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正交实验法在PCR反应条件优化中的应用 被引量：64
1
作者 杨水云 李续娥 +2 位作者 吴明宇 孙飞龙 李剑君 《生物数学学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期202-206,共5页
本研究以小肠结肠炎耶尔森氏菌为研究材料,将纯理论数学方法-正交设计实验法,应用于分子生物学技术PCR体系的优化之中.首先采用搜索性正交实验,在此实验结果基础上,进一步设计细调性正交实验来寻求PCR反应的最适条件.所得优化扩增体系稳... 本研究以小肠结肠炎耶尔森氏菌为研究材料,将纯理论数学方法-正交设计实验法,应用于分子生物学技术PCR体系的优化之中.首先采用搜索性正交实验,在此实验结果基础上,进一步设计细调性正交实验来寻求PCR反应的最适条件.所得优化扩增体系稳定,重复性好,表明正交实验设计方法高效快速,科学性强,是PCR反应条件优化中值得推广使用的有效方法. 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森氏菌 PCR 正交实验 条件优化
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O∶3和O∶9小肠结肠炎耶尔森菌主要毒力基因分布调查 被引量：56
2
作者 景怀琦 李继耀 +9 位作者 肖玉春 邱海燕 顾锋 夏胜利 崔志刚 金东 阚飙 顾玲 汪华 徐建国 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2004年第4期317-319,共3页
目的　了解我国常见致病性血清型毒力基因的分布情况。方法　参照国外发展成熟的聚合酶链反应(PCR)技术进行毒力基因检测。结果　实验证实在我国分离到的主要流行血清型O∶3和O∶9小肠结肠炎耶尔森菌毒力基因分布特征为 :ail+ 、ystA+ ... 目的　了解我国常见致病性血清型毒力基因的分布情况。方法　参照国外发展成熟的聚合酶链反应(PCR)技术进行毒力基因检测。结果　实验证实在我国分离到的主要流行血清型O∶3和O∶9小肠结肠炎耶尔森菌毒力基因分布特征为 :ail+ 、ystA+ 、ystB-、yadA+ 、virF+ 占 5 6.2 % ;ail+ 、ystA+ 、ystB-、yadA-、virF-占 2 5 .6% ;其他型占18.2 %。结论　通过实验证实在我国引起感染暴发和流行的血清型O∶3和O∶9小肠结肠炎耶尔森菌毒力基因的分布主要为 :ail +、ystA+ 、yadA+ 、ystB-、virF+ 型 ,很少部分的ail+ 、ystA+ 、ystB-、yadA-、virF-根据以前的资料被认为是毒力质粒丢失的结果 ,其他型很有可能是非致病的菌株。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 毒力 基因 血清型 致病性
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中国六省致病小肠结肠炎耶尔森菌的脉冲场凝胶电泳分析 被引量：16
3
作者 金东 崔志刚 +10 位作者 肖玉春 王鑫 顾锋 夏胜利 胡万富 杨晋川 汪华 顾玲 徐建国 阚飙 景怀琦 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期677-680,共4页
目的对中国致病小肠结肠炎耶尔森菌分离株进行脉冲场凝胶电泳分析。方法参照美国疾病预防控制中心PulseNet实验方法对中国6省165株致病小肠结肠炎耶尔森菌进行脉冲场凝胶电泳分析,使用BioNumerics软件进行聚类分析,并按照PulseNet命名... 目的对中国致病小肠结肠炎耶尔森菌分离株进行脉冲场凝胶电泳分析。方法参照美国疾病预防控制中心PulseNet实验方法对中国6省165株致病小肠结肠炎耶尔森菌进行脉冲场凝胶电泳分析,使用BioNumerics软件进行聚类分析,并按照PulseNet命名原则对带型进行命名。结果将114株O:3血清型小肠结肠炎耶尔森菌分成25个带型;K6GN11C30012(50株)、K6GN11C30015 (19株)及K6GN11C30016(10株)是其主要带型,三个主要带型之间聚类相似性很高。将51株O:9血清型小肠结肠炎耶尔森菌分为14个带型;其中K6GN11C90004(22株)与K6GN11C90010(13株)是其主要带型,K6GN11C90004与K6GN11C90010带型之间有一定的差异。O:3与O:9血清型的主要带型之间有明显的差异。结论O:3血清型的小肠结肠炎耶尔森菌可能起源于一个克隆系,且在不同地区和年代变异很小;O:9血清型的小肠结肠炎耶尔森菌可能起源于两个不同的克隆系,且各自有一定的变异。O:3与O:9血清型的小肠结肠炎耶尔森菌亲缘关系较远。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 脉冲场凝胶电泳 分子分型
