我国部分省区鸡传染性法氏囊病病毒的分子流行病学研究 被引量：27

1

作者 阳秀英 韦平 +6 位作者 黄志永 磨美兰 韦天超 李康然 韦住奉 赖家宏 朱学勤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期581-588,共8页

应用RT-PCR技术,对2000-2006年间收集于广西、江苏、浙江、安徽、海南的临床疑似传染性法氏囊病病鸡的法氏囊、脾脏和骨髓样品进行检测,对检测呈阳性的病料采用9～11日龄的鸡胚通过绒毛尿囊膜或鸡胚成纤维细胞接种的方法进行鸡传染性法... 应用RT-PCR技术,对2000-2006年间收集于广西、江苏、浙江、安徽、海南的临床疑似传染性法氏囊病病鸡的法氏囊、脾脏和骨髓样品进行检测,对检测呈阳性的病料采用9～11日龄的鸡胚通过绒毛尿囊膜或鸡胚成纤维细胞接种的方法进行鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的分离和传代,结果成功分离到23株IBDV;设计针对IB-DVVP2基因高变区(用vVP2表示)的引物对这些分离株及5株常用的中等毒力商品疫苗株进行RT-PCR扩增并对其进行酶切分析和核苷酸序列测定,分析比较23个分离株与参考毒株的vVP2的序列并绘制遗传系谱树。结果表明BH09、BH11、JS1、JS7、YY1、YY6、YL051、050222、TSC-2(9)、TZ(3)、HN0602共11个分离株属于超强毒株,与已发表的vvIBDV其它中国分离株、日本分离株OKYM、欧洲分离株DV86和UK661的亲源关系均较近;040124、YL052、020180、YLZF2、040131、BH15、YY2、050045、050057、050258、TSC-1(3)、A038共12株属于经典毒株,其中040124、YL052 2株属于中等偏强毒力疫苗株,其余10株则属于弱毒疫苗株。本研究的结果表明,近6年来在我国5个省区养鸡业中流行的IBDV主要为vvIBDV毒株,而且所有分离株VP2基因高变区均缺乏明显的时间和地域的遗传特征。 展开更多

关键词 RT-PCR 限制性内切酶分析技术 超强毒株 经典毒株 变异株 VP2基因高变区 分子流行病学

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鸡传染性法氏囊病超强毒LX株的分离鉴定 被引量：16

2

作者 刘爵 刘尚高 周蛟 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2000年第5期13-15,共3页

从一免疫失败鸡场中分离到 1株鸡传染性法氏囊病野毒株 ,命名为 LX株。经血清学、鸡胚接种、病毒形态、外源病毒 (CAA、NDV和 IBV)排除试验等证实该分离物为纯净的 IBDV。人工感染试验表明 ,该L X株接种 8周龄 SPF鸡后第 2天鸡只精神沉... 从一免疫失败鸡场中分离到 1株鸡传染性法氏囊病野毒株 ,命名为 LX株。经血清学、鸡胚接种、病毒形态、外源病毒 (CAA、NDV和 IBV)排除试验等证实该分离物为纯净的 IBDV。人工感染试验表明 ,该L X株接种 8周龄 SPF鸡后第 2天鸡只精神沉郁 ,拉白色或绿色粪便 ,发病率为 10 0 % ,第 3～ 4天出现死亡高峰 ,而后很少引起死亡 ,死亡率达 92 .3% ,剖检可见全身性出血素质 ,法氏囊呈“紫葡萄样”外观 ,脾脏肿大 ,胸腺萎缩 ,骨髓脂肪化 ,肝脏稍见脂肪变等病变 ,表现了超强毒株的特点。接种鸡胚后 72～ 96 h引起鸡胚几乎全部死亡的规律性死亡特征。从而表明 ,该 L X分离株为 IBDV超强毒 。 展开更多

关键词 鸡传染性法氏囊病 分离 鉴定 超强毒株

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传染性法氏囊病病毒YL051、YL052的分离及其VP2基因高变区序列的比较分析 被引量：16

3

作者 阳秀英 韦平 +4 位作者 周祥 磨美兰 韦天超 李康然 朱学勤 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2006年第2期101-106,共6页

