引量：4

5

作者 卢仁泉 宗英 郑佐娅 《检验医学》 CAS 北大核心 2007年第1期54-57,共4页

目的 建立一种半定量检测人尿液中的微量白蛋白（mAlb）的金免疫层析方法。方法 应用一株抗人白蛋白单克隆抗体与胶体金结合，组成胶体金结合物试剂；白蛋白包被在硝酸纤维素膜上，而制成竞争法的试剂条，同时用一定浓度的羊抗鼠IgG抗... 目的 建立一种半定量检测人尿液中的微量白蛋白（mAlb）的金免疫层析方法。方法 应用一株抗人白蛋白单克隆抗体与胶体金结合，组成胶体金结合物试剂；白蛋白包被在硝酸纤维素膜上，而制成竞争法的试剂条，同时用一定浓度的羊抗鼠IgG抗体作为参比线。结果 该法经人白蛋白标准液测定，结果判定可分为〈20、20-50、50-200和〉200mg／L4个半定量区段；137例经散射免疫浊度法定量测定白蛋白浓度的临床尿标本用于该法的对比测定，结果符合性良好。结论 该法具有半定量的特点，结果可靠，适用于糖尿病、高血压等并发肾病的早期诊断。方法简便、快速，特别适合中、小医院和门诊部使用。 展开更多

关键词 微量白蛋白 金免疫层析法 半定量测定

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亲和层析法分离纯化人心肌肌钙蛋白Ⅰ 被引量：3

6

作者 马宏伟 赵卫国 潘柏申 《检验医学》 CAS 北大核心 2007年第3期304-307,共4页

目的从人心肌组织提取纯化心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)。方法采用离子交换层析和疏水层析从兔骨骼肌中提纯肌钙蛋白C(TnC),制备连接有TnC的亲和层析介质,通过亲和层析法从人心肌组织中直接提纯cTnI。纯化的cTnI采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺... 目的从人心肌组织提取纯化心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)。方法采用离子交换层析和疏水层析从兔骨骼肌中提纯肌钙蛋白C(TnC),制备连接有TnC的亲和层析介质,通过亲和层析法从人心肌组织中直接提纯cTnI。纯化的cTnI采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法进行鉴定。结果从10 g人心肌组织中共提纯2.44 mg cTnI,SDS-PAGE图上显示为单一条带,表观相对分子质量约为29000。免疫印迹法结果表明cTnI单克隆抗体能够特异性识别提纯的cTnI,纯化的cTnI SDS-PAGE和免疫印迹法结果均与商品化cTnI结果一致。结论具有免疫活性的天然cTnI的获取有助于急性心肌梗死诊断试剂盒的研制。 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白Ⅰ 亲和层析 纯化

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以合成肽为抗原检测人巨细胞病毒抗体的酶联免疫吸附试验的建立及评价 被引量：4

7

作者 秦逸秋 孙立山 +3 位作者 周文达 刘长河 沈春琳 甄子刚 《检验医学》 CAS 北大核心 2008年第6期604-607,共4页

目的以合成多肽为抗原建立用于人巨细胞病毒(HCMV)抗体检测的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法以固相多肽合成技术合成了HCMV 7个抗原性肽段,并对其抗原性进行了初步评价,选择高抗体反应的肽段为抗原,建立检测HCMV特异性抗体的间接EL... 目的以合成多肽为抗原建立用于人巨细胞病毒(HCMV)抗体检测的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法以固相多肽合成技术合成了HCMV 7个抗原性肽段,并对其抗原性进行了初步评价,选择高抗体反应的肽段为抗原,建立检测HCMV特异性抗体的间接ELISA。结果7个肽段中,抗体反应性较高肽段有4个;以合成多肽为抗原的间接ELISA对HCMV IgG抗体检测的敏感性和特异性分别为90.9%和100.0%,对于IgM抗体检测的敏感性和特异性分为90.0%和100.0%;与国外试剂盒测定结果有良好的符合性;该方法的精密度及稳定性良好。结论合成的HCMV多肽片段可作为抗原用于HCMV的检测,以此多肽为抗原建立的间接ELISA可用于临床HCMV特异性抗体的检测。 展开更多

关键词 人巨细胞病毒 合成肽 酶联免疫吸附试验

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精子肽的固相合成及其在免疫性不孕诊断中的应用研究 被引量：4

