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Cook球囊联合米索前列醇在足月妊娠初产妇引产中的应用效果及对VASA评分的影响 被引量:15
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作者 邓茂芳 李奕莲 《河北医学》 CAS 2019年第10期1671-1674,共4页
目的:探究Cook球囊联合米索前列醇(Misoprostol,Mis)在足月妊娠初产妇引产中的应用效果及对视觉模拟焦虑评分尺(VASA)的影响。方法:将2015年2月至2017年5月收治的420例初产妇采用简单随机抽样分联合组和Mis组,各210例。记录产妇诱发有... 目的:探究Cook球囊联合米索前列醇(Misoprostol,Mis)在足月妊娠初产妇引产中的应用效果及对视觉模拟焦虑评分尺(VASA)的影响。方法:将2015年2月至2017年5月收治的420例初产妇采用简单随机抽样分联合组和Mis组,各210例。记录产妇诱发有效宫缩时间及产程时间、宫颈成熟度(干预12hBishop评分)及引产效果、分娩方式、围生儿并发症、产妇不良反应情况,并于临产时、分娩结束时、分娩后2h时评估产妇焦虑状态(VASA)。结果:联合组诱发有效宫缩时间及产程时间、剖宫产率均低于Mis组(P<0.05)。联合组干预12h时Bishop评分及引产效果均高于Mis组(P<0.05)。但两组围生儿并发症及产妇不良反应情况无统计学差异(P>0.05)。联合组临产时、分娩结束时、分娩后2h时VASA评分均低于Mis组(P<0.05)。结论:Cook双腔球囊联合Mis应用于足月妊娠初产妇引产中安全且有效,能使产妇获得更好的分娩体验,于改善分娩情绪也有利。 展开更多
关键词 足月妊娠 引产 Cook球囊 Bishop vasa
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Contrast-enhanced ultrasound imaging of the vasa vasorum of carotid artery plaque 被引量:12
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作者 Ze-Zhou Song Yan-Ming Zhang 《World Journal of Radiology》 CAS 2015年第6期131-133,共3页
The vasa vasorum of carotid artery plaque is a novel marker of accurately evaluating the vulnerability of carotid artery plaque, which was associated with symptomatic cerebrovascular and cardiovascular disease. The pr... The vasa vasorum of carotid artery plaque is a novel marker of accurately evaluating the vulnerability of carotid artery plaque, which was associated with symptomatic cerebrovascular and cardiovascular disease. The presence of ultrasound contrast agents in carotid artery plaque represents the presence of the vasa vasorum in carotid artery plaque because the ultrasoundcontrast agents are strict intravascular tracers. Therefore, contrast-enhanced ultrasound(CEUS) is a novel and safe imaging modality for evaluating the vasa vasorum in carotid artery plaque. However, there are some issues that needs to be assessed to embody fully the clinical utility of the vasa vasorum in carotid artery plaque with CEUS. 展开更多
关键词 vasa vasorum CAROTID ARTERY PLAQUE VULNERABILITY CONTRAST-ENHANCED ultrasound
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Differential expression of VASA gene in ejaculated spermatozoa from normozoospermic men and patients with oligozoospermia 被引量:12
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作者 Xin Guo Yao-Ting Gui +3 位作者 Ai-Fa Tang Li-Hua Lu Xin Gao Zhi-Ming Cai 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2007年第3期339-344,共6页
