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遗传重配获得H5N1流感病毒Vero细胞适应株 被引量：2
1
作者 沈娟 孙明波 +5 位作者 马磊 宋绍辉 李卫东 姜述德 杨净思 廖国阳 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期119-121,共3页
目的以传统遗传重配技术选育HSN1流感病毒Veto细胞适应株，制备Vero细胞H5N1流感疫苗。方法以流感病毒Vero细胞适应株A／Yunnan／1／2005Va（H3N2）为母株与反向遗传学技术改造的禽流感病毒疫苗株A／Anhui／1／2005（H5N1）共同感染SPF... 目的以传统遗传重配技术选育HSN1流感病毒Veto细胞适应株，制备Vero细胞H5N1流感疫苗。方法以流感病毒Vero细胞适应株A／Yunnan／1／2005Va（H3N2）为母株与反向遗传学技术改造的禽流感病毒疫苗株A／Anhui／1／2005（H5N1）共同感染SPF鸡胚和Vero细胞，用羊抗A／Yunnan／1／2005Va（H3N2）抗体筛选，血抑试验和基因测序鉴定病毒型别，并进行重配株的其他相关生物学试验。结果获得了1株在Vero细胞高产的H5N1流感病毒，重配前后的单价灭活疫苗免疫小鼠抗体血清效价差异无统计学意义（F=0．857，P〉0．05）。结论通过流感病毒Vero细胞适应株与流行株的重配和抗体筛选，可以获得H5N1流感病毒Vero细胞适应株。 展开更多
关键词 流感病毒A型 重组 遗传 VERO细胞
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Vero细胞HCP试剂盒的稳定性观察 被引量：1
2
作者 张月兰 马可 +6 位作者 赵玉秀 张晋梁 宏阳 马乐 牛志彬 赵硕 王辉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第12期1216-1218,共3页
目的观察Vero细胞HCP试剂盒的稳定性。方法将Vero细胞HCP试剂盒分别于2～8℃和37℃放置不同时间,检测试剂盒的灵敏度、特异性、准确性及精密性。结果试剂盒在2～8℃放置10个月的特异性及灵敏度均较好;检测参考品的回收率在91.7%～114.8... 目的观察Vero细胞HCP试剂盒的稳定性。方法将Vero细胞HCP试剂盒分别于2～8℃和37℃放置不同时间,检测试剂盒的灵敏度、特异性、准确性及精密性。结果试剂盒在2～8℃放置10个月的特异性及灵敏度均较好;检测参考品的回收率在91.7%～114.8%之间;对不同制品检测结果的变异系数均小于10%。37℃放置7d,试剂盒的灵敏度仍可达12.5ng/ml;放置10d,检测参考品的回收率在85%～115%之间;对不同制品检测结果的变异系数均小于10%。结论Vero细胞HCP试剂盒于2～8℃放置10个月及37℃放置7d的稳定性较好,仍可正常使用。 展开更多
关键词 VERO细胞 HCP ELISA试剂盒 稳定性
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父方否决细胞对小鼠半相合干细胞移植模型移植物抗宿主病的预防作用
3
作者 王三斌 郭坤元 +1 位作者 胡灯明 尹波 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期79-81,共3页