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中国小肠结肠炎耶尔森菌流行现状及其研究进展 被引量：16
4
作者 陈邬锦 王鹏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期380-384,共5页
小肠结肠炎耶尔森菌在我国分布广泛,存在一定的地域、人群、时间等流行病学差异。随着我国分子流行病学的发展,许多基于分子、核酸水平的新技术及新方法不断被运用在小肠结肠炎耶尔森菌的病原生物学研究中。本文针对目前我国小肠结肠炎... 小肠结肠炎耶尔森菌在我国分布广泛,存在一定的地域、人群、时间等流行病学差异。随着我国分子流行病学的发展,许多基于分子、核酸水平的新技术及新方法不断被运用在小肠结肠炎耶尔森菌的病原生物学研究中。本文针对目前我国小肠结肠炎耶尔森菌的人群间、动物间及不同时间、地区间的流行病学差异、病原生物学研究、主要分子分型及毒力基因研究进行综述。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 流行现状 分子分型 毒力基因
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江苏省南通地区小肠结肠炎耶尔森菌分布特征初步研究 被引量：15
5
作者 顾玲 汪华 +13 位作者 朱凤才 史智扬 曾小燕 谭兆营 肖玉春 邱海燕 王鑫 金东 崔志刚 王冰 阚飙 王新生 景怀琦 徐建国 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期786-789,共4页
目的了解江苏省南通地区小肠结肠炎耶尔森菌的分布特点和毒力特征。方法用常规方法从家畜家禽粪便标本中分离小肠结肠炎耶尔森菌,PCR法检测其五种毒力相关基因,同时对国内分离到的O:8血清型菌株进行脉冲场凝胶电泳分析。结果从该地区29... 目的了解江苏省南通地区小肠结肠炎耶尔森菌的分布特点和毒力特征。方法用常规方法从家畜家禽粪便标本中分离小肠结肠炎耶尔森菌,PCR法检测其五种毒力相关基因,同时对国内分离到的O:8血清型菌株进行脉冲场凝胶电泳分析。结果从该地区293份家畜家禽粪便标本中分离到91株小肠结肠炎耶尔森菌,分离率为31.06%。未分离到国内主要流行血清型O:3和O:9,其中有39.57%菌株毒力基因分布特征为:ail-、ystA-、ystB-、yadA-、virF-,有60.43%菌株为ail-、ystA-、ystB+、yadA-、virF-,两株国外引进的强毒菌株具有相同的脉冲图形,与国内分离到的O:8血清型菌株存在显著的差异。结论致病性小肠结肠炎耶尔森菌的分布具有局限性,江苏省南通地区小肠结肠炎耶尔森菌的分布可能以非致病菌为主。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 血清型 毒力基因
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小肠结肠炎耶尔森菌耐热性肠毒素B基因(ystB)初步研究 被引量：15
6
作者 王鑫 邱海燕 +11 位作者 肖玉春 许彦梅 金东 崔志刚 郑翰 罗霞 顾玲 汪华 朱凤才 史智扬 景怀琦 徐建国 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第6期449-453,共5页
目的研究小肠结肠炎耶尔森菌的耐热性肠毒素B基因(ystB)的分布特征。方法通过聚合酶链反应(PCR)、DNA探针杂交方法与序列分析检测致病性和非致病性小肠结肠炎耶尔森菌携带ystB基因的情况。结果98株非致病性小肠结肠炎耶尔森菌中52株携带... 目的研究小肠结肠炎耶尔森菌的耐热性肠毒素B基因(ystB)的分布特征。方法通过聚合酶链反应(PCR)、DNA探针杂交方法与序列分析检测致病性和非致病性小肠结肠炎耶尔森菌携带ystB基因的情况。结果98株非致病性小肠结肠炎耶尔森菌中52株携带ystB基因,占53.06%。全部48株致病性小肠结肠炎耶尔森菌均不携带该基因。结论ystB基因仅存在于部分生物1A型非致病性小肠结肠炎耶尔森菌,而不存在于致病性菌株中。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 耐热性肠毒素B基因DNA序列