Aim: To detect the expression of VASA in human ejaculated spermatozoa, and to compare the expression of VASA between normozoospermic men and patients with oligozoospermia. Methods: Ejaculated spermatozoa were collec... Aim: To detect the expression of VASA in human ejaculated spermatozoa, and to compare the expression of VASA between normozoospermic men and patients with oligozoospermia. Methods: Ejaculated spermatozoa were collected from normozoospermic men and patients with oligozoospermia by masturbation, and subsequently segregated through a discontinuous gradient of Percoll to obtain the spermatozoa. Reverse transcription polymerase chain reaction (RT- PCR), quantitative RT-PCR (QRT-PCR), immunoflurescence and Western blotting were used to detect the expression of VASA in mRNA and protein levels. Results: VASA mRNA was expressed in the ejaculated spermatozoa. QRT-PCR analysis showed that VASA mRNA level was approximately 5-fold higher in normozoospermic men than that in oligozoospermic men. Immunofluorescence and Western blotting analysis showed that VASA protein was located on the cytoplasmic membrane of heads and tails of spermatozoa, and its expression was significantly decreased in oligozoospermic men, which is similar to the result of QRT-PCR. Conclusion: The expression of VASA mRNA and protein was significantly decreased in the sperm of oligozoospermic men, which suggested the lower expression of the VASA gene might be associated with pathogenesis in some subtypes of male infertility and VASA could be used as a molecular marker for the diagnosis of male infertility. 展开更多
关键词 vasa ejaculated spermatozoa OLIGOZOOSPERMIA male infertility SPERMATOGENESIS
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vasa基因研究进展 被引量:9
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作者 陈玉冬 邹志华 +1 位作者 王艺磊 张子平 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期173-180,共8页
DEAD-box家族基因编码一类ATP依赖的RNA解旋酶。经系统进化分析可将该家族蛋白分为VASA、PL10和p68三个亚家族。其中,vasa基因最先在果蝇(Drosophila melanogaster)中被发现,在许多动物中都已经克隆得到其同源基因,研究显示,vasa基因在... DEAD-box家族基因编码一类ATP依赖的RNA解旋酶。经系统进化分析可将该家族蛋白分为VASA、PL10和p68三个亚家族。其中,vasa基因最先在果蝇(Drosophila melanogaster)中被发现,在许多动物中都已经克隆得到其同源基因,研究显示,vasa基因在生殖细胞系中特异性表达,在许多生物中为生殖细胞形成和配子发生所需。有趣的是在果蝇中VASA蛋白是生殖质的组成部分,而在斑马鱼(Danio rerio)中vasa mRNA才是生殖质的组成部分。本文主要综述了vasa基因及其蛋白的结构、功能、表达和作为原生殖细胞分子标记物的应用等方面的内容,并展望了其研究前景。 展开更多
关键词 vasa vasa蛋白 DEAD-BOX 生殖细胞 配子发生
原文传递
vasa基因编码蛋白的结构特征和应用展望 被引量:5