目的探讨父方否决细胞对小鼠半相合干细胞移植模型移植物抗宿主病(GVHD)是否起预防作用。方法以B6CF1(H-2b/d)作为半相合干细胞移植的受鼠,给予9.0Gy全身照射后4h,单纯照射组经尾静脉注射0.3mlD-Hank's液,不进行细胞移植;对照组经... 目的探讨父方否决细胞对小鼠半相合干细胞移植模型移植物抗宿主病(GVHD)是否起预防作用。方法以B6CF1(H-2b/d)作为半相合干细胞移植的受鼠,给予9.0Gy全身照射后4h,单纯照射组经尾静脉注射0.3mlD-Hank's液,不进行细胞移植;对照组经尾静脉注射C57BL/6小鼠混合细胞悬液(4.5×106骨髓细胞+3.0×107脾细胞),但不进行其他治疗处理;实验组于移植4d后经尾静脉注射BALB/c小鼠脾细胞悬液(数量分别为5.0×106、1.0×107),然后观察其造血恢复、植入及移植物抗宿主病(GVHD)的情况。结果由于没有给予GVHD防治措施,对照组受鼠GVHD的发生率和死亡率分别为10/10和10/10;而1/6量否决细胞组小鼠GVHD的发生率为5/10,30d生存率增加至5/10(P<0.01),5只因GVHD死亡的受鼠中位生存期为20d,较对照组(中位生存期14d)有显著性差异(P<0.05);1/3量否决细胞组小鼠GVHD的发生率为2/10,30d生存率增加至8/10,中位生存期延长至30d以上(P<0.05)。结论半相合干细胞移植后输注父方否决细胞,可以诱导特异性免疫耐受,显著降低半相合干细胞移植GVHD的发生率。 展开更多
关键词 否决细胞 半相合干细胞移植 移植物抗宿主病
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汉坦病毒Vero细胞灭活疫苗候选毒种筛选 被引量：4
4
作者 姚苹苹 徐芳 +4 位作者 朱函坪 翁景清 陆群英 谢荣辉 朱智勇 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期208-209,共2页
目的将肾综合征出血热疫苗后备筛选毒株适应于Vero细胞，并对其抗原性和免疫原性进行研究。方法将新分离的4株汉坦病毒接种敏感动物，在乳沙鼠脑内连续传代。比较脑内病毒抗原的含量以及乳鼠的发病情况；在Vero细胞中传代，比较培养液... 目的将肾综合征出血热疫苗后备筛选毒株适应于Vero细胞，并对其抗原性和免疫原性进行研究。方法将新分离的4株汉坦病毒接种敏感动物，在乳沙鼠脑内连续传代。比较脑内病毒抗原的含量以及乳鼠的发病情况；在Vero细胞中传代，比较培养液中的病毒滴度和抗原滴度以及细胞的病变情况；利用筛选出的毒株研制Veto细胞灭活疫苗。研究疫苗的免疫原性。结果4株病毒经乳沙鼠脑内传代，鼠脑悬液的病毒滴度和抗原滴度分别达7．00～7．75LgCCID50／ml和1：3201：1280；4株毒株经Vero细胞连续传5代，培养液病毒滴度和抗原滴度分别达6．50～7．50LgCID50／ml和1：160～1：768；疫苗免疫家兔2针后，其中出血热病毒株Z34与ZJ5株疫苗免疫血清对同型毒株的中和效价达到1：10。结论ZJ4与ZJ5两毒株已适应于Vero细胞，且具有病毒滴度高和免疫原性良好的特性，适合用作Vero细胞肾综合征出血热疫苗理想的候选毒株。 展开更多
关键词 汉坦病毒 细胞培养 Vero细胞灭活疫苗 毒种筛选
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H1N1亚型猪流感病毒血凝素基因的克隆与表达
5
作者 马祥 顾万军 +2 位作者 刘镇明 黄良宗 彭启明 《动物医学进展》 CSCD 2006年第8期73-76,共4页
应用RT-PCR方法扩增了1株H1N1亚型猪流感病毒的血凝素基因,并克隆到pMD 18-T Simple载体中,经PCR、酶切和测序验证克隆正确后,亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了重组质粒pcDNA-HA。在脂质体作用下重组质粒pcDNA-HA转染Vero细胞... 应用RT-PCR方法扩增了1株H1N1亚型猪流感病毒的血凝素基因,并克隆到pMD 18-T Simple载体中,经PCR、酶切和测序验证克隆正确后,亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了重组质粒pcDNA-HA。在脂质体作用下重组质粒pcDNA-HA转染Vero细胞。间接免疫荧光试验结果表明,血凝素基因在Vero细胞中成功进行了瞬时表达,这为猪流感病毒DNA疫苗的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪流感病毒 血凝素基因 克隆 表 达 VERO细胞