应用鸡胚绒毛尿囊膜接种的方法，从一个疑患传染性法氏囊病的鸡群中分离到2株传染性法氏囊病病毒（IBDV）（分别命名为YL051和YL052）；利用反转录-聚合酶链式反应技术扩增分离株VP2基因的高变区序列，并采用限制性内切酶分析技术和核... 应用鸡胚绒毛尿囊膜接种的方法，从一个疑患传染性法氏囊病的鸡群中分离到2株传染性法氏囊病病毒（IBDV）（分别命名为YL051和YL052）；利用反转录-聚合酶链式反应技术扩增分离株VP2基因的高变区序列，并采用限制性内切酶分析技术和核苷酸序列测定技术，对分离株进行致病型鉴定及其基因差异的分析。结果表明：分离株YL051属IBDV的超强毒株（vvIBDV），而YL052株既具有强毒株的特征即七肽区（SWSASGS）和279D，但同时也具有284T的弱毒株特征，可能属于介于强毒株与弱毒株之间的一个中间型。与国内外参考毒株的序列比较分析发现：YL051与其他vvIBDV的核苷酸同源性达94％～97％；YL052则与经典毒株STC、疫苗株B87的核苷酸同源性均为94．3％。 展开更多

关键词 传染性法氏囊病病毒 超强毒株 经典毒株 VP2基因高变区 序列分析

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2000～2007年广西鸡传染性法氏囊病病毒的分子流行病学 被引量：17

4

作者 何秀苗 韦平 +2 位作者 官丁明 阳秀英 秦爱建 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期437-444,共8页

应用逆转录酶-聚合酶链式反应（reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR）技术,对2000-2007年间收集于南宁、玉林、北海和梧州4个广西主要养禽地区的临床疑似传染性法氏囊病（infectious bursal dis-ease,IBD）病鸡的... 应用逆转录酶-聚合酶链式反应（reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR）技术,对2000-2007年间收集于南宁、玉林、北海和梧州4个广西主要养禽地区的临床疑似传染性法氏囊病（infectious bursal dis-ease,IBD）病鸡的法氏囊组织进行检测,检测呈阳性的病料通过9d龄鸡胚的绒毛尿囊膜（chorio-allantoic mem-brane,CAM）接种的方法进行鸡传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus,IBDV）的分离和传代,然后设计针对病毒VP2基因高变区（vVP2）的引物对分离株进行RT-PCR扩增并对其进行核苷酸序列测定,与参考毒株的相应序列及其关键位点进行分析比较并绘制遗传进化树。结果成功分离到27株IBDV,其中BH09、BH11、TZ（3）、050222、YL051、NN0603、NN0611和QX0602等17个分离株（占62.96%）可能为超强毒（very virulent IB-DV,vvIBDV）,与其它已发表的vvIBDV毒株的序列同源性较高,在遗传进化树上可分成3个分支，与常用疫苗株的亲缘关系则较远；NN040124和YL052属中等偏强毒力株，与经典毒力株52～70和STC的亲缘关系较近；YLZF2、040131等8株属于弱毒株，与经典毒力株CU1具有较高的同源性。本研究的结果表明，近7年来在广西全区的鸡中流行的主要为vvIBDV毒株，各地毒株来源复杂，部分IBDV的抗原性可能已经发生漂变。 展开更多

关键词 RT-PCR 超强毒株 经典毒株 VP2基因高变区 分子流行病学

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广西地区传染性囊病病毒超强毒株的分离鉴定及其VP2基因高变区的序列分析 被引量：8

5

作者 何秀苗 官丁明 +3 位作者 韦平 禤金彩 屈祖平 秦爱建 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第9期7-9,共3页

研究通过鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）接种、琼脂扩散试验、致细胞病变和RT-PCR等方法，成功从广西疑似病鸡的腔上囊组织中获得了8个传染性囊病病毒（IBDV）毒株，分离株可致攻毒鸡发病率100％，死亡率60％～90％；分子特征上，8个分离株VP2... 研究通过鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）接种、琼脂扩散试验、致细胞病变和RT-PCR等方法，成功从广西疑似病鸡的腔上囊组织中获得了8个传染性囊病病毒（IBDV）毒株，分离株可致攻毒鸡发病率100％，死亡率60％～90％；分子特征上，8个分离株VP2高变区在酶切位点和特征性氨基酸上均属于vvIBDV的特征。同源性分析表明，8个分离株之间在核苷酸和氨基酸上的同源性分别为96．8％～99．1％和95．9％～99．3％，与其他参考vvIBDV毒株的同源性分别为94％～97．7％和92．5％～97．3％，而与常用疫苗株Bursine-2、B87（in），变异株GLS，经典强毒株的同源性仅有90％左右。遗传进化树上，8个分离株与国内外参考vvIBDV同处于一个大分支，与疫苗株和经典强毒株的距离较远，8个分离株与中国内地毒株SD1／97的亲缘关系最近。研究表明，广西仍然存在vvIBDV的流行。 展开更多