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上海市浦东新区食源性小肠结肠炎耶尔森菌耐药及分子流行病学特征 被引量：14
7
作者 王闻卿 崔琪奇 +8 位作者 王筱 张勇琪 李彩云 苏靖华 赵冰 黄红 朱林英 许学斌 郝莉鹏 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期354-359,共6页
目的了解上海市浦东新区食源性小肠结肠炎耶尔森菌耐药及分子流行病学特征。方法 2012-2016年主动、定点采集上海市浦东新区4类流通生鲜食品,使用冷增菌方法分离小肠结肠炎耶尔森菌,并分析菌株生物型、血清型、毒力基因型、耐药性和PFG... 目的了解上海市浦东新区食源性小肠结肠炎耶尔森菌耐药及分子流行病学特征。方法 2012-2016年主动、定点采集上海市浦东新区4类流通生鲜食品,使用冷增菌方法分离小肠结肠炎耶尔森菌,并分析菌株生物型、血清型、毒力基因型、耐药性和PFGE分子型别。结果共采集食品3 900份(禽类590份、畜类1 074份、水产品1 488份、蔬菜748份),其中111份(2.8%)检出小肠结肠炎耶尔森菌。禽类制品(5.3%,31/590)和畜类制品(4.5%,48/1 074)的检出率高于水产品(1.6%,24/1 488)和蔬菜制品(1.1%,8/748)。分离株以生物1A型(95.5%)和O∶8血清型(42.3%)为主,且分离数与年总分离数呈正相关。所有菌株均缺失4种(ail、ystA、yadA和virF)产毒株标记的毒力基因,76株(68.5%)ystB基因阳性(其中35株属于1A/O∶8/ystB)。分离株对氨苄西林(74.8%)和阿莫西林/克拉维酸(70.3%)的耐药率最高,对头孢西丁不敏感率超过50.0%;未发现三代头孢菌素或氟喹诺酮类抗菌药物耐药株,38.7%(43/111)的菌株为多重耐药。O∶8和O∶5血清型菌株分别存在44和18种PFGE分子型别。结论上海市浦东新区食源性小肠结肠炎耶尔森菌暴露风险以禽类制品和畜类制品为主,优势菌型为1A/O∶8/ystB,虽无典型产毒株特征但仍有潜在致病力。菌株耐药率处于较低水平但存在多重耐药株,PFGE分子型别提示菌株呈高度遗传多样性。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 生鲜食品 耐药 分子型别
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腹泻水貂检出携带耶尔森菌HPI毒力岛的大肠杆菌 被引量：14
8
作者 史秋梅 张艳英 +2 位作者 房海 陈翠珍 刘杰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期857-861,共5页
为了解大肠杆菌引起水貂腹泻的机理,进行了小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因的检测,并对其菌株做毒力试验。用PCR扩增法检测毒力岛基因irp2和fyua,小鼠腹腔注射检测菌株毒力。结果:从3个貂场腹泻病死水貂脏器以及粪便中分离出血清型分别... 为了解大肠杆菌引起水貂腹泻的机理,进行了小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因的检测,并对其菌株做毒力试验。用PCR扩增法检测毒力岛基因irp2和fyua,小鼠腹腔注射检测菌株毒力。结果:从3个貂场腹泻病死水貂脏器以及粪便中分离出血清型分别为O78、O29和O38的大肠杆菌,对3个血清型大肠杆菌进行毒力岛检测,均检出携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp2和fyua。3个血清型O78、O29和O38的大肠杆菌均使小鼠发病死亡。结果表明水貂腹泻是由携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp2和fyua的大肠杆菌引起,该菌对水貂的健康具有潜在的威胁。 展开更多
关键词 腹泻 毒力岛基因irp2和fyua 小肠结肠炎耶尔森菌 水貂
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腹泻仔貉检出携带耶尔森菌HPI毒力岛的大肠杆菌 被引量：13
9
作者 张艳英 史秋梅 +3 位作者 房海 陈翠珍 刘亚君 杨月琳 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期179-182,共4页