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作者 周倩如 邵明瑜 张志峰 《海洋湖沼通报》 CSCD 北大核心 2007年第4期129-134,共6页
vasa基因编码的蛋白是DEAD-box家族的一种RNA解旋酶,该基因最先在果蝇中发现,其同源基因在许多动物中都已经克隆得到,vasa基因在生殖细胞系中特异性表达,研究显示其在配子发生和胚胎发育过程中发挥重要作用。本文重点介绍其编码蛋白的... vasa基因编码的蛋白是DEAD-box家族的一种RNA解旋酶,该基因最先在果蝇中发现,其同源基因在许多动物中都已经克隆得到,vasa基因在生殖细胞系中特异性表达,研究显示其在配子发生和胚胎发育过程中发挥重要作用。本文重点介绍其编码蛋白的结构特征和应用展望。 展开更多
关键词 vasa vasa蛋白 DEAD-BOX 原生殖细胞 生殖系
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刺参vasa-like基因克隆及其在组织中的表达分析 被引量:5
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作者 隋娟 张志峰 +1 位作者 邵明瑜 胡景杰 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期407-413,共7页
vasa基因编码DEAD-box家族成员中一种ATP依赖的RNA解旋酶,在生殖系分化过程中发挥着重要的作用。本研究采用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术(RACE),从刺参(Apostichopus japonicus)精巢中克隆得到vasa的全长cDNA序列。该cDNA序列全长216... vasa基因编码DEAD-box家族成员中一种ATP依赖的RNA解旋酶,在生殖系分化过程中发挥着重要的作用。本研究采用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术(RACE),从刺参(Apostichopus japonicus)精巢中克隆得到vasa的全长cDNA序列。该cDNA序列全长2167bp,开放阅读框1593bp,编码530个氨基酸,具有DEAD-box家族蛋白的全部9个保守域。经同源比对和系统进化分析,确定其属于DEAD-box家族的VASA亚家族成员。利用半定量RT-PCR检测,vasa mRNA专一性的在刺参性腺中表达,据此,刺参vasa基因有望用于其生殖系起源和分化的研究。 展开更多
关键词 刺参 vasa 全长CDNA 序列分析 组织表达
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半滑舌鳎Vasa基因cDNA克隆及其在繁殖周期的表达 被引量:7
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作者 张远青 温海深 +6 位作者 何峰 李吉方 史丹 胡健 刘淼 母伟杰 马瑞芹 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期1-8,共8页
通过简并引物和RACE技术分离得到了半滑舌鳎Vasa基因的cDNA序列,其全长为2 602 bp,编码包含722个氨基酸残基的蛋白质。半滑舌鳎Vasa在N末端含有5个RGG重复和10个RG重复,具备DEAD-box家族特有的8个保守基序,与东方蓝旗鲔的同源性最高(91%... 通过简并引物和RACE技术分离得到了半滑舌鳎Vasa基因的cDNA序列,其全长为2 602 bp,编码包含722个氨基酸残基的蛋白质。半滑舌鳎Vasa在N末端含有5个RGG重复和10个RG重复,具备DEAD-box家族特有的8个保守基序,与东方蓝旗鲔的同源性最高(91%)。利用RT-PCR技术研究了csVasa在性成熟半滑舌鳎中的表达模式。组织分布研究发现,Vasa在半滑舌鳎的卵巢和精巢中表达丰富,心脏中有微量表达;繁殖周期中,卵巢中Vasa的表达量在初级卵黄期和囊泡期要明显高于核周期和退化吸收期;精巢中,Vasa在精子细胞增殖期的表达量要显著高于精子成熟期和精母细胞增殖期。结果表明,Vasa可能在半滑舌鳎的配子发生中起重要作用。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 vasa 基因克隆 MRNA表达 繁殖周期
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黑脊倒刺鲃vasa同源基因的克隆及表达分析 被引量:7
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作者 唐良华 苏敏 +4 位作者 吕博彦 詹冰津 池丽影 祝玲 周琼 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期868-878,共11页
为了从分子水平上研究鱼类生殖细胞发育的机制,首次从重要的经济养殖鱼类——黑脊倒刺鲃中克隆了斑马鱼vasa的同源基因ScVHG。该cDNA长1962bp,编码654个氨基酸,氨基酸序列中含有DEAD蛋白家族特有的9个保守结构域。经比对发现,其编码的... 为了从分子水平上研究鱼类生殖细胞发育的机制,首次从重要的经济养殖鱼类——黑脊倒刺鲃中克隆了斑马鱼vasa的同源基因ScVHG。该cDNA长1962bp,编码654个氨基酸,氨基酸序列中含有DEAD蛋白家族特有的9个保守结构域。经比对发现,其编码的蛋白序列与斑马鱼VASA蛋白等具有高度的同源性,与斑马鱼、罗非鱼、虹鳟、银鲫、黄鳝、金鱼、金枪鱼、草鱼的VASA蛋白相似度分别为77%,77%,79%,90%,74%,89%,79%和86%。RT-PCR结果显示:在成鱼不同的组织中,ScVHG仅在精巢和卵巢中表达。RNA原位杂交结果进一步表明:在精子发生中,ScVHG只在精原细胞中表达,而在后期的精母细胞、精子细胞中均未发现明显的表达;在卵子发生中,ScVHG在卵原细胞和卵母细胞的各个时相中均有表达,在卵原细胞中表达最为强烈,而在随后各时相的卵母细胞中,阳性信号逐渐减弱。研究认为,该基因中含有的保守序列、序列的相似性以及该基因在生殖细胞中的特异性表达等结果均表明,克隆得到的ScVHG是斑马鱼vasa的同源基因,此基因可作为一种有效的分子标记,用于黑脊倒刺鲃以及其他鱼类生殖细胞发育机制的研究。 展开更多