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门脉注射异基因脾细胞诱导免疫耐受机制的研究
6
作者 张永法 张楠伟 杉浦喜久弥 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期27-31,共5页
本实验检查了门脉注射异基因脾细胞后，受体鼠耐受的诱导及其可能的机制。结果表明，门脉注射２×１０￣７个异基因脾细胞可以诱导供体特异性混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）及细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）耐受。接受异基因脾细胞门脉注... 本实验检查了门脉注射异基因脾细胞后，受体鼠耐受的诱导及其可能的机制。结果表明，门脉注射２×１０￣７个异基因脾细胞可以诱导供体特异性混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）及细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）耐受。接受异基因脾细胞门脉注射的受体鼠肝脏淋巴细胞可以非特异性地抑制ＭＬＲ，但却抑制供体特异性ＣＴＬ的产生，以ａ－Ｈ－２Ｋ￣ｂ单克隆抗体清除其中的供体细胞可以完全清除对供体特异性ＣＴＬ产生的抑制，但只能部分地（５Ｏ％左右）清除其对ＭＬＲ的非特异性抑制作用，这一结果肯定了“Ｖｅｔｏ”细胞及供体细胞中自然抑制活性在门脉耐受诱导中的作用。此外还观察到ＣＤ８￣＋脾细胞是抑制供体特异性ＣＴＬ产生的主要细胞。 展开更多
关键词 器官移植 门脉 细胞毒 T淋巴细胞 自然抑制活性
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轮状病毒基因重配LH9株(G4型)传代稳定性研究 被引量：3
7
作者 包红 胡广宏 +2 位作者 陈汉泉 寇桂英 周旭 《微生物学免疫学进展》 2009年第3期21-23,共3页
对兰州生物制品研究所自行构建的轮状病毒基因重配株G4型LH9株在Vero细胞中传代的稳定性进行研究。将基因重配LH9毒株接种于Vero细胞上从7代传至17代,经电镜检查、病毒滴度测定、病毒基因组RNA电泳图谱分析、基因序列测定分析、轮状病... 对兰州生物制品研究所自行构建的轮状病毒基因重配株G4型LH9株在Vero细胞中传代的稳定性进行研究。将基因重配LH9毒株接种于Vero细胞上从7代传至17代,经电镜检查、病毒滴度测定、病毒基因组RNA电泳图谱分析、基因序列测定分析、轮状病毒型别鉴定及其它相关检定,结果均符合药典要求。证实该毒株为A群G4P〔12〕型轮状病毒,在Vero细胞传代中具有良好的稳定性,为疫苗研制提供安全有效的依据。 展开更多
关键词 轮状病毒基因重配株 稳定性 VERO细胞
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狂犬病毒CTN-1株在Vero细胞中持续感染的特性研究 被引量：2
8
作者 郭金华 肖万海 +1 位作者 潘丽静 蒋茨蕾 《中国热带医学》 CAS 2006年第2期220-222,共3页
目的 观察以Veto细胞大规模生产狂犬病毒时的细胞生长和病毒感染特性。方法 以分种和混种方法，经过不同培养时间，测定Vem细胞的生长状况和胞内外病毒含量。结果 细胞形态随接种病毒时间的长短有所变化，不同接种方法在病毒滴度也无显... 目的 观察以Veto细胞大规模生产狂犬病毒时的细胞生长和病毒感染特性。方法 以分种和混种方法，经过不同培养时间，测定Vem细胞的生长状况和胞内外病毒含量。结果 细胞形态随接种病毒时间的长短有所变化，不同接种方法在病毒滴度也无显著性差异。培养上清夜病毒含量以第4～9d滴度最高，细胞病毒感染率在第4d达80％以上，第10d后开始下降，第15d降入低谷。结论 以0．01～0．10MOI的加毒比例，培养第4，9d收获效果最佳。 展开更多
