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人Vigilin基因5＇端EcoRI片段的克隆及限制性酶切图谱分析 被引量：1
1
作者 曾星 Pl.,G 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1996年第1期1-4,共4页
为了解人基因组Ｖｉｇｉｌｉｎ基因结构和探讨Ｖｉｇｉｌｉｎ蛋白的功能，在人基因组Ｖｉｇｉｌｉｎ基因全长克隆的基础上，在５＇端ＥｃｏＲＩ片段亚克隆（Ｖｉｇ－ＣＧ５－７Ｅ），并从１３个限制性核酸内切酶中选出６种对亚克隆ＤＮ... 为了解人基因组Ｖｉｇｉｌｉｎ基因结构和探讨Ｖｉｇｉｌｉｎ蛋白的功能，在人基因组Ｖｉｇｉｌｉｎ基因全长克隆的基础上，在５＇端ＥｃｏＲＩ片段亚克隆（Ｖｉｇ－ＣＧ５－７Ｅ），并从１３个限制性核酸内切酶中选出６种对亚克隆ＤＮＡ进行部分酶切和分子杂交，组建了克隆Ｖｉｇ－ＣＧ５－７ＥＤＮＡ的详细限制性酶切图谱，从而为克隆Ｖｉｇｉｌｉｎ基因的转录调控序列提供合适的酶切位点。 展开更多
关键词 vigilin基因 基因结构 核酸限制内切酶 克隆
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人vigilin基因全长编码区的分段克隆及鉴定 被引量：3
2
作者 杨文理 武静 +2 位作者 谢晓砚 魏玲 覃扬 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期877-881,共5页
目的为了探讨全长VIGILIN、VIGILIN的N端、VIGILIN的C端以及不同KH组合的功能,采取5分段扩增的策略克隆全长vigilin基因。方法根据vigilin基因全长编码区内的限制性核酸内切酶位点,将vigilin基因全长编码区分为5段。从意外死亡健康成人... 目的为了探讨全长VIGILIN、VIGILIN的N端、VIGILIN的C端以及不同KH组合的功能,采取5分段扩增的策略克隆全长vigilin基因。方法根据vigilin基因全长编码区内的限制性核酸内切酶位点,将vigilin基因全长编码区分为5段。从意外死亡健康成人肝组织中提取总RNA,RT-PCR分段扩增目的基因,克隆至pUC118载体,测序,并亚克隆至pUC118载体,对接头部位测序。结果获得8个大小不同的人vigilin基因编码区片段和全长编码区。重组全长vigilin质粒pC118/vigilin(12+345)经测序,与GenBank上登陆的人vigilin cDNA(NM:005336)序列完全一致。结论用分段克隆的方法成功获得了人vigilin基因的全长编码区。 展开更多
关键词 vigilin基因 分段扩增 克隆
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人vigilin基因5'端调控区域的研究 被引量：1
3
作者 曾星 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第4期385-390,共6页
在克隆了人基因组全长ｖｉｇｉｌｉｎ基因的基础上，对其５端转录调控区域再克隆，获得Ｖｉｇ－ＣＧ５－７Ｅ克隆，再用限制酶ＡｐａⅠ和ＥｃｏＲⅠ切除３端约４ｋｂ部分，得到Ｖｉｇ－ＣＧ５－７Ｅ３ＡＥ克隆，并对该克隆进行双向... 在克隆了人基因组全长ｖｉｇｉｌｉｎ基因的基础上，对其５端转录调控区域再克隆，获得Ｖｉｇ－ＣＧ５－７Ｅ克隆，再用限制酶ＡｐａⅠ和ＥｃｏＲⅠ切除３端约４ｋｂ部分，得到Ｖｉｇ－ＣＧ５－７Ｅ３ＡＥ克隆，并对该克隆进行双向测序分析．结果表明：克隆Ｖｉｇ－ＣＧ５－７Ｅ用ＡｐａⅠ酶消化后，用ｃＤＮＡ上游开始的２０个碱基组成的寡聚核苷酸做探针进行分子杂交，可见一条小于０．１ｋｂ杂交带，根据物理图谱分析，位于Ｖｉｇ－ＣＧ５－７Ｅ３ＡＥ克隆的ＡｐａⅠ端，从而推断该克隆含有转录调控元件，５端序列分析得到二个ＴＡＴＡ盒，一个ＣＡＡＴ盒和一个ＧＣ盒以及二个可能的Ａｐ－１和Ａｐ－２结合位点． 展开更多
关键词 人 vigilin基因 调控序列 分子遗传学
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