关键词 传染性囊病 超强毒株 RT—PCR VP2基因高变区

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鸡传染性法氏囊病一个自然病例的病原分离及其分子特征分析 被引量：4

6

作者 何秀苗 官丁明 +1 位作者 韦平 秦爱建 《中国家禽》 北大核心 2009年第14期18-22,共5页

设计针对传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因高变区(vVP2)的引物对湖南永州送检的一群疑似传染性法氏囊病病例的法氏囊组织通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术进行检测,应用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)接种的方法对阳性样品进行病毒分离,同时... 设计针对传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因高变区(vVP2)的引物对湖南永州送检的一群疑似传染性法氏囊病病例的法氏囊组织通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术进行检测,应用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)接种的方法对阳性样品进行病毒分离,同时对IBDV分离株中的vVP2进行限制性内切酶分析和核苷酸序列测定,分析关键位点的氨基酸特征和同源性,绘制遗传进化树。结果成功分离出了4个IBDV毒株,其中HuN0801、HuN0802和HuN0803的特征性位点的氨基酸为222A、249Q、254G、256I、279D、284A、294I和299S,属于vvIDBV的特征,并与vvIBDV参考株具有较高的同源性;HuN0804的则为222P、249Q、254G、256V、279N、284T、294I和299N,符合弱毒株的特征,与弱毒参考株的同源性较高;4个分离株与常用疫苗株的同源性普遍较低。遗传进化分析表明,3个vvIBDV分离株与vvIBDV参考株和中等偏强毒力株YSLMB同处于一个大的分支,并与欧洲株DV86、湖南株HuN亲缘关系最近;而HuN0804与弱毒株、经典毒株和常用疫苗株同处于一个大分支。研究表明,本病例中存在不同致病型IBDV毒株的混合感染。 展开更多

关键词 传染性法氏囊病 超强毒株 弱毒株 RT-PCR VP2基因高变区 分子特征

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鸡传染性法氏囊病毒超强毒株的分离及生物学特性鉴定 被引量：5

7

作者 邱冬 贾华强 +1 位作者 邢丽娟 崔尚金 《中国动物检疫》 CAS 2003年第2期23-24,共2页

用SPF鸡及鸡胚 ,从吉林某鸡场病死鸡的法氏囊组织中分离到一株超强毒株 (J20株 )。此病毒不能凝集鸡的红细胞 ,可以被IBDV标准阳性血清检出IBDV抗原。通过对J2001分离毒株进行回归实验 ,测定病毒效价EID50 达106/0.2ml,发病率为100 % ,... 用SPF鸡及鸡胚 ,从吉林某鸡场病死鸡的法氏囊组织中分离到一株超强毒株 (J20株 )。此病毒不能凝集鸡的红细胞 ,可以被IBDV标准阳性血清检出IBDV抗原。通过对J2001分离毒株进行回归实验 ,测定病毒效价EID50 达106/0.2ml,发病率为100 % ,死亡率达70% ;病毒理化特性试验 ,电镜观察等证实J20株为鸡传染性法氏囊病超强毒株。 展开更多

关键词 鸡 传染性法氏囊病毒 超强毒株 生物学特性 分离鉴定

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IBDVvp2基因高变区序列测定与进化分析 被引量：3

8

作者 闫笑 李天宪 +2 位作者 范兆军 寇铮 陈绳亮 《中国病毒学》 CSCD 2004年第6期620-623,共4页

本实验采用来源于江苏地区的六株不同鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)毒株,应用 RT-PCR 法对 vp2 基因高变区进行了扩增,构建重组质粒 pMD18T- vp2,测序。与有代表性的 IBDV 毒株 VP2 基因高变区序列进行... 本实验采用来源于江苏地区的六株不同鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)毒株,应用 RT-PCR 法对 vp2 基因高变区进行了扩增,构建重组质粒 pMD18T- vp2,测序。与有代表性的 IBDV 毒株 VP2 基因高变区序列进行比较分析,以 ClustalX 软件进行序列比对,得到基因序列及氨基酸序列同源性,IBDVY3、P2G、P8G、SZ、Y5 和 W04(6 株)IBDV 与 D6984(荷兰)的同源性达到 99.0%以上,与其它一些超强毒株(very virulent IBDV,vvIBDV)的同源性也达到了 97.8%以上,并在关键氨基酸位点符合 vvIBDV 特征,采用Phylip3.5 软件分析作出进化树,其结果从分子水平说明六个毒株均为 vvIBDV,与欧洲和日本的超强毒株有较近的亲缘关系,而与美洲株的较远,从而为 IBDV 分子流行病学研究和疫苗的研制提供了科学依据。 展开更多

