医学生创新能力培养的实践与探索 被引量：26

1

作者 丁文龙 李稻 +4 位作者 陈红 崔永耀 祁红 郁松 夏蓉 《中华医学教育杂志》 2007年第6期87-89,共3页

本文以设计性综合性实验为载体,以探究未知问题为基础,构建一种开放式、学生主动参与的教学方法——"探究为基础的学习"(research-based learning,RBL)。具体方法为临床医学专业二年级学生在导师指导下首先查阅文献、收集资料... 本文以设计性综合性实验为载体,以探究未知问题为基础,构建一种开放式、学生主动参与的教学方法——"探究为基础的学习"(research-based learning,RBL)。具体方法为临床医学专业二年级学生在导师指导下首先查阅文献、收集资料,然后由学生自己提出课题,以未知的问题为基础进行学习、探讨。通过实验研究、分析实验结果、撰写论文、论文答辩等基础训练,使学生学习和了解了知识形成的基本过程,在本科生阶段接受创新意识和创新能力的基本训练。RBL注重培养学生自主学习能力、综合分析问题能力、实践能力和科学思维,有助于形成批判性思维和探究未知世界的意识及能力,提高学生的团队协作精神和综合素质,进而适应自主创新和国家创新体系建设对人才培养的要求。 展开更多

关键词 探究为基础的学习 科学思维 创新能力 教学方法

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骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的研究进展 被引量：5

2

作者 夏万尧 丁文龙 《解剖科学进展》 CAS 2006年第4期359-362,共4页

骨髓间充质干细胞(BMSCs)是存在于骨髓内的一种多能干结缔组织前体细胞,具有多向分化潜能,也是最有可能成为软骨组织工程的种子细胞来源。本文从BMSCs诱导成软骨细胞的方法和研究进展做一综述,如体外细胞团聚集诱导培养、体外单层细胞... 骨髓间充质干细胞(BMSCs)是存在于骨髓内的一种多能干结缔组织前体细胞,具有多向分化潜能,也是最有可能成为软骨组织工程的种子细胞来源。本文从BMSCs诱导成软骨细胞的方法和研究进展做一综述,如体外细胞团聚集诱导培养、体外单层细胞诱导培养、体外三维支架环境中诱导培养、体内软骨微环境诱导培养、和软骨细胞体外共培养诱导以及基因转染诱导培养等,这也是软骨组织工程研究中不可缺少的重要环节。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 软骨细胞分化 体外共培养 软骨组织工程 诱导培养 多向分化潜能 骨微环境 成软骨细胞

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电刺激对背根节神经元/Schwann细胞联合培养体系髓鞘蛋白P0表达的影响 被引量：6

3

作者 万丽丹 夏蓉 +2 位作者 丁文龙 熊俊平 刘刚 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期527-531,共5页

目的:建立体外背根节神经元与Schwann细胞联合培养模型,观察短时低频电刺激对Schwann细胞髓鞘蛋白表达的影响。方法:培养和纯化背根节神经元与Schwann细胞,制成背根节神经元/Schwann细胞联合培养体系。于L-ascorbic acid诱导的同时,施... 目的:建立体外背根节神经元与Schwann细胞联合培养模型,观察短时低频电刺激对Schwann细胞髓鞘蛋白表达的影响。方法:培养和纯化背根节神经元与Schwann细胞,制成背根节神经元/Schwann细胞联合培养体系。于L-ascorbic acid诱导的同时,施予低频电刺激(20Hz,100μs,3V),持续作用1h,分别于L-ascorbicacid诱导后第0,2,4,8和10d取各组培养基上清以ELISA测定其中脑衍生物神经生长因子(BDNF)的水平。另外,于诱导后第7d和14d检测培养体系中髓鞘蛋白P0的表达。结果:电刺激组各时间点BDNF的浓度较对照组显著升高(P<0.01)。经电刺激作用后,联合培养体系中P0表达上调(P<0.05)。然而,电刺激结束后在培养液中加入TrkB-Fc,P0的表达水平则显著降低(P<0.05)。结论:在神经元存在的条件下,短时低频电刺激可促进离体Schwann细胞合成P0,初步认为该作用通过刺激神经元分泌BDNF增多所致。 展开更多

关键词 背根节神经元 SCHWANN细胞 电刺激 BDNF 髓鞘蛋白

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重组hTGF-β1基因转染的BMSCs在体内成软骨能力的初步研究 被引量：5

