加味四君子汤对脑缺血大鼠脑组织Occludin,ZO-1,Claudin-1蛋白及其mRNA表达的影响 被引量：12

1

作者 唐冰镕 李花 +1 位作者 刘旺华 胡康丽 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期57-63,共7页

目的:探讨加味四君子汤对脑缺血大鼠脑组织闭合蛋白(Occludin),密封蛋白-1(Claudin-1),闭锁连接蛋白-1(ZO-1)表达的影响,并探讨相关的作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,依达拉奉组(3.2×10-3g·kg-1),... 目的:探讨加味四君子汤对脑缺血大鼠脑组织闭合蛋白(Occludin),密封蛋白-1(Claudin-1),闭锁连接蛋白-1(ZO-1)表达的影响,并探讨相关的作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,依达拉奉组(3.2×10-3g·kg-1),加味四君子汤加减低、中、高剂量组(4.77,9.54,19.08 g·kg-1)。采用线栓法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,治疗7 d后处死,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠缺血侧脑皮质区Occludin,ZO-1,Claudin-1蛋白的表达,运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠缺血侧脑皮质区Occludin,ZO-1,Claudin-1 mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型组Occludin,Claudin-1,ZO-1蛋白显著减少(P<0.01);与模型组比较,依达拉奉组、加味四君子汤各剂量组Occludin,Claudin-1,ZO-1蛋白均显著增高(P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠Occludin,Claudin-1,ZO-1 mRNA表达下调(P<0.01);与模型组比较,依达拉奉组、加味四君子汤各剂量组大鼠Occludin,Claudin-1,ZO-1 mRNA表达上升(P<0.01)。结论:加味四君子汤可能通过增加紧密连接蛋白Occludin,ZO-1,Claudin-1的表达,保护血脑屏障,减轻缺血性脑卒中大鼠脑水肿。 展开更多

关键词 脑缺血 脑水肿 加味四君子汤 健脾益气利水 闭合蛋白 密封蛋白-1 闭锁连接蛋白-1

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三化汤及其拆方对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制 被引量：7

2

作者 巩子汉 李雯洁 +1 位作者 孙明杰 黄颖 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期11-18,共8页

目的:观察三化汤及其拆方对脑缺血再灌注大鼠脑组织的保护作用,探讨三化汤的作用机制及其组方配伍特点。方法:将140只清洁级SD大鼠随机分为正常组,假手术组及模型组,造模组采用Longa线栓法制作大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)动物模型,后按... 目的:观察三化汤及其拆方对脑缺血再灌注大鼠脑组织的保护作用,探讨三化汤的作用机制及其组方配伍特点。方法:将140只清洁级SD大鼠随机分为正常组,假手术组及模型组,造模组采用Longa线栓法制作大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)动物模型,后按照随机数字表法分为模型组,尼莫地平组,三化汤去羌活组,羌活组及三化汤组,灌胃给药5 d。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测各组大鼠脑组织梗死面积,苏木素-伊红(HE)染色及电镜检测各组大鼠脑组织病理变化情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测脑组织紧密连接闭合蛋白-5(Claudin-5),咬合蛋白(Occludin)及闭锁小带蛋白-1(ZO-1)mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑组织Claudin-5,Occludin及ZO-1蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠脑组织梗死灶显著,病理形态及超微结构改变明显,Claudin-5,Occludin及ZO-1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,尼莫地平组、三化汤组大鼠脑组织梗死面积显著降低(P<0.01),病理损伤减轻;三化汤去羌活组及羌活组大鼠脑组织梗死面积及病理改变有减小趋势,差异无统计学意义;与模型组比较,尼莫地平组、三化汤组、羌活组大鼠脑组织Claudin-5,Occludin,ZO-1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与三化汤去羌活组比较,羌活组大鼠脑组织Claudin-5,ZO-1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:三化汤对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与调节Claudin-5,Occludin及ZO-1表达,改善血脑屏障的功能密切相关。其中羌活可能在三化汤保护大鼠脑缺血再灌注损伤中发挥了重要作用。 展开更多

关键词 三化汤 羌活 脑缺血/再灌注 血脑屏障 紧密连接闭合蛋白-5(Claudin-5) 咬合蛋白(Occludin) 闭锁小带蛋白-1(zo-1)

