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肌间刺缺失对斑马鱼骨骼发育的影响 被引量:10
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作者 杨建 佟广香 +4 位作者 郑先虎 孙志鹏 吕伟华 孙效文 匡友谊 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期546-552,共7页
利用斑马鱼(Danio rerio)野生型与肌间刺完全缺失突变型个体,从骨骼染色和骨骼发育相关基因表达两方面,初步评价了肌间刺缺失对斑马鱼骨骼发育的影响。通过骨骼染色对比观察了两种肌间刺表型个体受精后8dpf(days post fertilization, d... 利用斑马鱼(Danio rerio)野生型与肌间刺完全缺失突变型个体,从骨骼染色和骨骼发育相关基因表达两方面,初步评价了肌间刺缺失对斑马鱼骨骼发育的影响。通过骨骼染色对比观察了两种肌间刺表型个体受精后8dpf(days post fertilization, dpf)到56dpf的骨骼发育情况,结果显示,两种肌间刺表型除肌间刺外,其他骨骼发育基本同步。此外,通过qRT-PCR实验检测分析了6个骨骼发育相关基因(bmp2a、bmp4、smad1、smad4a、runx2a和sp7)在不同肌间刺表型5个胚胎发育时期(3hpf囊胚期、6hpf原肠胚期、12hpf体节期、24hpf咽囊期和72hpf孵化期)和5个胚后生长阶段(15、30、45、60和75dpf)的表达情况。结果显示:在胚胎发育时期,野生型和突变型个体中bmp2a、bmp4、smad1、smad4a基因和突变型个体中sp7基因的表达均呈现先升后降的变化趋势,且在体节期达到最高表达水平;野生型和突变型个体中runx2a基因和野生型个体中sp7基因则表现为逐渐上升的趋势。6个基因在囊胚期和原肠胚期表达量无显著差异, bmp2a的表达水平在体节期、咽囊期和孵化期无显著差异,野生型个体bmp4、smad1、smad4a、runx2a基因在体节期、咽囊期和孵化期的表达水平明显高于突变型,而sp7基因则表现为突变型明显高于野生型。胚后发育阶段6个基因在5个生长阶段均呈现逐渐下降的趋势,且在两种肌间刺表型间其表达仅在个别时期差异显著。综上所述,肌间刺的缺失对斑马鱼骨骼发育表现型无显著影响,只在胚胎发育时期影响骨骼相关基因表达水平的变化;结合骨骼染色结果,推测肌间刺缺失对斑马鱼骨骼发育无显著影响。 展开更多
关键词 肌间刺 斑马鱼 野生型 突变型 骨骼发育 骨骼染色
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EGFR-TKI治疗表皮生长因子受体野生型晚期肺腺癌1例并文献复习 被引量:4
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作者 李梦远 华陈 +1 位作者 罗建华 潘君素 《临床与病理杂志》 2019年第12期2886-2889,共4页
报告1例表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)野生型晚期肺腺癌患者的相关临床资料,复习相关文献。患者,女,64岁,不吸烟,因反复头痛1个月于当地医院就诊。胸部CT提示右上肺占位。头颅MR提示脑内多发病灶,考虑转移... 报告1例表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)野生型晚期肺腺癌患者的相关临床资料,复习相关文献。患者,女,64岁,不吸烟,因反复头痛1个月于当地医院就诊。胸部CT提示右上肺占位。头颅MR提示脑内多发病灶,考虑转移。肺穿刺病理提示肺腺癌,血浆表皮生长因子受体野生型。因该患者拒绝放化疗,予埃克替尼靶向治疗,无进展生存期14个月。继发耐药后,组织二代测序示exon20.pT790M突变,予以奥希替尼二线治疗,疗效佳。对于无法获得组织标本或者血浆EGFR检测阴性的不吸烟亚洲女性肺腺癌患者,在放化疗失败或不适宜放化疗的患者中,可尝试EGFR-TKIs靶向治疗,部分患者可从中获益。 展开更多
关键词 靶向治疗 肺腺癌 表皮生长因子受体 野生型
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野生型及突变型survivin基因重组逆转录病毒的构建及表达研究 被引量:1
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作者 杨晓亚 宋建勋 白云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期691-693,共3页