关键词 鸡传染性法氏囊病病毒(ibdv) VP2基因 高变区 超强毒株

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鸡传染性法氏囊病病毒福建株的分离与初步鉴定 被引量：3

9

作者 俞伏松 《现代农业科技》 2009年第11期218-219,221,共3页

从临床表现胸腿肌出血、法氏囊肿大出血为主要特征的病死鸡肝脾和法氏囊中分离到1株病毒(IBDV-FJ)。结果表明,该分离病毒无血凝性,在琼脂扩散试验中能与抗IBDV特异性血清出现1条清晰的白色沉淀线;人工感染28日龄雏鸡出现与临床一致的病... 从临床表现胸腿肌出血、法氏囊肿大出血为主要特征的病死鸡肝脾和法氏囊中分离到1株病毒(IBDV-FJ)。结果表明,该分离病毒无血凝性,在琼脂扩散试验中能与抗IBDV特异性血清出现1条清晰的白色沉淀线;人工感染28日龄雏鸡出现与临床一致的病变,并回收到病毒;应用针对IBDV VP3基因的特异性引物进行RT-PCR,能扩增到长度为1 041bp的特异性目的片段;序列分析发现分离毒VP3基因与IBDV超强毒和经典毒株的核苷酸同源性分别为97.7%～98.2%和95.2%。初步鉴定该分离毒为鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株。 展开更多

关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 超强毒株 分离 鉴定

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传染性法氏囊病病毒广西流行毒株的分离鉴定及其遗传进化分析 被引量：2

10

作者 何秀苗 官丁明 +3 位作者 韦平 禤金彩 屈祖平 秦爱建 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期650-653,659,共5页

为了解传染性法氏囊病病毒(IBDV)广西流行株的遗传变异规律,本研究通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)接种的方法对2006年～2007年间采集自广西各鸡场的疑似传染性法氏囊病(IBD)的病料进行病毒分离,设计针对VP2高变区(vVP2)的引物对分离物通过RT-... 为了解传染性法氏囊病病毒(IBDV)广西流行株的遗传变异规律,本研究通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)接种的方法对2006年～2007年间采集自广西各鸡场的疑似传染性法氏囊病(IBD)的病料进行病毒分离,设计针对VP2高变区(vVP2)的引物对分离物通过RT-PCR进行鉴定及序列分析。共分离出9个IBDV毒株,其ELD50在105/0.2mL～106.5/0.2mL之间。分离株vVP2序列通过具有分型意义的酶切位点和关键位点氨基酸分析,证实9个分离株均属于vvIBDV。同源性分析表明,9个分离株之间在核苷酸和氨基酸的同源性分别为97.2%～100%和95.2%～100%,与vvIBDV参考株同源性分别为93.8%～98.2%和92.4%～98.6%,而与常用疫苗株Bursine-2、B87(in),变异株GLS,经典毒株,中等偏强毒力株YL052的同源性仅有90%左右。遗传进化分析发现,分离株与vvIBDV参考株同处于1个大分支,与DV86和OKYM株的亲缘关系最近,与2000年～2005年间广西分离的vvIBDV株距离较远,它们之间形成了明显的分群。研究表明,近2年来广西仍然存在vvIBDV的流行。 展开更多

关键词 传染性法氏囊病 广西流行株 超强毒株 RT-PCR VP2基因高变区

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低聚异麦芽糖对IBD中等毒力活疫苗免疫增强作用的研究 被引量：1

11

作者 刘文利 高崧 《中国家禽》 北大核心 2004年第z1期52-56,共5页

选用两种在山东省普遍使用的中等毒力IBD疫苗,将试验分成12组,分别在12日龄和19日龄两次免疫商品鸡,同时在11日龄时用低聚异麦芽糖饮水,连用7天,二免后13天人工接种vvIBDV,连续观察14天。根据血清学检测指标,囊指数,BBIX值,病理组织学检... 选用两种在山东省普遍使用的中等毒力IBD疫苗,将试验分成12组,分别在12日龄和19日龄两次免疫商品鸡,同时在11日龄时用低聚异麦芽糖饮水,连用7天,二免后13天人工接种vvIBDV,连续观察14天。根据血清学检测指标,囊指数,BBIX值,病理组织学检查,临床保护率和病理保护率结果,都充分表明低聚异麦芽糖对传染性法氏囊病中等毒力疫苗具有显著的免疫增强作用,而且对提高法氏囊等免疫器官的保护作用及疫苗对其损伤后的修复作用也有显著效果。 展开更多