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闭锁连接蛋白-1 核酸适配体的筛选与初步应用

3

作者 李玉娟 张瀚文 +2 位作者 刘珊 王佳平 李勇枝 《北京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第8期870-877,共8页

基于配体指数富集系统进化技术筛选闭锁连接蛋白-1的核酸适配体,最终筛选到15条ZO-1的核酸适配体(APTZO-1).排除线性结构与相似结构后,采用酶联免疫吸附法表征了9条APTZO-1与ZO-1亲和力的大小,排序依次为:APTZO-18>APTZO-12>APTZO... 基于配体指数富集系统进化技术筛选闭锁连接蛋白-1的核酸适配体,最终筛选到15条ZO-1的核酸适配体(APTZO-1).排除线性结构与相似结构后,采用酶联免疫吸附法表征了9条APTZO-1与ZO-1亲和力的大小,排序依次为:APTZO-18>APTZO-12>APTZO-17>APTZO-113>APTZO-11>APTZO-15>APTZO-115>APTZO-112>APTZO-14.采用Cy5荧光基团标记APTZO-18(Cy5-APTZO-18),证实了其能对人结直肠腺癌细胞(Caco-2)与人脑微管内皮细胞(hCMEC/D3)的ZO-1进行荧光定位与半定量分析,且与基于ZO-1抗体法的免疫荧光与蛋白印迹实验结果基本相似.本研究首次筛选到了ZO-1的系列核酸适配体,有望为ZO-1的荧光标记与半定量分析提供一种新型的、特异性高的工具分子. 展开更多

关键词 闭锁连接蛋白-1 配体指数富集系统进化 核酸适配体 荧光标记 半定量分析

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低聚壳聚糖硒抗玉米赤霉烯酮对IPEC-J2细胞紧密连接蛋白表达的影响

4

作者 傅春妮 李元辉 +2 位作者 李鹏程 李留安 秦顺义 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第11期4311-4318,共8页

试验旨在探究低聚壳聚糖硒抗玉米赤霉烯酮(zearalenon,ZEN)对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)紧密连接蛋白表达的影响。试验分为对照组(C)、ZEN(30μg/mL ZEN)、ZEN+0.5 Se(30μg/mL ZEN+0.5μmol/L低聚壳聚糖硒,以Se计)、ZEN+1.5 Se和ZEN+3 S... 试验旨在探究低聚壳聚糖硒抗玉米赤霉烯酮(zearalenon,ZEN)对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)紧密连接蛋白表达的影响。试验分为对照组(C)、ZEN(30μg/mL ZEN)、ZEN+0.5 Se(30μg/mL ZEN+0.5μmol/L低聚壳聚糖硒,以Se计)、ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组。待细胞长至60%~70%汇合时,ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组培养液更换为含对应Se浓度的培养液,C和ZEN组更换为正常培养液,12 h后向含ZEN组加入30μg/mL ZEN,继续培养24 h。收集各组细胞培养液,检测碱性磷酸酶(AKP)活性;Western blotting法检测闭锁连接蛋白(zonula occludens-1,ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)的表达,免疫荧光法检测ZO-1和Occludin蛋白的表达和定位情况。AKP活性检测结果表明,与对照组相比,ZEN、ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se组AKP活性均显著升高(P<0.05),ZEN+3 Se组AKP活性差异不显著(P>0.05);与ZEN组相比,ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组AKP活性均显著降低(P<0.05)。Western blotting检测结果表明,与对照组比,ZEN组ZO-1和Occludin蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与ZEN组比,ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组ZO-1表达水平均差异不显著(P>0.05),但随着Se浓度的增加,ZO-1表达水平逐渐升高,ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se、ZEN+3 Se组Occludin表达水平均显著升高(P<0.05)。免疫荧光结果表明,低聚壳聚糖硒可缓解ZEN引起的ZO-1和Occludin蛋白荧光信号减弱现象,并恢复ZO-1和Occludin蛋白的定位分布。由此说明,低聚壳聚糖硒可降低ZEN引起的IPEC-J2细胞AKP活性升高,上调ZEN引起的ZO-1、Occludin蛋白表达水平下降,并调节其定位分布。 展开更多

关键词 玉米赤霉烯酮 低聚壳聚糖硒 猪小肠上皮细胞(IPEC-J2) 闭锁连接蛋白(zo-1)