目的为了解大肠杆菌引起仔貉腹泻的机理,进行了小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因的检测,并对其菌株作毒力试验。方法用PCR扩增法检测毒力岛基因irp2和fyua,小鼠腹腔注射检测菌株毒力。结果从3个貉场腹泻病死貉脏器以及粪便中分离出血清... 目的为了解大肠杆菌引起仔貉腹泻的机理,进行了小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因的检测,并对其菌株作毒力试验。方法用PCR扩增法检测毒力岛基因irp2和fyua,小鼠腹腔注射检测菌株毒力。结果从3个貉场腹泻病死貉脏器以及粪便中分离出血清型分别为O23和O20的大肠杆菌,对两血清型大肠杆菌进行毒力岛检测,均检出携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp2和fyuA。2个血清型O23、O20大肠杆菌均分别使小鼠发病死亡。结论仔貉腹泻是由携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp2和fyua的大肠杆菌引起,该菌对仔貉的健康具有潜在的威胁。 展开更多
关键词 腹泻 毒力岛基因irp2和fyua 小肠结肠炎耶尔森菌 仔貉
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2004-2005年我国部分地区小肠结肠炎耶尔森菌宿主分布调查 被引量：12
10
作者 曹严华 夏胜利 +5 位作者 顾玲 杨晋川 胡万富 顾峰 王鑫 景怀琦 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期238-240,共3页
目的了解2004-2005年小肠结肠炎耶尔森菌宿主分布情况。方法对从不同宿主样品中分离到的小肠结肠炎耶尔森菌进行生物化学鉴定、血清学分型、毒力基因PCR检测。结果2004-2005年从8种常见动物宿主及食品中共分离到230株小肠结肠炎耶尔森菌... 目的了解2004-2005年小肠结肠炎耶尔森菌宿主分布情况。方法对从不同宿主样品中分离到的小肠结肠炎耶尔森菌进行生物化学鉴定、血清学分型、毒力基因PCR检测。结果2004-2005年从8种常见动物宿主及食品中共分离到230株小肠结肠炎耶尔森菌,35.65%分离自猪,致病性菌株中51.52%来自猪,所占比例最高,而分离自腹泻病人、兔的菌株均为致病性菌株。结论我国小肠结肠炎耶尔森菌宿主分布广泛,猪是最主要的宿主动物。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 宿主 血清型 毒力基因
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河南省2011-2013年小肠结肠炎耶尔森菌监测结果分析 被引量：11
11
作者 穆玉姣 张白帆 +3 位作者 李孟磊 赵嘉咏 景怀琦 夏胜利 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期835-838,共4页
目的了解河南省小肠结肠炎耶尔森菌的宿主分布、血清学及毒力基因情况。方法于2011—2013年采集腹泻病人粪便、各类家禽家畜粪便、苍蝇以及生熟肉制品涂抹标本,共6 057份,采用冷增菌方法进行目的菌分离。对不同宿主样本中分离到的小肠... 目的了解河南省小肠结肠炎耶尔森菌的宿主分布、血清学及毒力基因情况。方法于2011—2013年采集腹泻病人粪便、各类家禽家畜粪便、苍蝇以及生熟肉制品涂抹标本,共6 057份,采用冷增菌方法进行目的菌分离。对不同宿主样本中分离到的小肠结肠炎耶尔森菌进行系统生化鉴定、血清学分型和毒力基因PCR检测。结果 6 057份样本中共分离出288株小肠结肠炎耶尔森菌,检出率为4.75%。所分离的小肠结肠炎耶尔森菌主要血清型是O∶8和O∶5,生物分型以1A为主。O∶3血清型多具有致病性,其中以猪分离株最多。结论河南省小肠结肠炎耶尔森菌在人群和各类动物中均有存在,猪是小肠结肠炎耶尔森菌致病性菌株的主要宿主。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 宿主 血清学分型 毒力因子
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中国小肠结肠炎耶尔森菌分布及分子流行病学特征 被引量：11
12
作者 穆慧 段然 +8 位作者 秦帅 肖萌 贺兆锴 吕东月 汤德铭 杨晋川 景怀琦 詹军 王鑫 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期571-577,共7页