4

作者 夏万尧 王毅敏 +5 位作者 刘伟 丁文龙 钟梅芳 周广东 崔磊 曹谊林 《解剖科学进展》 CAS 2010年第4期297-301,306,共6页

目的重组hTGF-β1腺病毒(adeno-hTGF-β1)转染的BMSCs在体内成软骨能力的初步研究,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法重组adeno-hTGF-β1转染猪BMSCs,酶联免疫吸附定量检测(ELISA法)重组腺病毒转染hTGF-β1蛋白的表达... 目的重组hTGF-β1腺病毒(adeno-hTGF-β1)转染的BMSCs在体内成软骨能力的初步研究,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法重组adeno-hTGF-β1转染猪BMSCs,酶联免疫吸附定量检测(ELISA法)重组腺病毒转染hTGF-β1蛋白的表达。然后消化收集重组腺病毒转染后的BMSCs,均匀接种于圆盘状PGA支架上,对照组转染adeno-LacZ,然后植入裸鼠背部皮下,在植入后第3周取材,分别行大体观察、组织学、II型胶原免疫组化和蛋白聚糖含量检测对形成组织进行评价。结果 ELISA结果显示adeno-hTGF-β1转染的BMSCs,其hTGF-β1表达量是转染adeno-lacZ 的BMSCs 2.65倍( P<0.05)。植入裸鼠体内后3周取材,实验组HE染色观察可见有软骨形成,但较不均匀,并被纤维组织分割,形成的软骨组织区域可见软骨细胞包埋在软骨陷窝内;对照组可见仅有少量软骨形成,被大量的纤维组织和未降解的PGA支架包裹,实验组和对照组形成软骨占总组织百分比,分别为(41.83±4.64)%和(17.50±2.85)%,P<0.05。Safranin’O染色显示,实验组形成的软骨组织区域都有被染成桔红色蛋白多糖类基质分泌,着色比对照组更深。实验组形成的软骨组织区域有大量棕黄色的II型胶原颗粒,而对照组仅有少量的棕黄色的II型胶原颗粒,实验组形成的软骨组织中的蛋白聚糖含量多于正常猪耳软骨。结论重组hTGF-β1腺病毒转染BMSCs作为种子细胞,在裸鼠体内能促使软骨组织形成,从而为hTGF-β1基因转染的BMSCs在软骨组织工程应用中奠定了基础。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 基因转染 腺病毒 转化生长因子Β1 猪

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神经营养因子在神经损伤修复中的作用机制 被引量：5

5

作者 张婧 丁文龙 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期709-714,共6页

神经损伤后的修复和再生是当今生物医学领域十分重要的研究方向。其中,改善神经修复的微环境,寻求促进神经再生的有效方法是这一领域中的热点。目前有关神经生长微环境的研究主要集中在细胞或组织移植、分子干预、免疫和基因治疗以及组... 神经损伤后的修复和再生是当今生物医学领域十分重要的研究方向。其中,改善神经修复的微环境,寻求促进神经再生的有效方法是这一领域中的热点。目前有关神经生长微环境的研究主要集中在细胞或组织移植、分子干预、免疫和基因治疗以及组织工程治疗等方向展开[1]。神经营养因子（neurotrophic factors,NTFs）是能够促进和维持神经元生存、生长、分化并执行特异功能的蛋白分子,它们对细胞凋亡及其分子调控具有显著的生物学效应,在神经再生、突触形成与突触可塑性、神经退行性疾病的发生发展过程中起着重要作用，对神经损伤后神经细胞的存活、轴突的生长和走向也起着十分重要的营养和诱导作用。 展开更多

关键词 神经生长因子 受体 神经损伤 修复 微环境

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重组hTGF-β1腺病毒转染BMSCs及对其增殖的影响 被引量：3

6

作者 夏万尧 丁文龙 +4 位作者 刘伟 钟梅芳 周广东 崔磊 曹谊林 《解剖科学进展》 CAS 2009年第1期1-5,共5页

目的探讨携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(adeno-hTGF-β1)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)表达及对其增殖的影响。方法重组adeno-hTGF-β1转染猪BMSCs,转染72h后以酶联免疫吸附分析(ELISA)方法定量检测重组腺病毒转染后hTGF-... 目的探讨携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(adeno-hTGF-β1)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)表达及对其增殖的影响。方法重组adeno-hTGF-β1转染猪BMSCs,转染72h后以酶联免疫吸附分析(ELISA)方法定量检测重组腺病毒转染后hTGF-β1蛋白的表达,MTT法测定水貂肺上皮细胞(MV-1-Lu)的生长抑制率,验证转染后所表达的hTGF-β1蛋白的生物学活性,及MTT法检测转染后对BMSCs增殖的影响。结果转染72h,BMSCs表达hTGF-β1蛋白量是转染Adeno-lacZ的BMSCs2.65倍(P<0.05);MV-1-Lu细胞生长抑制率测定显示BMSCs分泌的hTGF-β1蛋白有生物学活性,MTT法检测结果提示adeno-hTGF-β1转染BMSCs的增殖能力较对照组弱。结论转染重组adeno-hTGF-β1的BMSCs表达有生物学活性的hTGF-β1蛋白,hTGF-β1蛋白对BMSCs的增殖有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 增殖 腺病毒 转化生长因子Β1 猪