关键词 黑脊倒刺鲃 vasa 原位杂交 生殖细胞
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拟穴青蟹vasa基因cDNA的特征分析与性腺特异表达 被引量:7
9
作者 张凤英 马凌波 +2 位作者 蒋科技 张丹 陈立侨 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2010年第4期361-367,共7页
vasa蛋白属于DEAD家族蛋白,是一种RNA解旋酶,在生殖细胞的分化中具有重要作用。本研究从拟穴青蟹卵巢中克隆得到vasa基因cDNA全长(将其命名为Sp-vasa),Sp-vasa序列长度为2 944 bp,其中开放阅读框(ORF)长度为1 899 bp,编码632个氨基酸,具... vasa蛋白属于DEAD家族蛋白,是一种RNA解旋酶,在生殖细胞的分化中具有重要作用。本研究从拟穴青蟹卵巢中克隆得到vasa基因cDNA全长(将其命名为Sp-vasa),Sp-vasa序列长度为2 944 bp,其中开放阅读框(ORF)长度为1 899 bp,编码632个氨基酸,具有DEAD-box家族蛋白的7个高度保守的结构域。半定量RT-PCR结果显示,Sp-vasa只在卵巢和精巢中特异表达,在其它组织则未检测到表达。由此可见,vasa属于拟穴青蟹性腺特异表达基因。因此,Sp-vasa基因可有望作为有效的分子指标研究拟穴青蟹原始生殖细胞的起源、迁移以及生殖腺的发生。 展开更多
关键词 拟穴青蟹 vasa 克隆 性腺
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Cloning,characterization,and expression analysis of the DEAD-box family genes,Fc-vasa and Fc-PL10a,in Chinese shrimp (Fenneropenaeus chinensis) 被引量:8
10
作者 周倩如 邵明瑜 +2 位作者 秦贞奎 康庆浩 张志峰 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2010年第1期37-45,共9页
RNA helicases of the DEAD-box and related families are involved in various cellular processes including DNA replication, DNA repair, and RNA processing. However, the function of DEAD-box proteins in aquaculture specie... RNA helicases of the DEAD-box and related families are involved in various cellular processes including DNA replication, DNA repair, and RNA processing. However, the function of DEAD-box proteins in aquaculture species is poorly understood at molecular level. We obtained the full-length cDNA sequences of two genes encoding helicase-related proteins, Fc-vasa and Fc-PL10a, from the testes of Chinese shrimp, Fenneropenaeus chinensis. The two predicted amino acid sequences contain all the conserved motifs characterized by the DEAD-box family and several RGG repeats in the N-terminal regions. Homology and phylogenetic analyses indicate that they belong to the vasa and PLIO subfamilies. The three-dimensional structures of the two proteins were predicted with a homology modeling approach. Both core proteins consist of two tandem RecA-like domains similar to those of the DEAD-box RNA helicase. Using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and