目的通过中国1980-2019年不同地区小肠结肠炎耶尔森菌的病原学与PFGE分子型别特征分析,为小肠结肠炎耶尔森菌病的防控提供依据。方法对中国不同区域,不同来源标本分离到的6 847株小肠结肠炎耶尔森菌,进行血清型别、生化表型、毒力基因... 目的通过中国1980-2019年不同地区小肠结肠炎耶尔森菌的病原学与PFGE分子型别特征分析,为小肠结肠炎耶尔森菌病的防控提供依据。方法对中国不同区域,不同来源标本分离到的6 847株小肠结肠炎耶尔森菌,进行血清型别、生化表型、毒力基因分布研究,对致病性菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析。结果小肠结肠炎耶尔森菌中致病性菌株2 047株、非致病菌4 800株。致病性菌株仅存在两种血清型,O∶3占比88.96%(1 821/2 047)、O∶9占比11.04%(226/2 047)。18个省市自治区的致病株以O∶3血清型为主,宁夏回族自治区以O∶9血清型为主。非致病菌血清型众多,普遍比致病株具有更多的阳性生化反应。1 821株O∶3致病株分为93个PFGE型别,分布于19个省市自治区,其中K6GN11C30021、K6GN11C30012为优势带型(分别占比46.35%、22.5%),75.38%的人源菌株与分离自当地的动物、食品菌株带型一致;226株O∶9致病株共分为14个PFGE型别,分布于8个省市自治区,77.78%人源菌株与分离自当地的动物、食品菌株带型一致。结论我国小肠结肠炎耶尔森菌分布广泛、宿主众多,致病株仅有两个血清型,非致病株血清型众多、可能比致病株具有更强的生化代谢能力与环境适应力。致病性菌株PFGE优势带型相对集中,地域分布广泛,多数人源菌株与分离自当地的动物、食品菌株带型一致,应警惕通过家畜家禽、食品及外环境等多种来源感染人的风险。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 PFGE 血清型 致病菌
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山东省宿主动物中小肠结肠炎耶尔森菌分布状况及毒力研究 被引量：11
13
作者 裴耀文 冯开军 +6 位作者 房玉英 翟文济 王鑫 景怀琦 毕振旺 毕振强 王显军 《医学动物防制》 2011年第2期104-105,109,共3页
目的了解山东省动物宿主中小肠结肠炎耶尔森菌分布及病原学特征。方法对从家畜和家禽宿主中分离到的菌株进行生化鉴定、血清学分型和聚合酶链反应(PCR)检测。结果 2225份标本中共检出72株小肠结肠炎耶尔森菌,检出率为3.24%,包括生物1A... 目的了解山东省动物宿主中小肠结肠炎耶尔森菌分布及病原学特征。方法对从家畜和家禽宿主中分离到的菌株进行生化鉴定、血清学分型和聚合酶链反应(PCR)检测。结果 2225份标本中共检出72株小肠结肠炎耶尔森菌,检出率为3.24%,包括生物1A型和生物4型。其中共检测到13种血清型,从猪的标本中分离到3株致病菌株,占细菌总数的4.17%,仅携带ystB基因的占81.94%。结论本地区动物宿主中普遍存在小肠结肠炎耶尔森菌感染,本地区应进一步加强该菌的监测工作。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 动物宿主 毒力基因 致病性
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断奶仔猪源小肠结肠炎耶尔森氏菌的分离鉴定及其致病性研究 被引量：11
14
作者 关乃瑜 夏爽 +5 位作者 赵丽丽 罗继龙 谷珊珊 崔文 葛俊伟 陈洪岩 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期679-682,共4页
为研究小肠结肠炎耶尔森氏菌（Y．enterocolitica）在断奶仔猪腹泻发生中可能的致病作用，本研究采集黑龙江地区58份断奶仔猪腹泻粪便样品，经细菌分离鉴定，共分离到18株Y.enterocolitica，命名为Y1～Y18；对其6种毒力基因（all、ystA... 为研究小肠结肠炎耶尔森氏菌（Y．enterocolitica）在断奶仔猪腹泻发生中可能的致病作用，本研究采集黑龙江地区58份断奶仔猪腹泻粪便样品，经细菌分离鉴定，共分离到18株Y.enterocolitica，命名为Y1～Y18；对其6种毒力基因（all、ystA、ystB、virF、yadA和册0进行检测，结果显示，其中10株携带ystB基因，3株携带ail基因，其余5株分离株未检测到任何毒力基因。致病性试验结果显示，这些分离株的致病性存在很大差异，含有ail基因的致病性分离株Y7对小鼠和猪均具有致病性，而Y17分离株则无致病性；含有ystB基因的Y11分离株对小鼠具有致病性对猪无致病性，Y18分离株则对小鼠也无致病性；不含毒力基因的分离株Y9和Y16则可以引起小鼠和猪不同程度发病。各分离株除引起腹泻的程度、持续时间和粪便带茵天数不同以外，在肺、后肢关节液、肠系膜淋巴结和小肠内容物中的分离情况也存在差异。本研究结果表明菌株携带毒力基因的情况与其致病性并不具有明确的相关性，并且初步证明Y．enterocolitica在断奶仔猪腹泻发生过程中起到了一定的作用。 展开更多