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不同表位Aβ亚单位疫苗引起免疫反应类型及疫苗安全性评价 被引量：1

7

作者 李国营 胡金家 +2 位作者 汪华侨 徐杰 姚志彬 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期232-238,共7页

为了研究不同表位Aβ亚单位疫苗接种Tg2576鼠引起的免疫反应类型和疫苗的安全性,本研究选用32只5月龄Tg2576小鼠,并随机分成对照组、Aβ42组、Aβ1-15组和Aβ36-42组,5月龄时开始分别接种相应疫苗,接种7个月,间接ELISA法测定血液及脑匀... 为了研究不同表位Aβ亚单位疫苗接种Tg2576鼠引起的免疫反应类型和疫苗的安全性,本研究选用32只5月龄Tg2576小鼠,并随机分成对照组、Aβ42组、Aβ1-15组和Aβ36-42组,5月龄时开始分别接种相应疫苗,接种7个月,间接ELISA法测定血液及脑匀浆上清液中抗Aβ42的抗体滴度。分别取4组小鼠的脾细胞进行培养,用刀豆蛋白(ConA)和各自抗原刺激,ELISA法检测培养液中IFN-γ,IL-2,IL-4和IL-10的含量,免疫组化法检测脑内小胶质细胞的增生情况,组织化学法检测脑、肝、脾、肺、肾组织有无病理性改变。结果显示:(1)与对照组相比,疫苗免疫组血清和脑组织匀浆上清液中抗Aβ42抗体的滴度明显有所增高(P<0.01);(2)脾细胞培养,经ConA或各自抗原刺激后,3组疫苗免疫组细胞增殖显著高于对照组(P<0.01)。培养液中免疫因子检测显示Aβ42组IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10均较高,Aβ1-15组中IL-4和IL-10较高,Aβ36-42组IFN-γ和IL-2较高。免疫组织化学法显示4组小鼠大脑皮质与海马部位均有大量OX-42阳性小胶质细胞,疫苗免疫组OX-42细胞数量更多,但4组之间无显著性差异(P>0.05);(3)HE及组织特异性染色显示在疫苗接种组鼠的重要器官未见病理性改变。上述结果表明,Aβ42疫苗可引起Th2和Th1免疫反应,Aβ1-15亚单位主要引起Th2免疫反应,Aβ36-42疫苗主要引起Th1免疫反应。3种疫苗均可进一步激活脑内小胶质细胞,增强其Aβ清除能力,未发现疫苗接种引起的毒副作用。因此,本实验结果提示Aβ1-15亚单位疫苗更符合AD免疫治疗的要求。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 疫苗 安全性 免疫类型 Tg2576鼠

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轴突信号与周围神经髓鞘形成关系的研究进展 被引量：1

8

作者 万丽丹 林雪群 +1 位作者 梁尚栋 丁文龙 《江西医学院学报》 CAS 2009年第8期125-127,共3页

关键词 雪旺细胞 髓鞘形成 神经素 神经营养因子 神经元电兴奋性

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转录因子KLF6研究进展及其在神经损伤再生中的作用 被引量：1

9

作者 桂婷 丁文龙 《解剖科学进展》 CAS 2012年第5期465-468,472,共5页

Kruppel-like factor6(KLF6)是Krupple样因子家族的一员,其广泛表达于多种组织中,涉及细胞生长与凋亡、肿瘤发生与发展、血管形成及血管损伤后的修复等多种生理病理过程。本文就目前研究中转录因子KLF6的生理和病理学功能,包括神经损伤... Kruppel-like factor6(KLF6)是Krupple样因子家族的一员,其广泛表达于多种组织中,涉及细胞生长与凋亡、肿瘤发生与发展、血管形成及血管损伤后的修复等多种生理病理过程。本文就目前研究中转录因子KLF6的生理和病理学功能,包括神经损伤后再生过程中的作用加以综述。 展开更多

关键词 转录因子KLF6 神经损伤再生 细胞生长 肿瘤发生 病理过程 血管损伤 血管形成 再生过程

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血小板及其粘附分子在肿瘤转移中的作用

10

作者 李涛 丁文龙 《解剖科学进展》 CAS 2007年第3期253-258,共6页

血小板通过多种机制捕获循环中的癌细胞形成癌栓是肿瘤转移的关键环节,其粘附分子介导了恶性肿瘤的侵润、转移与定位。血小板及其多种粘附分子在肿瘤生长和转移的各阶段都发挥了重要作用,其中任何一个因素都可能成为肿瘤治疗的新靶点,... 血小板通过多种机制捕获循环中的癌细胞形成癌栓是肿瘤转移的关键环节,其粘附分子介导了恶性肿瘤的侵润、转移与定位。血小板及其多种粘附分子在肿瘤生长和转移的各阶段都发挥了重要作用,其中任何一个因素都可能成为肿瘤治疗的新靶点,这就为临床肿瘤治疗提供了广阔的思路和丰富的手段。 展开更多