real-time PCR we found that Fc-vasa was expressed specifically in the adult gonads. Transcription decreased in the ovary but increased in the testis during gonadal development. Fc-PL10a expression was widely distributed in the tissues we examined. Using in situ hybridization, we demonstrated that the Fc-vasa transcript is localized to the cytoplasm of the spermatogonia and oocytes. Thus, our results suggest that Fc-wasa plays an important role in germ-line development, and has utility as a germ cell lineage marker which will help to generate new insight into the origin and differentiation of germ cells as well as the regulation of reproduction in F. chinensis. 展开更多
关键词 DEAD-BOX Fenneropenaeus chinensis GERM-LINE vasa PL10
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银鲫种系细胞标记分子Vasa:cDNA克隆及其抗体制备(英文) 被引量:4
11
作者 徐红艳 彭金霞 +1 位作者 桂建芳 洪云汉 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第4期732-742,共11页
种系细胞始自胚胎发育早期,是动物生殖及生殖工程的基础。为研究鱼类的种系细胞提供标记分子,我们克隆并鉴定了银鲫的vasacDNA即Cagvasa。CagvasacDNA全长2771碱基(nt),编码的蛋白为银鲫Vasa即CagVasa,全长701个氨基酸(aa)。CagVasa蛋... 种系细胞始自胚胎发育早期,是动物生殖及生殖工程的基础。为研究鱼类的种系细胞提供标记分子,我们克隆并鉴定了银鲫的vasacDNA即Cagvasa。CagvasacDNA全长2771碱基(nt),编码的蛋白为银鲫Vasa即CagVasa,全长701个氨基酸(aa)。CagVasa蛋白与已知Vasa蛋白的结构特征一致:在N端有14个RGG重复序列,在C端Vasa所特有的8个功能域俱全。银鲫Vasa与鲤鱼、斑马鱼、陆生脊椎动物和果蝇的Vasa蛋白分别有95%,89%,61%-66%和50%的同源性。卵巢切片的RNA原位杂交揭示,Cagvasa限于种系细胞,且表达水平呈现出低-高-低的动态变化:即两头低(卵原细胞跟Ⅳ期成熟卵子),中间高(Ⅱ-Ⅲ期卵子)。为分析鱼类种系细胞提供手段,我们用310aa的N端序列产生细菌的重组蛋白来免疫大白兔,获得了抗Vasa的多克隆抗体αVasa。Western免疫印迹表明,αVasa特异性地识别一个鱼类性腺的蛋白,该蛋白的分子量为75kD,仅见于银鲫的性腺和卵子。卵巢切片的组织免疫荧光共聚焦显微分析表明,抗体αVasa只对种系细胞染色:卵原细胞着色最深,卵母细胞和早期的卵子都浓染,成熟卵则浅染。类似情况亦见之于精子发生早期阶段的雄性种系细胞。卵巢和精巢的体细胞则不着色。因此,Cagvasa编码的当是Vasa同源蛋白,为银鲫种系细胞的第一个标记分子。我们的研究表明,抗体αVasa染色灵敏度高,特异性好。 展开更多
关键词 银鲫 种系细胞 卵巢 精巢 vasa CDNA克隆 细胞标记 抗体制备 分子量 种系
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Velamentous Cord Insertion: Interest of Antenatal Diagnosis and Review of the Literature
12
作者 Karam Harou Aboubacar Sidiki Sidibe +1 位作者 Hicham Abdelkhalki Abderaouf Soummani 《Open Journal of Obstetrics and Gynecology》 2024年第2期234-239,共6页
Velamentous insertion of the umbilical cord corresponds to the insertion of the cord directly on amniotic membranes. It is a rare situation whose frequency varies from 0.5% to 1.69% of single pregnancies. It must be d... Velamentous insertion of the umbilical cord corresponds to the insertion of the cord directly on amniotic membranes. It is a rare situation whose frequency varies from 0.5% to 1.69% of single pregnancies. It must be diagnosed during the morphological ultrasound of the 2nd trimester, actively looking for the association with a vasa previa, due to the risk of fetal haemorrhagic threat. We report an antenatal diagnosis of velamentous cord insertion and its management with literature review. 展开更多