关键词 断奶仔猪腹泻 小肠结肠炎耶尔森氏菌 毒力基因 致病性
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基于DPO引物特异性检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的PCR方法 被引量：11
15
作者 徐义刚 李丹丹 +2 位作者 刘忠梅 吴岩 李苏龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期507-510,520,共5页
目的 引入一种设计简易、特异性强、退火温度范围宽的双启动寡核苷酸引物（dual-priming oligonucleotide,DPO）设计,建立基于DPO引物特异性检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的PCR方法.方法 以小肠结肠炎耶尔森氏菌16S 23SrRNA基因为靶基因,设... 目的 引入一种设计简易、特异性强、退火温度范围宽的双启动寡核苷酸引物（dual-priming oligonucleotide,DPO）设计,建立基于DPO引物特异性检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的PCR方法.方法 以小肠结肠炎耶尔森氏菌16S 23SrRNA基因为靶基因,设计一对DPO引物,经过PCR反应体系优化,建立小肠结肠炎耶尔森氏菌DPO-PCR检测方法.测定了检测灵敏度,以常规PCR方法作为参照,分析DP＆PCR方法的特异性及退火温度.结果 建立的小肠结肠炎耶尔森氏菌DPO-PCR检测方法的灵敏度为1.43×102 CFU/mL;与常规PCR方法相比,DP＆PCR方法在49～69℃退火温度范围内均能保持高效率扩增;特异性强,所测试17种病原菌中,仅小肠结肠炎耶尔森氏菌为阳性结果,且无非特异性扩增.结论 DPO-PCR方法不需要对引物参数特别是退火温度进行优化,特异性强,为致病微生物的快速准确检测提供了新方法. 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森氏菌 16S-23S RRNA DPO-PCR
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河南省2007-2010年小肠结肠炎耶尔森菌监测分析 被引量：11
16
作者 李孟磊 穆玉娇 +2 位作者 党李成 康凯 夏胜利 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期312-315,共4页
目的监测河南省小肠结肠炎耶尔森菌在腹泻病人和宿主动物中带菌情况,分析其血清学分布及毒力基因情况,探索疾病发生的原因。方法对2007-2010年河南省监测点的标本进行初步鉴定,鉴定后菌株送中国疾病预防控制中心传染病所进行最后鉴定,... 目的监测河南省小肠结肠炎耶尔森菌在腹泻病人和宿主动物中带菌情况,分析其血清学分布及毒力基因情况,探索疾病发生的原因。方法对2007-2010年河南省监测点的标本进行初步鉴定,鉴定后菌株送中国疾病预防控制中心传染病所进行最后鉴定,对部分菌株进行血清分型,并进行ail、ystA、ystB、yadA、verF、rfbC毒力基因检测。结果河南省2007-2010年共监测各类标本8 561份,检出小肠结肠炎耶尔森菌株273株,检出率为3.19%;各年份菌株检出率之间有统计学差异。血清分型中O∶5血清型占比最高(31.63%),其次为O∶8(17.35%),O∶3型占比也较高(11.22%),O∶9则未发现。猪的血清型分布最广,共涉及9个血清型,人的血清型主要为O∶3,O∶8,O∶10。毒力基因测定在病人、猪、牛、犬中检出致病菌株。结论河南省小肠结肠炎耶尔森菌在人群和各类动物中均有存在。人群中流行的血清型与全国流行情况一致。河南省最重要的动物宿主是猪、牛、犬,其在人类感染该病中可能会起到比较重要的作用。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 监测 动物宿主 血清型 毒力基因