8

作者 郭海艳 周文达 《现代检验医学杂志》 CAS 2008年第2期66-68,共3页

目的合成特异性精子肽,并对其抗原性进行初步评价,从而探讨检测抗精子抗体的ELISA试剂盒制备。方法应用固相多肽合成技术,以Fmoc基团保护的氨基酸为原料,合成特异性精子肽。以高效液相色谱(HPLC)技术鉴定纯化,并用ELISA检测其抗原性。... 目的合成特异性精子肽,并对其抗原性进行初步评价,从而探讨检测抗精子抗体的ELISA试剂盒制备。方法应用固相多肽合成技术,以Fmoc基团保护的氨基酸为原料,合成特异性精子肽。以高效液相色谱(HPLC)技术鉴定纯化,并用ELISA检测其抗原性。结果成功合成了所需肽段,HPLC结果显示纯度达95%以上。该合成肽包被的ELISA试剂盒检测抗精子抗体的结果,与商品化试剂盒相比较符合率达90.6%。结论固相多肽合成技术可用于合成高纯度特异性的精子肽,且所合成肽段具有良好的抗原活性,包板建立的ELISA方法可以用于免疫性不孕中抗精子抗体的检测。 展开更多

关键词 固相多肽合成 免疫性不孕 抗精子抗体 酶联免疫吸附试验

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标记免疫测定技术的研究进展 被引量：3

9

作者 卢仁泉 郑佐娅 《检验医学》 CAS 北大核心 2006年第6期699-702,共4页

关键词 标记 免疫测定 进展

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联合检测甲胎蛋白和癌胚抗原的胶体金免疫层析试剂的研制及性能评价 被引量：2

10

作者 卢仁泉 郑佐娅 郭林 《检验医学》 CAS 北大核心 2009年第12期899-903,共5页

目的建立一种新型的联合检测甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CEA)的胶体金免疫层析法(G ICA)。方法G4和C2为一对抗AFP单克隆抗体(M cAb),A1和C9为另一对抗CEA M cAb,G4和A1分别以直线形式平行包被于固相硝酸纤维素(NC)膜上,C2和C9分别与胶体... 目的建立一种新型的联合检测甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CEA)的胶体金免疫层析法(G ICA)。方法G4和C2为一对抗AFP单克隆抗体(M cAb),A1和C9为另一对抗CEA M cAb,G4和A1分别以直线形式平行包被于固相硝酸纤维素(NC)膜上,C2和C9分别与胶体金结合后固定于结合物垫,制备成G ICA试剂条。膜上另包被2 mg/mL兔抗鼠IgG抗体,用于检测有效性。结果利用双抗体夹心原理,建立了可同时检测血清中AFP和CEA的G ICA。本法经AFP和CEA标准液测定,试剂的敏感性为AFP 30μg/L、CEA 10μg/L,与血红蛋白、人白蛋白、人球蛋白等无交叉反应,稳定性试验表明试剂可以在室温保存6个月以上。86份经化学发光免疫分析仪定量测定AFP、CEA浓度的临床血清标本用于本法的对比测定,符合性良好。结论联合检测AFP和CEA的G ICA试剂具有结果可靠、方法简便、快速等优点,与化学发光法测定结果符合性良好。 展开更多

关键词 甲胎蛋白 癌胚抗原 胶体金 免疫层析法

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重组人心肌TnI-TnC复合物的特性及其初步应用 被引量：2

11

作者 刘大彪 张明明 +1 位作者 卢仁泉 郑佐娅 《放射免疫学杂志》 CAS 2008年第1期83-86,共4页

目的:从含有人cTnI-TnC基因的表达菌中抽取目的蛋白,并对其进行纯化、鉴定及稳定性的初步研究。方法:取表达菌株BL21(DE3)-pET28a-cTnI-TnC,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,NTA树脂亲和层析纯化后,检测其免疫反应性和稳定性... 目的:从含有人cTnI-TnC基因的表达菌中抽取目的蛋白,并对其进行纯化、鉴定及稳定性的初步研究。方法:取表达菌株BL21(DE3)-pET28a-cTnI-TnC,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,NTA树脂亲和层析纯化后,检测其免疫反应性和稳定性,并试验了在4种不同液体基质中cTnI-TnC复合物的稳定性。结果:cTnI-TnC表达水平高,可溶性好。免疫分析显示较高的特异免疫反应性和稳定性。筛选到了能使cTnI-TnC复合物在液态下保持稳定的基质。结论:cTnI-TnC复合物能通过基因工程手段大量获取,并具有较高的免疫反应性和稳定性。含EDTA的10%BSA磷酸缓冲液或含10%小牛血清的磷酸缓冲液是其合适的基质。初步认为cTnI-TnC复合物可以作为cTnI免疫测定用的参考标准品或质控品。 展开更多