关键词 Velamentous Cord Insertion vasa Previa Antenatal Diagnosis Ultrasound Doppler Benckiser’s Hemorrhage
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中华鳖vasa基因克隆及在卵母细胞中的表达分析 被引量:5
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作者 张飘逸 李伟 +3 位作者 朱新平 洪孝友 陈昆慈 徐红艳 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期306-313,共8页
研究利用中华鳖为研究模型进行爬行类生殖细胞发育分化成熟等生物学研究,克隆了中华鳖vasa基因的c DNA序列,全长3865 bp,包括5′端非编码区90 bp,3′端非编码区1699 bp,开放阅读框长2076 bp,共编码691个氨基酸。中华鳖Vasa氨基酸序列包... 研究利用中华鳖为研究模型进行爬行类生殖细胞发育分化成熟等生物学研究,克隆了中华鳖vasa基因的c DNA序列,全长3865 bp,包括5′端非编码区90 bp,3′端非编码区1699 bp,开放阅读框长2076 bp,共编码691个氨基酸。中华鳖Vasa氨基酸序列包含DEAD-box家族蛋白8个保守保守功能域,在N末端有4个RGG重复序列和2个GG富集区,与小鼠Vasa蛋白的同源性较高(72%)。荧光定量PCR的结果表明,中华鳖vasa m RNA主要精巢和卵巢中表达,其他体组织中均难检测到表达。卵巢冰冻切片原位杂交结果显示:中华鳖vasa m RNA在生殖细胞中特异表达;在卵子发生过程中的不同发育期卵母细胞中呈现动态的变化。即vasa m RNA在初级卵母细胞及生长期卵母细胞中表达最强,且均匀分布在细胞质中,随着卵母细胞的逐渐增大,信号逐渐减弱,直至在成熟的卵母细胞中几乎检测不到表达信号,说明vasa可能在中华鳖早期卵母细胞发育中起重要作用。同时,vasa基因可作为中华鳖生殖细胞分子标记物,根据其m RNA的表达水平来鉴别不同发育时期的卵母细胞。研究结果为进一步开展中华鳖胚胎生殖细胞发育及配子生成,特别是研究中华鳖,乃至爬行类原始生殖细胞(Primordial Germ Cells,PGCs)的起源、迁移、分化等研究奠定了基础。 展开更多
关键词 vasa 中华鳖 生殖细胞 卵子发生
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日本沼虾DEAD-box家族基因vasa和PL10的克隆及其在卵巢发育过程中的表达 被引量:5
14
作者 朱小玲 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2010年第2期132-140,共9页
vasa和PL10同属于DEAD-box基因家族,具有依赖ATP的RNA解螺旋酶活性。本研究中,克隆了日本沼虾DEAD-box家族的两个成员,分别为vasa(Mnv-asa)和PL10(MnP-L10)。其中Mn-vasa全长2 408bp,包含1 803 bp的开放阅读框,编码601个氨基酸;Mn-PL10... vasa和PL10同属于DEAD-box基因家族,具有依赖ATP的RNA解螺旋酶活性。本研究中,克隆了日本沼虾DEAD-box家族的两个成员,分别为vasa(Mnv-asa)和PL10(MnP-L10)。其中Mn-vasa全长2 408bp,包含1 803 bp的开放阅读框,编码601个氨基酸;Mn-PL10全长2 607 bp,包含2 127 bp的开放阅读框,编码709个氨基酸。成体组织的组织检测表明,Mnv-asa仅在性腺中表达,而Mn-PL10在性腺和其他器官中均有表达。Mn-vasa和MnP-L10在卵巢的原位杂交结果显示:Mn-PL10和Mnv-asa都在卵黄发生前期,卵黄发生期的早期和中期表达,而在卵黄积累末期不表达,但Mn-PL10在卵黄发生中期定位于卵母细胞的两端,而Mn-vasa则是均匀的分布在卵母细胞细胞质中。 展开更多
关键词 vasa PL10 日本沼虾 克隆 卵子发生
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基于CRISPR/Cas9系统构建绵羊VASA基因敲入载体及验证 被引量:1
15
作者 杨花 刘孜斐 +2 位作者 吕文莉 王锋 张艳丽 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期4219-4233,共15页