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1997-2010年宁夏回族自治区小肠结肠炎耶尔森菌致病性的基因特征 被引量：10
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作者 郝琼 刘翔 +6 位作者 郭邦成 闫立群 谢明英 金东 王鑫 崔志刚 景怀琦 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期886-889,共4页
目的了解宁夏回族自治区小肠结肠炎耶尔森菌主要毒力基因分布情况和致病性小肠结肠炎耶尔森菌分子分型特征。方法于1997--2010年在宁夏回族自治区共分离得到283株小肠结肠炎耶尔森菌，用PCR法分析其黏附侵袭位点基因（ail）、耐热肠毒素... 目的了解宁夏回族自治区小肠结肠炎耶尔森菌主要毒力基因分布情况和致病性小肠结肠炎耶尔森菌分子分型特征。方法于1997--2010年在宁夏回族自治区共分离得到283株小肠结肠炎耶尔森菌，用PCR法分析其黏附侵袭位点基因（ail）、耐热肠毒素A基因（ystA）、ystB、黏附素基因（yadA）、毒力活化因子基因（virF）；应用限制性内切酶NotI酶切致病性小肠结肠炎耶尔森菌染色体DNA进行脉冲场凝胶电泳（PFGE），利用BioNumerics软件进行聚类分析。结果209株O：3、O：9血清型小肠结肠炎耶尔森菌中ail、ystA、yadA、virF毒力基因阳性，ystB为阴性的占97．6％（204／209）；O：8血清型和未开展血清分型的菌株5种毒力基因全部阴性；11株O：5血清型有9株5种毒力基因全部阴性。将致病性菌株进行PFGE分型，根据染色体DNA的NotI酶切图谱，将29株O：3血清型分成12个PFGE带型，包含5株以上的优势PFGE带型有2种。180株O：9血清型菌株分成13个PFGE带型，包含10株以上的优势PFGE带型有4种，各自是从同一地区猪与家鼠、猪与犬、猪与野兔分离。结论宁夏地区O：3、O：9血清型小肠结肠炎耶尔森菌具有致病性，O：3逐步成为如今的优势血清型；O：5、O：8与血清未分型的菌株无致病性。 展开更多
关键词 耶尔森菌 小肠结肠炎 毒力 基因 电泳 凝胶 脉冲场
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小肠结肠炎耶尔森氏菌主要毒力基因分析 被引量：9
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作者 许文炯 丁洁 +2 位作者 陈晓蔚 吴咏梅 王炜 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期675-677,共3页
目的了解南京地区从不同来源分离的小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因的分布情况。方法聚合酶链反应(PCR)技术进行不同血清生物型菌株的毒力基因检测。结果从血清型来看,分离到的9株血清型O:3菌株有7株的基因型分布为ail+,ystA+,ystB-,virF+... 目的了解南京地区从不同来源分离的小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因的分布情况。方法聚合酶链反应(PCR)技术进行不同血清生物型菌株的毒力基因检测。结果从血清型来看,分离到的9株血清型O:3菌株有7株的基因型分布为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。从生物型来看,共分离到致病生物型(3,4)菌株12株,其中9株毒力基因分布特征为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。结论本市小肠结肠炎耶尔森氏菌血清型O:3菌均包含毒力基因,毒力基因主要分布特征为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。所有的致病生物型(3,4)菌株,均包含染色体上的毒力基因ail,毒力基因主要分布特征亦为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。ail与致病生物型之间存在明显关联。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森氏菌 毒力基因 PCR
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我国腹泻病患者和家畜家禽粪便标本中携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌的调查 被引量：6