目的 构建含绿色荧光蛋白和野生型及第3 4位氨基酸突变型survivin基因的双顺反子逆转录病毒载体,并进行真核细胞表达。方法 用PCR的方法由含survivin基因的真核表达载体扩增所需目的片段,然后将该片段插入逆转录病毒载体pMIG。酶切鉴... 目的 构建含绿色荧光蛋白和野生型及第3 4位氨基酸突变型survivin基因的双顺反子逆转录病毒载体,并进行真核细胞表达。方法 用PCR的方法由含survivin基因的真核表达载体扩增所需目的片段,然后将该片段插入逆转录病毒载体pMIG。酶切鉴定重组子,脂质体介导下转染包装细胞PhoenixE ,病毒上清感染NIH3T3细胞,RT PCR检测外源基因mRNA的表达、流式细胞仪检测GFP的表达从而确认外源基因的转录。结果 经琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的片段成功的连接到pMIG载体上。载体转染NIH3T3细胞,RT PCR显示目的片段mRNA能够表达,流式细胞仪检测GFP获良好的表达。结论 成功构建了人survivin基因野生型及突变型逆转录病毒,并在NIH3T3细胞进行了表达,为下一步的研究工作提供了有效的分子工具,并且为将来能在体内应用抑制survivin基因表达的肿瘤治疗奠定基础。 展开更多
关键词 SURVIVIN基因 野生型 突变型 逆转录病毒载体
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COL9A2基因野生型与G143C、G884A突变型质粒构建及鉴定 被引量:1
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作者 陈蓉 罗家明 +3 位作者 张微 胡为民 杨健 朱红 《川北医学院学报》 CAS 2018年第5期654-657,共4页
目的:构建IX型胶原α2(collagen type IX alpha 2 chain,COL9A2)基因野生型与G143C、G884A突变型质粒,为进一步研究COL9A2基因功能奠定基础。方法:应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、酶切、连接等技术,将COL9A2基因... 目的:构建IX型胶原α2(collagen type IX alpha 2 chain,COL9A2)基因野生型与G143C、G884A突变型质粒,为进一步研究COL9A2基因功能奠定基础。方法:应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、酶切、连接等技术,将COL9A2基因野生型、携带突变位点G143C与G884A的基因分别插入p UC57空质粒中,基因测序技术进行鉴定。结果:经酶切和基因测序证实COL9A2基因野生型与G143C、G884A突变型分别插入p UC57质粒中。结论:成功构建了p UC57-COL9A2基因野生型、p UC57-p. Gly48Ala和p UC57-p. Gly295Asp突变型质粒。 展开更多
关键词 COL9A2基因 野生型 突变型 构建
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用地高辛标记的核酸探针检测猪伪狂犬病毒野毒感染的研究 被引量:12
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作者 刘志杰 任慧英 +4 位作者 温建新 刘文华 邹玲 韩先杰 魏笑笑 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1621-1624,共4页
利用PCR技术从带有伪狂犬病毒(PRV)gE基因的重组质粒pMD18-T-gE中扩增回收约304 bp大小的片段,并制备出地高辛标记的gE基因核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与重组质粒DNA发生特异性杂交,而与对照的PRV Bartha-k61株疫苗毒DNA、... 利用PCR技术从带有伪狂犬病毒(PRV)gE基因的重组质粒pMD18-T-gE中扩增回收约304 bp大小的片段,并制备出地高辛标记的gE基因核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与重组质粒DNA发生特异性杂交,而与对照的PRV Bartha-k61株疫苗毒DNA、猪细小病毒(PPV)DNA、猪圆环病毒(PCV)DNA、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)cDNA、猪瘟病毒(CSFV)cDNA的杂交反应均为阴性;敏感性检测结果表明,该探针对PRV野毒的最低检出量为4 pg。应用该探针对11份繁殖障碍病料进行了杂交检测,共检出4份阳性病料,该结果与PCR检测结果一致,表明该核酸探针可用于猪伪狂犬病野毒感染的临床诊断。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 GE基因 地高辛标记探针 斑点杂交 野毒株
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H3和IDH野生型弥漫性儿童型高级别胶质瘤6例临床病理分析
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作者 王瑞芬 管雯斌 +3 位作者 严敏骅 琚璐 韩蕙如 王立峰 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期484-489,共6页
