目的:探讨大鼠精原细胞的分离纯化. 方法:采用酶消化法制备10 d Wister大鼠睾丸单细胞悬液;Percoll液不连续密度梯度分离精原细胞;用贴壁速度的差异纯化精原细胞.光电镜观察精原细胞的形态结构特征;应用酪氨酸蛋白激酶(c-kit)免疫化学...目的:探讨大鼠精原细胞的分离纯化. 方法:采用酶消化法制备10 d Wister大鼠睾丸单细胞悬液;Percoll液不连续密度梯度分离精原细胞;用贴壁速度的差异纯化精原细胞.光电镜观察精原细胞的形态结构特征;应用酪氨酸蛋白激酶(c-kit)免疫化学鉴定精原细胞. 结果:精原细胞主要分布在28%～36%(Ⅱ带)间的Percoll梯度;分离纯化的精原细胞形态结构与组织切片上精原细胞一致,其纯度达55.68%;c-kit在精原细胞呈阳性表达,在睾丸体细胞呈弱阳性或阴性表达.结论:利用酶消化法、Percoll液不连续密度梯度及细胞贴壁速度的差异,分离纯化的精原细胞满足体外实验要求;精原细胞表达特异的c-kit受体.展开更多
文摘目的:探讨大鼠精原细胞的分离纯化. 方法:采用酶消化法制备10 d Wister大鼠睾丸单细胞悬液;Percoll液不连续密度梯度分离精原细胞;用贴壁速度的差异纯化精原细胞.光电镜观察精原细胞的形态结构特征;应用酪氨酸蛋白激酶(c-kit)免疫化学鉴定精原细胞. 结果:精原细胞主要分布在28%～36%(Ⅱ带)间的Percoll梯度;分离纯化的精原细胞形态结构与组织切片上精原细胞一致,其纯度达55.68%;c-kit在精原细胞呈阳性表达,在睾丸体细胞呈弱阳性或阴性表达.结论:利用酶消化法、Percoll液不连续密度梯度及细胞贴壁速度的差异,分离纯化的精原细胞满足体外实验要求;精原细胞表达特异的c-kit受体.