关键词 低聚异麦芽糖 鸡传染性法氏囊病中等毒力疫苗 VVibdv 保护率

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复合中草药提取物对IBD中等毒力活疫苗免疫增强作用的研究 被引量：1

12

作者 刘文利 赵德明 《中国兽药杂志》 2008年第11期9-15,共7页

选用两种在山东省普遍使用的中等毒力IBD活疫苗,将240只试验用商品鸡分成12组,分别在12日龄和19日龄两次免疫,同时在11日龄时用复合中草药提取物饮水,连用7 d,二免后13 d人工接种vvIBDV,连续观察14 d。结果表明,无论从抗体水平、囊指数... 选用两种在山东省普遍使用的中等毒力IBD活疫苗,将240只试验用商品鸡分成12组,分别在12日龄和19日龄两次免疫,同时在11日龄时用复合中草药提取物饮水,连用7 d,二免后13 d人工接种vvIBDV,连续观察14 d。结果表明,无论从抗体水平、囊指数、BBIX值、B淋巴细胞EAC花环形成率、T淋巴细胞ANAE阳性率、红细胞(RBC)免疫黏附功能,还是从病理组织学检查、临床保护率、病理保护率等指标来看,都充分表明该复合中草药提取物对中等毒力IBD活疫苗具有显著的免疫增强作用,而且对提高法氏囊等免疫器官的保护作用及疫苗对其损伤后的修复作用也有显著效果。 展开更多

关键词 复合中草药提取物 中等毒力IBD活疫苗 VVibdv 保护率

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传染性法氏囊病病毒NN1107广西株的分离鉴定及遗传进化分析 被引量：1

13

作者 李军 陶立 +5 位作者 兰美益 陈泽祥 韦志锋 秦若甫 彭昊 杨威 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第4期63-67,共5页

为研究从广西南宁市某鸡场疑似患传染性法氏囊病的鸡群中分离鉴定出的一株传染性法氏囊病病毒NN1107株的分子特征,通过反转录-聚合酶链反应特异扩增后进行克隆、序列分析。NN1107株VP2基因高变区(vVP2)的克隆测序和序列比较结果显示,序... 为研究从广西南宁市某鸡场疑似患传染性法氏囊病的鸡群中分离鉴定出的一株传染性法氏囊病病毒NN1107株的分子特征,通过反转录-聚合酶链反应特异扩增后进行克隆、序列分析。NN1107株VP2基因高变区(vVP2)的克隆测序和序列比较结果显示,序列符合超强毒传染性法氏囊病病毒(vvIBDV)的分子特征;其与广西vvIBDV毒株的核苷酸同源性在96%～99.6%之间。根据vVP2核苷酸序列同源性绘制的遗传进化树结果显示,NN1107株属于vvIBDV毒株群,与2004年、2005年、2007年和2010年流行毒株BH09、NNTZ(3)、NN07122、HP1001的亲缘关系最近,与疫苗株B87(in)、Bursine-2、FW2512株的亲缘关系较远。 展开更多

关键词 传染性法氏囊病病毒 超强毒株 VP2基因高变区 遗传进化

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应用复合中草药提取物对IBD中等毒力活疫苗免疫增强作用的研究 被引量：4

14

作者 刘文利 赵德明 《动物医学进展》 CSCD 2008年第9期35-41,共7页

选用两种在山东省普遍使用的中等毒力IBD活疫苗,将240只试验用商品鸡随机分成12组,分别在12日龄和19日龄两次免疫,同时在11日龄时用复合中草药提取物饮水,连用7 d,二免后13 d人工接种vvIBDV,连续观察14 d。结果表明,无论从抗体水平、囊... 选用两种在山东省普遍使用的中等毒力IBD活疫苗,将240只试验用商品鸡随机分成12组,分别在12日龄和19日龄两次免疫,同时在11日龄时用复合中草药提取物饮水,连用7 d,二免后13 d人工接种vvIBDV,连续观察14 d。结果表明,无论从抗体水平、囊指数、BBIX值、B淋巴细胞EAC花环形成率、T淋巴细胞α-醋酸萘酯酶素(ANAE)阳性率、红细胞(RBC)免疫黏附功能,还是从病理组织学检查、临床保护率、病理保护率等指标来看,都充分表明该复合中草药提取物对中等毒力IBD活疫苗具有显著的免疫增强作用,而且对提高法氏囊等免疫器官的保护作用及疫苗对其损伤后的修复作用也有显著效果。 展开更多

关键词 复合中草药提取物 中等毒力IBD活疫苗 ibdv超强毒 保护率

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