目的探讨中枢神经系统H3和IDH野生型弥漫性儿童型高级别胶质瘤的临床病理学及分子特征。方法收集上海交通大学医学院附属新华医院病理科诊断的6例H3和IDH野生型弥漫性儿童型高级别胶质瘤的临床病理资料,采用免疫组化(全自动免疫组化染色... 目的探讨中枢神经系统H3和IDH野生型弥漫性儿童型高级别胶质瘤的临床病理学及分子特征。方法收集上海交通大学医学院附属新华医院病理科诊断的6例H3和IDH野生型弥漫性儿童型高级别胶质瘤的临床病理资料,采用免疫组化(全自动免疫组化染色仪)检测GFAP、Olig2、Syn、NeuN、IDH1、H3K27M等蛋白的表达,FISH法检测EGFR、MYCN基因扩增,Sanger测序检测IDH、H3F3A、TERT基因突变,并复习相关文献。结果本组6例患者年龄范围5~11岁,中位年龄7.5岁。其中男性2例,女性4例,男女比1∶2。临床症状表现为肢体乏力、偏瘫、呕吐、抽搐、视物模糊等。肿瘤发生部位:5例位于幕上,1例位于幕下脑干和小脑。组织学形态:3例表现为高级别胶质瘤形态学特征,其中2例伴有瘤巨细胞;2例表现为胚胎性肿瘤样特征,1例同时具有高级别胶质瘤及胚胎性肿瘤样形态学特点。5例伴有微血管增生和(或)坏死;1例间质黏液变/微囊形成。免疫表型:肿瘤细胞GFAP(6/6)和Olig2(6/6)部分或局灶阳性,Syn(3/6)和NeuN(1/6)局灶或散在阳性,IDH1、H3K27M、H3G34V和H3G34R均阴性,ATRX、H3K27me3、INI1、BRG1均弥漫阳性(6/6)。p53阳性5%~95%不等,Ki67增殖指数40%~90%。分子检测示6例均为IDH1/2和H3F3A野生型;2例MYCN扩增;2例EGFR扩增伴多倍体;1例同时伴有EGFR扩增和MYCN扩增;1例PDGFRA扩增。治疗及随访情况,术后放疗和(或)替莫唑胺化疗;3例于术后1~5个月死亡;2例存活,随访截至2024年1月,分别随访4个月和7个月;1例失访。结论H3和IDH野生型弥漫性儿童型高级别胶质瘤是一种高度恶性肿瘤,组织学表现为胶质母细胞瘤样或胚胎性肿瘤样特征,根据分子遗传学特征分为RTK1、RTK2、MYCN三种分子亚型,其中MYCN亚型预后最差。诊断时应注意与其他儿童型或成人型高级别胶质瘤及胚胎性肿瘤鉴别。 展开更多
关键词 弥漫性儿童型高级别胶质瘤 H3野生型 IDH野生型 鉴别诊断
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野生型桑树内生细菌的多样性分析及ME0717菌株的抑菌活性测定 被引量:6
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作者 胥丽娜 徐亮 +3 位作者 刘宝军 许玉娟 赵春青 刘振宇 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期327-331,共5页
从多年生野生鲁桑的枝条中分离出190株内生细菌,并分析其多样性指数(H)、丰度(D)、均匀度(J),发现在不同发育时间的桑树枝条中,内生细菌的种类、数量和多样性指数明显不同,枝条发育时间越长,越不利于内生菌的生长,而1年生枝条最有利于... 从多年生野生鲁桑的枝条中分离出190株内生细菌,并分析其多样性指数(H)、丰度(D)、均匀度(J),发现在不同发育时间的桑树枝条中,内生细菌的种类、数量和多样性指数明显不同,枝条发育时间越长,越不利于内生菌的生长,而1年生枝条最有利于内生细菌的生长。分离得到1株优势内生细菌,命名为ME0717。经培养性状观察、形态鉴定、染色反应等生化特性测定以及16S rDNA序列分析,鉴定ME0717为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。ME0717菌体和发酵液对桑炭疽病菌(Colletotrichum morifolium Hara.)、桑漆斑病菌(Myrothecium roridum Todeet Fr.)的菌丝生长和孢子萌发均有明显的抑制作用,随着培养时间的延长,菌株的发酵液对两种病原菌的菌丝生长和孢子萌发的抑制作用增强。 展开更多
关键词 野生型鲁桑 内生细菌 多样性 枯草芽孢杆菌 ME0717菌株 抑菌活性
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APP/PS1转基因老年性痴呆模型小鼠肠道甲醛浓度异常升高 被引量:6
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作者 刘开力 赫英舸 +2 位作者 于乐祥 陈瑶 赫荣乔 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1761-1766,共6页