关键词 肿瘤转移 粘附分子 血小板 肿瘤治疗 细胞形成 恶性肿瘤 肿瘤生长 新靶点

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携带人TGF-β_1腺病毒载体的构建及鉴定 被引量：5

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作者 夏万尧 刘伟 +6 位作者 王丹茹 丁文龙 钟梅芳 刘德莉 周广东 崔磊 曹谊林 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1134-1137,共4页

目的构建携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(Adeno-hTGF-β1),为hTGF-β1基因转染骨髓间质干细胞(BMSCs)的研究奠定基础。方法应用基因重组技术构建hTGF-β1腺病毒表达载体,分别用限制性内切酶酶切和聚合酶链反应(PCR)鉴定,... 目的构建携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(Adeno-hTGF-β1),为hTGF-β1基因转染骨髓间质干细胞(BMSCs)的研究奠定基础。方法应用基因重组技术构建hTGF-β1腺病毒表达载体,分别用限制性内切酶酶切和聚合酶链反应(PCR)鉴定,并通过脂质体Fugene 6介导腺病毒DNA转染293细胞。结果重组hTGF-β1腺病毒DNA经限制性内切酶XhoⅠ酶切后,得到14.5、8.1、4.2、4.0、2.5、1.4、0.6 kb片段。与空白腺病毒相比,5.6 kb的片段已被置换成4.2 kb和4.0 kb片段;经PI-SceⅠ/I-CeuⅠ双酶切后,得到32.6 kb和2.6 kb含目的基因片段,片段大小无误,表明重组Adeno-hTGF-β1腺病毒表达系统构建成功。以重组Adeno-hTGF-β1DNA为模板的PCR产物中出现1.35 kb hTGF-β1目的基因片段,表明hTGF-β1基因成功连接至adeno-X腺病毒表达载体中。重组hTGF-β1腺病毒表达载体通过Fugene 6介导转染293包装细胞出现细胞病变效应(CPE)。采用PCR反应鉴定293细胞包装的腺病毒,证实扩增出247 bp的hTGF-β1目的基因片断和312 bp的腺病毒骨架基因片断。结论携带人hTGF-β1的腺病毒载体的构建成功,并能在293细胞包装,为hTGF-β1基因转染的BMSCs在软骨组织工程中的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 基因重组 腺病毒 转化生长因子Β1

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Aβ_(1-15)肽疫苗接种改善AD转基因模型Tg2576鼠的学习记忆能力 被引量：2

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作者 李国营 汪华侨 +2 位作者 胡金家 徐杰 姚志彬 《解剖学研究》 CAS 2006年第2期83-85,89,共4页

目的探讨Aβ1-15亚单位疫苗接种对AD转基因模型鼠学习记忆能力的影响。方法将24只AD转基因模型鼠(Tg2576鼠)随机分为Aβ1-15组、Aβ42组和对照组,每组8只。9月龄开始分别皮下接种相应的疫苗,每只鼠共6次(抗原量0.1mg/次),接种时程6个月... 目的探讨Aβ1-15亚单位疫苗接种对AD转基因模型鼠学习记忆能力的影响。方法将24只AD转基因模型鼠(Tg2576鼠)随机分为Aβ1-15组、Aβ42组和对照组,每组8只。9月龄开始分别皮下接种相应的疫苗,每只鼠共6次(抗原量0.1mg/次),接种时程6个月;对照组皮下注射等量PBS加佐剂。疫苗接种前用Y-迷宫作行为学测试,接种后用Morris水迷宫测作行为学测试。结果疫苗接种前,各组Tg2576鼠的空间学习记忆能力无显著性差异(P>0.05);疫苗接种6个月后,Aβ1-15组,Aβ42组鼠的空间学习记忆能力明显高于对照组鼠(P<0.01);Aβ1-15组鼠与Aβ42组鼠相比差异无显著性(P>0.05)。结论Aβ1-15亚单位疫苗接种和其全肽疫苗一样可以改善Tg2576鼠的学习记忆能力,因而可以替代其全肽疫苗用于AD免疫治疗的进一步研究。 展开更多

关键词 老年性痴呆 Β-淀粉样蛋白 疫苗 行为学测试 Tg2576鼠

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