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脓毒症诱导血脑屏障通透性增加的机制研究

5

作者 李娅 刘梦婷 +4 位作者 张诗荧 栗卓 文茵 丁洪光 曾红科 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期699-703,共5页

目的探究脓毒症对血脑屏障通透性的影响。方法采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症大鼠模型。根据干预时间随机(随机数字法)分组:假手术组、脓毒症1d组、脓毒症4 d组、脓毒症7 d组。采用荧光素钠检测血脑屏障的通透性变化;采用Western blot和... 目的探究脓毒症对血脑屏障通透性的影响。方法采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症大鼠模型。根据干预时间随机(随机数字法)分组:假手术组、脓毒症1d组、脓毒症4 d组、脓毒症7 d组。采用荧光素钠检测血脑屏障的通透性变化;采用Western blot和免疫荧光方法检测脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白的表达变化。结果和假手术组大鼠相比较,脓毒症组的大鼠呼吸急促,精神萎靡、反应迟钝,活动量少、进食饮水少,腹胀明显,排稀便。腹腔解剖可见肠系膜黏连,近端肠管扩张,肓肠结扎部位颜色暗红且表面有脓液渗出,整个腹腔可见血性渗出液。和假手术组大鼠相比较,脓毒症组的大鼠体质量下降,随着脓毒症的病程发展,大鼠体质量持续降低,脓毒症7 d组的大鼠体质量最低,且明显低于脓毒症4 d(P<0.05)、脓毒症1 d(P<0.05)以及假手术组(P<0.05)的大鼠。和假手术组大鼠相比较,肓肠结扎穿孔1d后大鼠脑组织中的荧光素钠的渗漏显著增加(P<0.05)。随着脓毒症的病程发展,荧光素钠渗漏含量持续增加。脓毒症7 d的大鼠脑组织中的荧光素钠含量最高,并且明显高于脓毒症4 d、脓毒症1d以及假手术组的大鼠(均P<0.05)。和假手术组大鼠相比较,盲肠结扎穿孔1d后大鼠脑组织的脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白Claudin-5、Occludin和ZO-1的蛋白表达量明显降低(均P<0.05)。随着脓毒症的病程发展,紧密连接蛋白的表达量持续降低。脓毒症7d的大鼠脑组织中的紧密连接蛋白Claudin-5、Ocdudin、ZO-1的表达量最低,并且明显低于脓毒症4d,脓毒症1 d以及假手术组的大鼠(均P<0.05)。结论脓毒症可诱导大鼠的血脑屏障通透性增加,并且脓毒症持续的时间越久,血脑屏障的通透性越高。 展开更多

关键词 脓毒症 脑损伤 血脑屏障 脑微血管内皮细胞 紧密连接 密封蛋白-5 咬合蛋白 闭锁蛋白-1

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胃癌患者紧密连接蛋白1的表达及意义

6

作者 杨巍 谷小虎 +2 位作者 苏晓晖 郑志超 赵岩 《肿瘤学杂志》 CAS 2012年第4期250-253,共4页

[目的]研究胃癌组织中紧密连接蛋白1（ZO-1）的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学方法检测辽宁省肿瘤医院2001年1月~2006年12月期间收集的50例正常胃组织和100例胃癌及其癌旁组织标本中ZO-1表达情况,并分析胃癌组织中ZO-1表达水平与... [目的]研究胃癌组织中紧密连接蛋白1（ZO-1）的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学方法检测辽宁省肿瘤医院2001年1月~2006年12月期间收集的50例正常胃组织和100例胃癌及其癌旁组织标本中ZO-1表达情况,并分析胃癌组织中ZO-1表达水平与各临床参数之间的关系。[结果]ZO-1在胃癌组织中表达下调,在胃癌组织中的表达率（40.0%）显著低于癌旁组织（84.0%）和正常胃组织（84.0%）（P=0.000）。ZO-1表达水平与胃癌患者年龄、性别和组织学类型无关（P均〉0.05）。ZO-1表达水平与分化程度、浸润深度、区域淋巴结转移、远处转移及临床分期具有相关性,分化程度越低、浸润越深、伴有淋巴结转移和远处转移、临床分期越高,ZO-1表达水平越低（P均〈0.05）。ZO-1高表达组5年生存率高于低表达组（70%vs20%,P〈0.05）。[结论]ZO-1在胃癌组织中表达下调,与肿瘤的临床分期、转移和预后密切相关,可作为胃癌诊断和预后评价的标志物之一。 展开更多