【目的】肠道菌群通过"微生物-肠道-脑轴"影响中枢神经系统的功能,同时也与老年性痴呆的发生发展相关,特别是盲肠内微生物菌群的变化更为显著。肠道菌群可以产生和代谢甲醛,而肠道能够迅速吸收甲醛;体内甲醛含量与老年性痴呆... 【目的】肠道菌群通过"微生物-肠道-脑轴"影响中枢神经系统的功能,同时也与老年性痴呆的发生发展相关,特别是盲肠内微生物菌群的变化更为显著。肠道菌群可以产生和代谢甲醛,而肠道能够迅速吸收甲醛;体内甲醛含量与老年性痴呆病人的认知损害程度呈正相关。因此,本文比较了7月龄APP/PS1转基因老年性痴呆模型小鼠(简称APP/PS1转基因小鼠)与同月龄C57BL/6J野生型小鼠(简称C57BL/6J小鼠)肠道菌群产生甲醛的情况。【方法】取APP/PS1转基因小鼠(n=8)与C57BL/6J小鼠(n=9)的不同肠段(十二指肠、小肠、盲肠、结肠),采用2,4-Dinitrophenylhydrazi zne(DNPH)显色偶联高效液相色谱(HPLC coupled with DNPH)测定肠道消化物和肠壁组织的甲醛。【结果】APP/PS1转基因小鼠盲肠消化物内的甲醛含量,较C57BL/6J小鼠存在显著升高(P=0.036);而两者小肠和结肠消化物甲醛含量无显著差别。在两种小鼠之间,小肠壁内甲醛存在差异(P=0.052),而盲肠和结肠壁甲醛含量无显著差异(P>0.05)。【结论】肠道菌群是小鼠体内甲醛的主要来源之一,无论肠道消化物,还是肠道壁组织均为盲肠的甲醛含量最高。这些结果表明,APP/PS1转基因小鼠肠道菌群存在甲醛代谢失调,从而导致其肠道消化物的甲醛含量升高。 展开更多
关键词 肠道菌群 年龄相关的认知损害 老年性痴呆 甲醛 APP/PS1转基因小鼠 C57BL/6J野生型小鼠
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新型酪氨酸激酶抑制剂HHGV678对Bcr-Abl野生型细胞株和伊马替尼耐药细胞株抑制作用的体外研究 被引量:4
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作者 邱林 王晓丹 +8 位作者 于波海 卢润章 葛芳 王秀丽 陈立君 韩冰虹 展昭民 张伯龙 马军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期1039-1043,共5页
本研究比较新型的酪氨酸激酶抑制剂HHGV678与伊马替尼(imatinib,IM)在体外对Bcr-Abl野生型和IM耐药细胞株的抑制作用,探索HHGV678替代IM治疗CML及IM耐药CML患者的可能性。以Bcr-Abl野生型细胞株(K562和32Dp210)及16种IM耐药细胞株(K562R... 本研究比较新型的酪氨酸激酶抑制剂HHGV678与伊马替尼(imatinib,IM)在体外对Bcr-Abl野生型和IM耐药细胞株的抑制作用,探索HHGV678替代IM治疗CML及IM耐药CML患者的可能性。以Bcr-Abl野生型细胞株(K562和32Dp210)及16种IM耐药细胞株(K562R和15种Bcr-Abl点突变细胞株)为研究对象,用MTT法检测HHGV678和IM对上述细胞的生长抑制作用;以DNA梯形条带法和Annexin-V/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡;应用Western blot检测HHGV678对上述细胞BCR-ABL融合蛋白及酪氨酸激酶磷酸化表达的影响。结果表明:HHGV678呈剂量依赖性显著抑制Bcr-Abl野生型细胞株和除T315I点突变细胞株以外的IM耐药细胞株生长。比较IC50发现,HHGV678在低剂量下(0.01-0.3μmol/L)抑制K562和32Dp210细胞生长的作用比IM分别强15.5和28倍;而对除T315I点突变细胞株以外的15种IM耐药细胞株细胞的生长抑制作用比IM强1.4-124.3倍。HHGV678抑制上述细胞酪氨酸激酶磷酸化的能力均强于IM。更重要的是HHGV678在10.0μmol/L剂量下诱导IM强耐药细胞株K562R和T315I点突变细胞株的凋亡率分别达到40.06%和33.32%,显著高于IM的19.77%和10.68%。结论:新型酪氨酸激酶抑制剂HHGV678对Bcr-Abl野生型细胞株和IM耐药细胞株,尤其是对IM强耐药细胞株的生长抑制作用明显强于IM,但HHGV678能否成为治疗CML和IM耐药CML患者新的靶向药物,仍有待进一步的研究。 展开更多
关键词 酪氨酸激酶抑制剂 HHGV678 bcr—abl野生型细胞株 伊马替尼 伊马替尼耐药细胞株 K562R细胞株 慢性髓系白血病
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IDH野生型胶质母细胞瘤患者预后影响因素分析 被引量:2
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作者 许广智 张佳乐 +2 位作者 伊西才 魏礼洲 刘卫平 《临床神经外科杂志》 2022年第2期130-134,共5页