关键词 人心肌cTnI-TnC复合物 免疫活性 蛋白质稳定性

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cTnI-linker-TnC融合蛋白基因的构建、表达及鉴定 被引量：2

12

作者 张明明 洪理泉 +1 位作者 卢仁泉 郑佐娅 《现代检验医学杂志》 CAS 2007年第1期10-13,共4页

目的重组及表达人cTnI-linker-TnC融合蛋白。方法应用PCR技术从人心脏cDNA文库分别扩增出cTnI和TnC基因,通过引物设计在两者之间加上19个中性氨基酸残基TS-(G4S)3-AC的linker编码序列,克隆PCR产物,并构建pET28a-cTnI-linker-TnC表达质粒... 目的重组及表达人cTnI-linker-TnC融合蛋白。方法应用PCR技术从人心脏cDNA文库分别扩增出cTnI和TnC基因,通过引物设计在两者之间加上19个中性氨基酸残基TS-(G4S)3-AC的linker编码序列,克隆PCR产物,并构建pET28a-cTnI-linker-TnC表达质粒,转化入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白的表达,NTA树脂亲和层析纯化后检测其纯度和免疫反应性。结果成功构建了cTnI-linker-TnC融合蛋白的基因,并在大肠杆菌中实现可溶性高表达,在摇瓶中的表达量为21 mg/L,经一步NTA树脂亲和层析纯化,获得条带单一的目的蛋白,采用进口全自动免疫检测系统鉴定证实,目的蛋白有较高的免疫反应性。结论采用原核表达方法可以获得具有高纯度和高免疫反应活性的cTnI-linker-TnC融合蛋白。 展开更多

关键词 cTnI—linker—TnC 融合蛋白 表达

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过饱和硫酸铵悬浮法提纯人凝血酶原

13

作者 陈红兵 郑佐娅 李稻 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2007年第4期272-274,共3页

目的从人血浆中简便、快速、高效地提纯凝血酶原。方法氯化钡吸附维生素K依赖的凝血因子,解吸附后低温过饱和硫酸铵沉淀非目的蛋白质,同时悬浮起凝血酶原。结果所提纯的凝血酶原得率较传统的硫酸铵两步沉淀法提纯凝血酶原得率高。结论... 目的从人血浆中简便、快速、高效地提纯凝血酶原。方法氯化钡吸附维生素K依赖的凝血因子,解吸附后低温过饱和硫酸铵沉淀非目的蛋白质,同时悬浮起凝血酶原。结果所提纯的凝血酶原得率较传统的硫酸铵两步沉淀法提纯凝血酶原得率高。结论该方法简便易行,得率满意。 展开更多

关键词 凝血酶原 纯化 悬浮

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免疫不孕中抗精子抗体ELISA检测的研究进展

14

作者 郭海艳 俞炳耀 周文达 《江西医学检验》 2007年第4期355-356,354,共3页

不孕问题是人类生殖研究中一个重要课题．据国内外统计．不孕症发病率逐年上升．我国已婚妇女中约20％患有不孕症。引起不孕的原因很多。其中免疫性因素约占10％．30％，而在免疫性不孕中．最常见的是抗精子抗体（AsAb）所导致的生殖障... 不孕问题是人类生殖研究中一个重要课题．据国内外统计．不孕症发病率逐年上升．我国已婚妇女中约20％患有不孕症。引起不孕的原因很多。其中免疫性因素约占10％．30％，而在免疫性不孕中．最常见的是抗精子抗体（AsAb）所导致的生殖障碍。精子作为一种隐蔽性抗原．与机体免疫系统接触后可产生同种或自身免疫反应。产生抗精子抗体。 展开更多

关键词 抗精子抗体 免疫性因素 ELISA检测 自身免疫反应 机体免疫系统 不孕症 已婚妇女

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