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作者 程伯鲲 崔树玉 +6 位作者 温宪芹 姜桂香 李连青 刘巧突 赵斌秀 叶长芸 徐建国 《中华流行病学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期130-133,共4页
目的　了解携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌在我国腹泻病患者粪便标本、动物粪便标本及部分食品标本中的存在情况和所致腹泻病的临床特征。方法　使用菌落原位杂交、DNA打点杂交和PCR扩增等方法。结果　在各地送检的从腹... 目的　了解携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌在我国腹泻病患者粪便标本、动物粪便标本及部分食品标本中的存在情况和所致腹泻病的临床特征。方法　使用菌落原位杂交、DNA打点杂交和PCR扩增等方法。结果　在各地送检的从腹泻病患者粪便标本中分离到的、用常规方法不能鉴定的大肠杆菌中 ,均检出带有小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌菌株 ,检出率为 2 7.0 5 % (436 / 16 12 )。从市售食品标本中分离的大肠杆菌中 ,携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌的检出率为 10 .2 3% (9/ 88)。从家畜家禽粪便中分离的大肠杆菌中 ,携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌检出率为 5 .71% (16 / 2 80 )。携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌所致腹泻的典型临床表现为食欲不振、腹痛、寒战乏力、正常体温或低热、每日腹泻多在 6次以上、多为粘液便。结论　携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌在我国分布广泛 ,检出率高于其他几类致泻性大肠杆菌 。 展开更多
关键词 大肠杆菌 耶尔森氏菌 毒力岛 腹泻 HPI
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河南省小肠结肠炎耶尔森菌病原学特征和分子分型研究 被引量：10
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作者 穆玉姣 张白帆 +4 位作者 潘静静 梁俊荣 王鑫 夏胜利 黄学勇 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期180-184,共5页
目的了解2011—2017年河南省小肠结肠炎耶尔森菌的分布情况,分析其病原学特征及致病菌株的同源关系。方法采集腹泻患者粪便、各类家禽家畜粪便、苍蝇以及生熟肉制品涂抹等各类标本12 728份,采用冷增菌方法进行目的菌分离。对分离到的小... 目的了解2011—2017年河南省小肠结肠炎耶尔森菌的分布情况,分析其病原学特征及致病菌株的同源关系。方法采集腹泻患者粪便、各类家禽家畜粪便、苍蝇以及生熟肉制品涂抹等各类标本12 728份,采用冷增菌方法进行目的菌分离。对分离到的小肠结肠炎耶尔森菌进行系统生化鉴定、生物分型、血清分型及毒力基因PCR检测,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型方法对其中的致病性菌株进行基因分型。结果12 728份样本中共分离出390(3.06%)株小肠结肠炎耶尔森菌,其中人源株13株,动物源株377株。菌株分离阳性标本源主要为猪和鸡粪便标本,均为25.13%(98/390)。分离菌株生物分型以1A为主,血清型主要是O∶5和O∶8;毒力基因检测显示21株O∶3血清型菌株具有致病性,其中人源株1株,猪源株20株。致病性菌株经NotⅠ酶切后共分为3种带型,带型相似度为94%~100%。结论河南省小肠结肠炎耶尔森菌在人群和各类动物中均有存在,致病性菌株的主要宿主是猪,且致病株同源性较高。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 血清分型 毒力基因 PFGE 分子分型
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