本研究旨在探索VASA基因在绵羊睾丸发育中的表达变化,并通过构建VASA基因敲入载体,为下一步进行绵羊生殖细胞体外诱导分化研究提供基础。采集性成熟前后即3月龄(3-month-old,3M)和9月龄(9-month-old,9M)绵羊睾丸组织,利用实时荧光定量PC... 本研究旨在探索VASA基因在绵羊睾丸发育中的表达变化,并通过构建VASA基因敲入载体,为下一步进行绵羊生殖细胞体外诱导分化研究提供基础。采集性成熟前后即3月龄(3-month-old,3M)和9月龄(9-month-old,9M)绵羊睾丸组织,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blotting技术分析VASA基因的差异表达,并利用免疫组织化学技术对VASA基因的表达定位进行分析。设计靶向VASA基因的向导RNA(guide RNA,gRNA),并构建同源重组载体,进行质粒转染绵羊耳成纤维细胞。结合CRISPR/dCas9技术对VASA基因进行激活,进一步验证载体效率。结果表明,VASA基因随着绵羊睾丸发育,表达水平极显著增加(P<0.01),且主要定位在精母细胞和圆形精子细胞中。利用CRISPR/Cas9系统构建了VASA基因敲入载体,联合pEGFP-PGKpuro-VASA载体转染耳成纤维细胞,CRISPR/dCas9系统激活后,耳成纤维细胞成功表达VASA基因。结果提示,VASA基因在绵羊睾丸发育和精子发生中发挥潜在功能,且通过CRISPR/Cas9系统可在体外构建VASA基因敲入载体,为下一步探究VASA基因对绵羊雄性生殖细胞的发育和分化提供有效的研究手段。 展开更多
关键词 vasa CRISPR/Cas9 CRISPR/dCas9 敲入 绵羊
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精子发生相关基因VASA在正常和少精子症患者精子中的表达及意义 被引量:6
16
作者 郭新 桂耀庭 +4 位作者 唐爱发 李泽廷 张立兵 蔡志明 高新 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期4-9,共6页
目的探讨生殖细胞高度特异性基因VASA和信号分子BMP-4在精子发生中的作用和相关机制。方法正常和少精子症患者精液通过Percoll梯度分离获得精子和未成熟生精细胞,采用RT-PCR、real-time PCR、Western Blot和免疫荧光方法分析基因转录产... 目的探讨生殖细胞高度特异性基因VASA和信号分子BMP-4在精子发生中的作用和相关机制。方法正常和少精子症患者精液通过Percoll梯度分离获得精子和未成熟生精细胞,采用RT-PCR、real-time PCR、Western Blot和免疫荧光方法分析基因转录产物表达。结果少精子症精子VASA基因转录产物是正常精子的1/5;两种样本精子中均检测到荧光信号,正常组信号强,与Western blot结果相一致;两种样本精子RT-PCR均未检测到BMP-4及其Ⅰ型受体Alk-3表达,但在分离的未成熟生精细胞中均表达。人正常睾丸组织可检测到BMP- 4及其Alk-3表达。结论少精子症患者精子发生过程中VASA基因及其产物发生变化;BMP-4及其受体Alk- 3并不直接上调VASA表达;睾丸组织包括精子所存在的部分转录产物,而精子转录产物并不完全等同于睾丸组织;睾丸组织内表达BMP-4和Alk-3的可能主要是精原和精母细胞。 展开更多
关键词 精子发生 基因表达 少精子症
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羊栖菜多糖促进生育相关基因表达提高果蝇生育力的研究 被引量:4
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作者 张亚 赵子慧 +3 位作者 张旭 陈柳君 吴明江 陈培超 《药物评价研究》 CAS 2016年第6期925-931,共7页
目的研究羊栖菜多糖(SFPS)对亲本果蝇生育能力的影响及其作用机制。方法采用85℃热水煮提、乙醇沉淀、氯化钙去除褐藻胶等多种工序提取SFPS;以黑腹果蝇为模式生物,分别以对照(0%)、低(0.033%)、中(0.167%)、高(0.500%)4个浓度持续喂食15... 目的研究羊栖菜多糖(SFPS)对亲本果蝇生育能力的影响及其作用机制。方法采用85℃热水煮提、乙醇沉淀、氯化钙去除褐藻胶等多种工序提取SFPS;以黑腹果蝇为模式生物,分别以对照(0%)、低(0.033%)、中(0.167%)、高(0.500%)4个浓度持续喂食15 d,通过检测子代数量、体质量、每天羽化量评估不同浓度SFPS对果蝇生育能力的影响;荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测亲本果蝇生育和发育相关基因Vasa、Achi、Figla和子代果蝇mTOR的表达。结果与对照组比较,喂食SFPS能显著性地提高雌蝇和雄蝇的生育力,并且对其子代果蝇体质量、羽化率和雌雄比例也有后续的促进作用,低和中浓度SFPS分别对母本和父本果蝇的生育力促进效果最优;持续喂食SFPS后,亲本果蝇生殖发育相关基因在m RNA水平上显著提高;亲本喂食低、高浓度SFPS后,子代果蝇mTOR表达水平普遍升高,子代雌蝇变化更为显著。结论 SFPS通过调控果蝇生育相关基因的表达,提高亲本果蝇的生育能力,对子代果蝇的生长发育也有显著促进作用。 展开更多
关键词 羊栖菜多糖 黑腹果蝇 生育力 荧光定量PCR vasa Achi Figla MTOR
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白消安及其与高温联合处理对黄姑鱼(Nibea albiflora)性腺发育的影响 被引量:2
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作者 杨磊 胡伟华 +2 位作者 俞燕洁 陈睿毅 徐冬冬 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1465-1473,共9页