关键词 胃肿瘤 紧密连接蛋白1 免疫组织化学

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黄连解毒汤对阿尔茨海默病小鼠闭锁小带蛋白表达的影响

7

作者 吕翰林 张英华 +2 位作者 樊丽 周建文 李洋 《智慧健康》 2022年第11期190-192,196,共4页

目的通过观察黄连解毒汤(huanglian jiedutang,HLJDT)对APP/PS1双转基因小鼠闭锁小带蛋白(ZO-1)表达的影响,探究其对阿尔茨海默病的保护机制。方法将APP/PS1双转基因小鼠随机分为6组:模型组、多奈哌齐组(2 mg·kg^(-1)·d^(-1)... 目的通过观察黄连解毒汤(huanglian jiedutang,HLJDT)对APP/PS1双转基因小鼠闭锁小带蛋白(ZO-1)表达的影响,探究其对阿尔茨海默病的保护机制。方法将APP/PS1双转基因小鼠随机分为6组:模型组、多奈哌齐组(2 mg·kg^(-1)·d^(-1))、黄连解毒汤低、中、高剂量(1.5、3、6)g·kg^(-1)·d^(-1),C57BL/6小鼠为正常组,每组8只。采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,采用Western blot实验对小鼠海马区β-淀粉样蛋白(Aβ)和ZO-1蛋白进行检测,采用实时荧光定量PCR技术对海马区Aβ和ZO-1 mRNA表达进行检测。结果与正常组比较,模型组小鼠的穿越平台次数明显减少(P<0.05),目标象限游程明显减少(P<0.05),Aβ蛋白表达明显增加(P<0.05),ZO-1蛋白表达明显减少(P<0.05),AβmRNA表达明显增加(P<0.05),ZO^(-1) mRNA表达明显减少;与模型组比较,多奈哌齐组和HLJDT高剂量组小鼠穿越平台次数明显增加(P<0.05),目标象限游程明显增加(P<0.05),Aβ蛋白表达明显减少(P<0.05),ZO-1蛋白表达明显增加(P<0.05),AβmRNA表达明显减少(P<0.05),ZO-1 mRNA表达明显增加。结论HLJDT改善小鼠学习记忆能力和对神经保护作用,可能是通过降低Aβ表达,升高ZO^(-1)表达实现的。 展开更多

关键词 黄连解毒汤 β-淀粉样蛋白(Aβ) 闭锁小带蛋白(zo-1)

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连接蛋白36和闭锁小带蛋白1在HeLa细胞的表达及相互关系研究

8

作者 吕世军 李和 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期412-416,共5页

目的观察连接蛋白36和闭锁小带蛋白1在HeLa细胞的表达及探讨两者之间的相互关系。方法RT-PCR获得Cx36全长编码区基因片段,与PCR2.1TOPO克隆载体连接测序,亚克隆到pcDNA3真核表达载体,脂质体介导法转染HeLa细胞,G418抗性筛选阳性克隆,Wes... 目的观察连接蛋白36和闭锁小带蛋白1在HeLa细胞的表达及探讨两者之间的相互关系。方法RT-PCR获得Cx36全长编码区基因片段,与PCR2.1TOPO克隆载体连接测序,亚克隆到pcDNA3真核表达载体,脂质体介导法转染HeLa细胞,G418抗性筛选阳性克隆,Western blotting,双标记免疫荧光和免疫沉淀分析HeLa细胞Cx36和ZO-1表达及关系。结果构建了重组真核表达载体Cx36-pcDNA3,转染的HeLa细胞获得稳定表达Cx36的克隆,Western blotting显示转染的HeLa细胞表达Cx36蛋白。双标记免疫荧光染色显示,HeLa细胞膜之间Cx36呈点状或线状表达,在Cx36表达部位也同样表达ZO-1。免疫沉淀显示细胞裂解液分别与抗ZO-1或抗Cx36抗体共沉淀,抗Cx36或抗ZO-1抗体进行免疫检测,前者在36kD有特异性Cx36蛋白带,后者在220kD处有ZO-1蛋白带。结论转染Cx36的HeLa细胞表达Cx36和ZO-1,两者共表达并且相互结合。 展开更多