关键词 狂犬病毒 生长特性 VERO细胞
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流行性乙型脑炎疫苗基础免疫血清学效果的Meta分析 被引量：6
9
作者 尹遵栋 罗会明 +4 位作者 李艺星 李军宏 宁桂军 随海田 梁晓峰 《中国疫苗和免疫》 CAS 2009年第6期501-506,共6页
目的汇总、比较不同流行性乙型脑炎(乙脑)疫苗(Japanese Encephalitis Vaccine,JEV)基础免疫后抗体阳转率,评价血清学效果。方法电子检索《中国医院知识库》、《万方全文数据库》和西文生物医学期刊文献数据库,将研究JEV基础免疫后血清... 目的汇总、比较不同流行性乙型脑炎(乙脑)疫苗(Japanese Encephalitis Vaccine,JEV)基础免疫后抗体阳转率,评价血清学效果。方法电子检索《中国医院知识库》、《万方全文数据库》和西文生物医学期刊文献数据库,将研究JEV基础免疫后血清学效果的随机对照试验和非随机对照试验的文献全部纳入分析,用RevMan4.2.10软件进行统计分析。结果共纳入12篇文献,7篇有对照组。乙脑减毒活疫苗(JEV,Attenuated Live;JEV-L)、乙脑灭活疫苗(非洲绿猴肾细胞)[JEV,Inactivated(Vero Cell),JEV-I(Vero)]和乙脑灭活疫苗(原代地鼠肾细胞)[JEV-I(Primary Hamster Kidney Cell),JEV-I(PHK)]基础免疫后,抗体阳转率分别为86%[95%可信区间(ConfidenceInterval,CI):80%～91%]、83%(95%CI:72%～94%)和64%(95%CI:58%～69%)。3种疫苗基础免疫抗体阳转率两两比较,JEV-I(Vero)基础免疫后的抗体阳转率显著高于JEV-I(PHK),其他两两比较抗体阳转率的差异无统计学意义。结论JEV-L和JEV-I(Vero)基础免疫后血清学效果要高于JEV-I(PHK)。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎减毒活疫苗 流行性乙型脑炎灭活疫苗(非洲绿猴肾细胞) 流行性乙型脑炎灭活疫苗(原代地鼠肾细胞) 血清学效果 META分析
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VERO细胞狂犬病疫苗免疫效果的观察 被引量：1
10
作者 郭金华 潘丽静 蒋茨蕾 《中国热带医学》 CAS 2006年第3期400-401,共2页
目的比较氢氧化铝佐剂和无佐剂Vero细胞狂犬病疫苗免疫效果的影响。方法以常规免疫程序用氢氧化铝佐剂与无佐剂两种疫苗分别免疫豚鼠。并分别于3、7、14、30、60、90、180和360d采血并以小鼠中和法测定不同时间抗体水平。结果氢氧化铝... 目的比较氢氧化铝佐剂和无佐剂Vero细胞狂犬病疫苗免疫效果的影响。方法以常规免疫程序用氢氧化铝佐剂与无佐剂两种疫苗分别免疫豚鼠。并分别于3、7、14、30、60、90、180和360d采血并以小鼠中和法测定不同时间抗体水平。结果氢氧化铝佐剂组和无佐剂组,抗体出现时间不一致,无佐剂组稍早,阳转率于第3d已为5．0％,而佐剂组为0,两组于第60d皆达到100．0％；抗体水平两组也稍有差别,无佐剂组较高,但比较差异无显著性,在第60d达到高峰,第90d逐渐下降。结论初步显示,无佐剂Vero细胞狂犬疫苗免疫效果较佐剂组稍好。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 佐剂 免疫效果
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