黄姑鱼(Nibea albiflora)的性成熟周期短,养殖技术成熟,是合适的生殖细胞移植受体。不育受体的制备在鱼类生殖细胞移植中非常关键。为了优化不育黄姑鱼的制备方法,采用白消安和白消安-高温(30℃)对黄姑鱼进行处理,设置5个组:对照组(Con... 黄姑鱼(Nibea albiflora)的性成熟周期短,养殖技术成熟,是合适的生殖细胞移植受体。不育受体的制备在鱼类生殖细胞移植中非常关键。为了优化不育黄姑鱼的制备方法,采用白消安和白消安-高温(30℃)对黄姑鱼进行处理,设置5个组:对照组(Con组)、白消安10 mg/kg组(Bu10组)、白消安40 mg/kg组(Bu40组)、白消安10 mg/kg高温组(Bu10H组)、白消安40 mg/kg高温组(Bu40H组),白消安以不同剂量进行2次的腹腔注射,间隔两周。采用组织学、qPCR以及原位杂交等方法分析白消安及其与高温联合处理对黄姑鱼性腺及其生殖细胞和体细胞发育的影响。研究结果表明白消安处理对黄姑鱼生殖细胞的影响具有明显的性别差异:雄鱼在处理28 d后其性腺重和GSI较对照组显著下降,进一步组织学观察发现雄鱼精巢在处理14 d时已经出现空腔,qPCR分析发现雄鱼vasa基因表达在处理期间显著降低,且在处理第48 d仍处于下调状态。然而,白消安及其与高温联合处理并未对雌鱼生殖细胞产生明显的影响。研究还发现高温处理组出现较高的死亡率,但雄鱼生殖细胞的消除效果并未显著增强。因此,白消安处理能够消除黄姑鱼雄鱼性腺内的生殖细胞,以40 mg/kg白消安2次(间隔两周)注射后消除效果最好,能够作为生殖细胞移植受体鱼。 展开更多
关键词 黄姑鱼(Nibea albiflora) 白消安 生殖细胞移植 vasa 原位杂交
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真鲷(Pagrus major)vasa基因5′端启动子克隆及表达载体构建 被引量:2
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作者 林帆 刘清华 +5 位作者 李军 隋娟 肖志忠 徐世宏 马道远 肖永双 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期186-192,共7页
采用染色体步移(Genome walking)的方法克隆了真鲷vasa基因5′侧翼序列,采用生物信息学方法分析潜在的顺式作用元件,并与斑马鱼核心启动子进行比对,在此基础上构建了绿色荧光蛋白表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的真鲷vasa基因5′... 采用染色体步移(Genome walking)的方法克隆了真鲷vasa基因5′侧翼序列,采用生物信息学方法分析潜在的顺式作用元件,并与斑马鱼核心启动子进行比对,在此基础上构建了绿色荧光蛋白表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的真鲷vasa基因5′侧翼序列序列长度为2762bp,其中包括TATA-box、CAAT-box、SP-1、GAGA-1、OCT-1、v-Myb、Sox-5、SRY、HNF等可能对vasa基因转录调控起重要作用的顺式作用元件。潜在的核心启动子区与斑马鱼核心启动子具有同源性(61.1%),推测可能对转录调控具有重要的作用。采用PCR方法扩增起始密码5′侧翼全长片段,连接入去除CMV启动子的绿色色荧光蛋白载体,最终成功构建真鲷vasa基因5′侧翼表达载体,为进一步研究分析启动子效率和绿色荧光蛋白在PGCs中的特异表达提供了基础。 展开更多
关键词 真鲷 vasa 启动子 PGCS
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摘除眼柄与注射眼柄粗提物对凡纳滨对虾性腺发育相关基因表达的影响 被引量:2
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作者 师尚丽 叶满 +3 位作者 朱春华 邓思平 陈华谱 李广丽 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期344-349,共6页
利用荧光定量PCR技术,检测了眼柄粗提物对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)性腺发育相关基因(DMC1、VASA和VTG)表达的影响,探讨性腺抑制激素(GIH)在性腺发育过程中的调控机制,结果表明:DMC1和VASA只在凡纳滨对虾精巢和卵巢中表达;摘除... 利用荧光定量PCR技术,检测了眼柄粗提物对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)性腺发育相关基因(DMC1、VASA和VTG)表达的影响,探讨性腺抑制激素(GIH)在性腺发育过程中的调控机制,结果表明:DMC1和VASA只在凡纳滨对虾精巢和卵巢中表达;摘除眼柄后,精巢和卵巢中DMC1表达量均显著性降低(P<0.05),而注射眼柄粗提物后精巢和卵巢中DMC1表达显著增高(P<0.05);相反,摘除眼柄后,精巢和卵巢中VASA以及卵巢中VTG基因表达量显著增高,但注射眼柄粗提物后性腺中的VASA和卵巢中的VTG表达量显著降低。结果表明眼柄粗提物通过影响生殖相关基因的表达影响凡纳滨对虾的性腺发育。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 眼柄 DMC1 vasa VTG
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