关键词 连接蛋白36(Cx36) 闭锁小带蛋白1(zo-1) HELA细胞 RT-PCR WESTEM BLOTTING 双标记免疫荧光 免疫沉淀

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血浆闭锁小带蛋白联合血清降钙素原检测对感染性休克患者预后评估的临床价值 被引量：14

9

作者 桑珍珍 高杰 +2 位作者 贾春梅 王淑娟 李勇 《中国急救医学》 CAS CSCD 2021年第4期307-311,共5页

目的探讨血浆闭锁小带蛋白1(zonula occludens 1,ZO-1)联合血清降钙素原(procalcitonin,PCT)对感染性休克患者预后的评估价值。方法选择140例感染性休克患者作为研究对象,根据患者28 d转归分为存活组(88例)和死亡组(52例)。选择同期健... 目的探讨血浆闭锁小带蛋白1(zonula occludens 1,ZO-1)联合血清降钙素原(procalcitonin,PCT)对感染性休克患者预后的评估价值。方法选择140例感染性休克患者作为研究对象,根据患者28 d转归分为存活组(88例)和死亡组(52例)。选择同期健康体检者40例作为对照组。分析两组患者的临床资料,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆ZO-1含量。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析ZO-1和血清PCT对感染性休克患者死亡的预测价值。采用二元Logistic回归分析影响感染性休克患者预后的危险因素。结果 (1)与存活组比较,感染性休克死亡组患者的急性生理学及慢性健康状况评估系统Ⅱ(APACHEⅡ评分)、序贯器官衰竭评分(SOFA)、血浆ZO-1和血清PCT含量显著升高[APACHEⅡ评分(分):14.92±5.34 vs. 26.47±6.39,SOFA(分):6.0(4.0,8.0 vs. 14.0(11.0,17.0)),ZO-1(ng/m L):2.51(1.78,2.86) vs. 2.96(2.75,3.82),PCT(ng/m L):4.34±2.26 vs. 18.32±5.37,P均<0.05)。二元Logistic回归分析发现,APACHEⅡ评分、SOFA、血浆ZO-1和血清PCT是影响感染性休克患者预后的独立危险因素,其风险比(OR)值分别为4.314、4.467、2.019和1.793。(2)用ROC曲线分析ZO-1和PCT预测感染性休克死亡的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.756(95%CI 0.677,0.825)、0.701 (95%CI 0.617,0.775)。血浆ZO-1最佳临界值为2.64 ng/m L时,预测感染性休克患者死亡的敏感度为67.05%,特异度为77.85%;血清PCT最佳临界值为15.41 ng/m L时,预测感染性休克患者死亡的敏感度为77.3%,特异度为69.2%;血浆ZO-1联合血清PCT预测感染性休克患者死亡的AUC为0.938(95%CI 0.885,0.972),最佳临界值为0.261时,预测感染性休克患者死亡的敏感度为81.82%,特异度为96.15%。结论血浆ZO-1联合血清PCT检测对感染性休克患者的预后评估有一定的临床价值。 展开更多

关键词 闭锁小带蛋白1(zo-1) 降钙素原(PCT) 感染性休克 预后

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黄芪注射液拮抗高糖腹膜透析液对腹膜间皮细胞紧密连接的影响 被引量：11

10

作者 舒静 王怡 张晓云 《上海中医药大学学报》 CAS 2007年第4期50-53,共4页

目的:观察高糖腹膜透析液和添加不同剂量黄芪注射液的腹膜透析液对腹膜间皮细胞紧密连接(TJ)形态结构和紧密连接相关蛋白封闭蛋白-1(ZO-1)表达的影响。方法:SD大鼠随机分为4组,腹腔注射生理盐水、高糖腹透液和添加黄芪注射液的腹透液,造... 目的:观察高糖腹膜透析液和添加不同剂量黄芪注射液的腹膜透析液对腹膜间皮细胞紧密连接(TJ)形态结构和紧密连接相关蛋白封闭蛋白-1(ZO-1)表达的影响。方法:SD大鼠随机分为4组,腹腔注射生理盐水、高糖腹透液和添加黄芪注射液的腹透液,造模8周后,检测对照组(0.9%生理盐水)、腹透组(含糖4.25%腹透液)、低黄芪组(含糖4.25%、黄芪1%的腹透液)、高黄芪组(含糖4.25%、黄芪2%的腹透液)SD大鼠的腹膜透析超滤量、腹膜对尿素氮和肌酐清除率。并应用光镜、透射电镜和免疫组织化学染色法观察各组的腹膜标本紧密连接结构的改变和ZO-1蛋白水平表达的变化。结果:腹透组和高黄芪组腹膜透析8周腹透液超滤量与对照组相比较明显减少(P<0.05);腹透组和高黄芪组腹膜透析8周尿素氮清除率与对照组相比较明显降低(P<0.05);各组腹膜间皮细胞均有ZO-1表达,腹透组、高、低黄芪组与对照组相比,ZO-1表达明显减少(P<0.05)。结论:高糖腹膜透析液对腹膜间皮细胞的紧密连接和ZO-1的表达有负影响,黄芪对腹膜间皮细胞的紧密连接等结构有一定的保护作用,但对ZO-1的表达干预作用不显著。 展开更多