目的探讨WHOⅣ级IDH野生型胶质母细胞瘤患者预后影响因素。方法回顾性分析97例WHOⅣ级IDH野生型胶质母细胞瘤患者的临床资料,分析临床因素及分子标志物对患者预后的影响。结果单因素及多因素分析显示,在IDH野生型胶质母细胞瘤中,年龄、K... 目的探讨WHOⅣ级IDH野生型胶质母细胞瘤患者预后影响因素。方法回顾性分析97例WHOⅣ级IDH野生型胶质母细胞瘤患者的临床资料,分析临床因素及分子标志物对患者预后的影响。结果单因素及多因素分析显示,在IDH野生型胶质母细胞瘤中,年龄、KPS(Karnofsky功能状态评分标准)评分、肿瘤是否全切、术后是否接受同步的放化疗为独立影响因素(P<0.05),分子标志物中,O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)蛋白表达为独立的预后影响因素(P<0.05),ATRX、P53、Ki-67的蛋白表达以及1p/19q杂合性缺失与预后不相关(P>0.05),并且非参数分析显示IDH突变型的WHOⅣ级成人弥漫性胶质瘤预后好于IDH野生型的WHOⅣ级成人弥漫性胶质瘤。结论在WHOⅣ级IDH野生型胶质母细胞瘤中,年龄,KPS评分,肿瘤是否全切,术后是否接受同步放化疗以及MGMT蛋白表达为有价值的参考指标,并且WHOⅣ级的IDH野生型成人弥漫性胶质瘤的预后比IDH突变型差。 展开更多
关键词 成人弥漫性胶质瘤 IDH野生型胶质母细胞瘤 生存分析 分子标记物
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敲除SLC39A5基因对4-NQO诱发C57BL/6小鼠食管癌模型建立的影响 被引量:2
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作者 王立群 靳晶 +5 位作者 刘聪敏 高肇妤 梁迪 李道娟 郭甜甜 贺宇彤 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2018年第2期61-66,共6页
目的探索敲除SLC39A5基因对4-NQO诱导的C57BL/6小鼠食管癌模型的影响。方法选取10只C57BL/6野生型小鼠作为阴性对照组,饮用浓度为100μg/ml的丙二醇空白溶液;选取140只野生型小鼠与80只SLC39A5基因敲除小鼠,采用饮水法摄入诱癌剂,即浓度... 目的探索敲除SLC39A5基因对4-NQO诱导的C57BL/6小鼠食管癌模型的影响。方法选取10只C57BL/6野生型小鼠作为阴性对照组,饮用浓度为100μg/ml的丙二醇空白溶液;选取140只野生型小鼠与80只SLC39A5基因敲除小鼠,采用饮水法摄入诱癌剂,即浓度为100μg/ml的4-NQO(4-nitroquinoline 1-oxide),实验时间为28周,实验结束后处死三组小鼠。结果阴性对照组小鼠、野生型小鼠和SLC39A5基因敲除小鼠在实验结束时其存活率分别为100%、92.96%、91.25%;三组小鼠食管癌诱癌成功率分别为0、61.36%、28.77%,两实验组小鼠诱癌成功率差异有统计学意义(χ2=19.98,P<0.001)。结论成功建立了C57BL/6小鼠及SLC39A5基因敲除小鼠的食管癌模型,同时验证了SLC39A5基因在食管癌发生发展中的促进作用。 展开更多
关键词 4-硝基喹啉-N-氧化物(4-NQO) 食管癌 SLC39A5基因敲除小鼠 C57BL/6野生型小鼠
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High-dose radiation associated with improved survival in IDH-wildtype lowgrade glioma 被引量:1
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作者 Shuai Liu Yanwei Liu +3 位作者 Guanzhang Li Jin Feng Li Chen Xiaoguang Qiu 《Chinese Neurosurgical Journal》 CSCD 2021年第2期126-130,共5页
Background:As molecular advances have deepened the knowledge on low-grade glioma(LGG),we investigated the effect of higher radiation dose on the survival of IDH-wildtype(IDHwt)LGG.Methods:In the current study,52 IDHwt... Background:As molecular advances have deepened the knowledge on low-grade glioma(LGG),we investigated the effect of higher radiation dose on the survival of IDH-wildtype(IDHwt)LGG.Methods:In the current study,52 IDHwt LGG patients who received radiotherapy were enrolled from the Chinese Glioma Genome Atlas dataset.Radiation doses>54 Gy were defined as high-dose,whereas doses≤54 Gy were defined as low-dose.We performed univariate and