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题名农杆菌介导双孢蘑菇AS2796转化体系的优化
被引量：9
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作者
王佩
刘文
周雁
沈祥陵
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机构
三峡区域植物遗传与种质创新湖北省重点实验室生物技术研究中心三峡大学
应用真菌研究所植物科学技术学院华中农业大学
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出处
《菌物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期841-850,共10页
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基金
国家自然科学基金(31601804)~~
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文摘
双孢蘑菇Agaricus bisporus是一种药食皆宜的食用真菌,具有极高的经济价值,近年来在双孢蘑菇全基因组测序完成后,功能基因组学的研究逐步提上日程。其中,高效的遗传转化体系作为技术基础成为研究重点。农杆菌介导的遗传转化体系作为一种高效的功能基因组研究方法,在双孢蘑菇中已经得到了广泛的应用,但是仍然存在着效率较低的问题有待解决。为了提高双孢蘑菇的农杆菌转化效率,找到双孢蘑菇遗传转化的最优条件,本实验首先对双孢蘑菇的潮霉素抗性压力进行了筛选,结果显示20mg/L的潮霉素浓度可以抑制菌丝生长,而50mg/L的潮霉素浓度则可以完全抑制菌丝生长。其次,对农杆菌菌株、菌液浓度、乙酰丁香酮浓度、菌丝培养时间以及浸染时间做了L16(45)的正交实验,通过对各因素影响的分析,得出对转化效率影响最大的因素为菌丝培养时间和农杆菌菌株,且当菌株为LBA4404、菌液浓度OD600=0.8、乙酰丁香酮浓度为100μmol/L、菌丝培养时间为40d、浸染时间为10min时,农杆菌介导的双孢蘑菇遗传转化效率最高。
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关键词
双孢蘑菇
农杆菌
遗传转化
菌丝
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Keywords
Agaricus bisporus
Agrobacterium
genetic transformation
hyphae
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分类号
S646.11
[农业科学—蔬菜学]
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