关键词 腹膜透析 紧密连接 封闭蛋白-1 葡萄糖 黄芪注射液

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大鼠精索静脉曲张氧化应激介导附睾上皮紧密连接蛋白ZO-1损伤及对附睾功能的影响 被引量：12

11

作者 白广炜 韩大愚 +5 位作者 杨其运 谢云 郭泽信 周文良 邓春华 孙祥宙 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期302-308,共7页

目的:探索精索静脉曲张(VC)大鼠模型中氧化应激介导附睾上皮紧密连接蛋白ZO-1损伤及对附睾功能影响。方法:将45只体重220～235 g的SD大鼠随机分为假手术组(单纯暴露并分离左肾静脉)、实验组(部分缩窄左肾静脉并充分结扎精索静脉侧支)和... 目的:探索精索静脉曲张(VC)大鼠模型中氧化应激介导附睾上皮紧密连接蛋白ZO-1损伤及对附睾功能影响。方法:将45只体重220～235 g的SD大鼠随机分为假手术组(单纯暴露并分离左肾静脉)、实验组(部分缩窄左肾静脉并充分结扎精索静脉侧支)和治疗组[造模术后给予150 mg/(kg·d)维生素E灌胃60 d],每组各15只。模型构建后60d分别观察左侧附睾组织学改变,采用qPCR、免疫组化染色、免疫荧光染色及Western印迹等检测左侧附睾上皮连接蛋白ZO-1及连接相关蛋白表达水平,同时检测附睾组织超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)活性,丙二醛(MDA)、α葡糖苷酶含量以及精子活力指标。结果:与假手术组相比,实验组左侧附睾上皮结构紊乱,上皮细胞数量减少,可见部分上皮细胞脱落至附睾管腔。qPCR检测claudin11、β-catenin、JAM-A、cadherin12、ZO-1等多个连接蛋白表达,结果显示除实验组较假手术组ZO-1表达明显下调外(P<0.05),其余蛋白均无显著差异。免疫组化染色、免疫荧光染色Western印迹结果显示,与假手术组相比,实验组ZO-1表达明显降低(P<0.05);经维生素E治疗后,治疗组ZO-1表达较实验组明显升高(P<0.05)。实验组较假手术组大鼠附睾组织中MDA明显升高[(1.21±0.18)nmol/mg protein vs(0.41±0.05)nmol/mg protein,P<0.05)],SOD[(298.62±67.84)U/mg protein vs(814.65±73.64)U/mg protein,P<0.05)]、T-AOC[(0.24±0.04)nmol/mg protein vs(0.84±0.07)nmol/mg protein,P<0.05)]、α葡糖苷酶[(5.82±1.24)U/mg protein vs(11.72±2.72)U/mg protein,P<0.05)]明显降低;经维生素E干预后,治疗组SOD [(497.73±48.03)U/mg protein]、T-AOC[(0.42±0.06)nmol/mg protein]、α葡糖苷酶[(9.11±1.91)U/mg protein]较实验组明显回升(P<0.05),MDA[(0.69±0.12)nmol/mg protein]明显下降(P<0.05)。附睾精子活力检测,实验组较假手术组前向运动精子百分率明显降低[(31.33±6.32)%vs(71.21±5.21)%,P<0.05],经维生素E干预后治疗组[(60.68 展开更多

关键词 精索静脉曲张 闭锁小带蛋白1(zo-1) 附睾 紧密连接 氧化应激 大鼠

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