multivariate survival analyses to examine the prognostic role of high-dose radiotherapy.Results:In total,the radiation dose ranged from 48.6 Gy to 61.2 Gy,with a median of 55.8 Gy,and 31 patients were grouped into high-dose radiation.Univariate survival analysis indicated that high-dose radiotherapy(p=0.015),tumors located in the frontal lobe(p=0.009),and pathology of astrocytoma(p=0.037)were significantly prognostic factors for overall survival.In multivariate survival analysis,high-dose radiotherapy(p=0.028)and tumors located in the frontal lobe(p=0.016)were independently associated with better overall survival.Conclusions:In conclusion,high-dose radiotherapy independently improved the survival of IDHwt LGG.This can guide treatments for glioma with known molecular characteristics. 展开更多
关键词 Radiation dose IDH-wildtype Low-grade glioma SURVIVAL
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突变型与野生型TNF-α诱导肿瘤细胞的凋亡 被引量:1
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作者 李瑶琛 程碧珍 李康生 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2005年第24期2237-2240,共4页
目的比较重组人突变型471rhTNF-α(mt471rhTNF-α)与野生型rhTNF-α(wt rhTNF-α)诱导肿瘤细胞发生凋亡的能力,并对mt471rhTNF-α诱导肿瘤细胞发生凋亡的作用机制进行初步研究.方法以乳腺癌细胞系ZR75-1细胞为靶细胞,应用基因组DNA琼脂... 目的比较重组人突变型471rhTNF-α(mt471rhTNF-α)与野生型rhTNF-α(wt rhTNF-α)诱导肿瘤细胞发生凋亡的能力,并对mt471rhTNF-α诱导肿瘤细胞发生凋亡的作用机制进行初步研究.方法以乳腺癌细胞系ZR75-1细胞为靶细胞,应用基因组DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞技术分析mt471rhTNF-α与wt rhTNF-α诱导肿瘤细胞凋亡的情况;利用以ELISA为基础的Trans AMTM NF-κB p65试剂盒检测经mt471rhTNF-α或wt rhTNF-α处理的ZR75-1细胞核因子NF-κB的活化情况,以便对其诱导凋亡的机制进行初步的研究.结果20g/L琼脂糖凝胶电泳显示,mt471rhTNF-α处理组的ZR75-1细胞基因组DNA呈现明显的ladder状分布,wtrhTNF-α处理组的“ladder”条带明显减弱;流式细胞仪分析显示,mt471rhTNF-α诱导的细胞凋亡峰面积高于wt rhTNF-α处理组.NF-κB活化检测结果显示,当两型rhTNF-α浓度增高到50μg/L时,wt rhTNF-α处理组的NF-κB的活化量明显高于同浓度的mt471rhTNF-α处理组(P=0.002).结论mt471rhTNF-α诱导肿瘤细胞凋亡的能力明显优于wt rhTNF-α;肿瘤细胞内NF-κB活化明显受抑是mt471rhTNF-α诱导凋亡能力增强的主要原因之一. 展开更多
关键词 肿瘤 突变型471 RHTNF-Α 野生型rhTNF—α NF—kB 细胞凋亡
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噬菌体M_(13)DNA的制备与鉴定
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作者 张明 顾庆礼 《苏州医学院学报》 1992年第3期176-178,254,共3页
报道扩增和制备M_(13)DNA(野生型)的改良技术,其中,RF DNA 的得率为5μg/ml 培养液,ssDNA 的得率为0.2gg/ml 培养液,可以用作DNA-指纹法的探针。
关键词 M13DNA DNA指纹法 探针 噬菌体
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