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检测鸡毒支原体抗体的间接ELISA方法和HI试验方法的建立及初步应用
被引量:
3
1
作者
陈杨
孟林春
+6 位作者
郭梦娇
张成成
薄宗义
楚电峰
曹永忠
吴艳涛
张小荣
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期2062-2072,共11页
本研究旨在建立一种检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)抗体的间接ELISA方法,结合HI试验,为MG感染的监测和净化提供一套有效的组合技术方案。以原核表达的VlhA 3.03重组蛋白(rVlhA)作为包被抗原,使用单一稀释法构建了关于血...
本研究旨在建立一种检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)抗体的间接ELISA方法,结合HI试验,为MG感染的监测和净化提供一套有效的组合技术方案。以原核表达的VlhA 3.03重组蛋白(rVlhA)作为包被抗原,使用单一稀释法构建了关于血清抗体滴度与1∶500血清稀释度处S/P值的回归方程lg(抗体滴度)=1.257×lg(1∶500处S/P值)+3.709,R^(2)=0.9176,S/P临界值为0.32,临界滴度是1200。经验证,rVlhA-ELISA方法具有良好的特异性、重复性,最低能检出1∶2000稀释的阳性血清。选择国内MG分离株SH/2020-1作为血凝抑制抗原建立HI试验方法。使用rVlhA-ELISA方法联合HI试验进行血清样品检测,IDEXX-MG方法作为对照,借助RT-qPCR方法监测MG感染情况。结果表明rVlhA-ELISA方法和IDEXX-MG监测的血清抗体趋势与HI复核结果均一致;rVlhA-ELISA与HI联合判定结果与IDEXX-MG符合率可达91.53%。上述结果显示,本研究建立的rVlhA-ELISA方法和HI试验具有较好的临床应用价值,可以初步应用于MG感染的临床大规模、快速筛查并对结果进行复核。
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关键词
鸡毒支原体
VlhA蛋白
抗体检测
间接ELISA
下载PDF
职称材料
2016-2019年我国部分地区鸡滑液囊支原体分离株vlhA基因遗传进化分析
被引量:
6
2
作者
谢迪
马爽
+7 位作者
楚电峰
孙通行
陈梦瑶
何吉鑫
吴艳涛
杜元钊
范根成
张小荣
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期81-85,90,共6页
为了解我国鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)感染的最新流行情况,本研究于2016―2019年从江苏、安徽、山东、河南、河北、宁夏、黑龙江、湖北等8个省份疑似发生MS感染的鸡场采集样品,进行MS菌株的分离鉴定,结果共获得48株MS分离...
为了解我国鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)感染的最新流行情况,本研究于2016―2019年从江苏、安徽、山东、河南、河北、宁夏、黑龙江、湖北等8个省份疑似发生MS感染的鸡场采集样品,进行MS菌株的分离鉴定,结果共获得48株MS分离株。对这些分离株的vlhA基因片段测序和分析显示,其中46株均属于K基因型,另外2株分别属于A基因型和E基因型。研究结果表明,当前国内流行的MS优势基因型是K基因型,与其他国家和地区流行的基因型存在显著性差异。本研究结果为制定适合我国鸡群MS控制与净化的策略提供了必要的流行病学依据。
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关键词
滑液囊支原体
vlhA基因
K基因型
A基因型
E基因型
原文传递
题名
检测鸡毒支原体抗体的间接ELISA方法和HI试验方法的建立及初步应用
被引量:
3
1
作者
陈杨
孟林春
郭梦娇
张成成
薄宗义
楚电峰
曹永忠
吴艳涛
张小荣
机构
扬州大学兽医学院、江苏省动物重要疫病预防控制协同创新中心
扬州大学农业科技发展研究院、教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室
青岛易邦生物工程有限公司动物基因工程疫苗国家重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期2062-2072,共11页
基金
财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系资助项目(CARS-40-K16)
国家重点研发计划“科技助力经济2020”重点专项(SQ2020YFF0426460)
+1 种基金
动物基因工程疫苗国家重点实验室开放课题(AGVSKL-ZD-202003)
江苏高校优势学科建设工程资助项目(2018年)。
文摘
本研究旨在建立一种检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)抗体的间接ELISA方法,结合HI试验,为MG感染的监测和净化提供一套有效的组合技术方案。以原核表达的VlhA 3.03重组蛋白(rVlhA)作为包被抗原,使用单一稀释法构建了关于血清抗体滴度与1∶500血清稀释度处S/P值的回归方程lg(抗体滴度)=1.257×lg(1∶500处S/P值)+3.709,R^(2)=0.9176,S/P临界值为0.32,临界滴度是1200。经验证,rVlhA-ELISA方法具有良好的特异性、重复性,最低能检出1∶2000稀释的阳性血清。选择国内MG分离株SH/2020-1作为血凝抑制抗原建立HI试验方法。使用rVlhA-ELISA方法联合HI试验进行血清样品检测,IDEXX-MG方法作为对照,借助RT-qPCR方法监测MG感染情况。结果表明rVlhA-ELISA方法和IDEXX-MG监测的血清抗体趋势与HI复核结果均一致;rVlhA-ELISA与HI联合判定结果与IDEXX-MG符合率可达91.53%。上述结果显示,本研究建立的rVlhA-ELISA方法和HI试验具有较好的临床应用价值,可以初步应用于MG感染的临床大规模、快速筛查并对结果进行复核。
关键词
鸡毒支原体
VlhA蛋白
抗体检测
间接ELISA
Keywords
Mycoplasma
gallisepticum
variable
lipoprotein
haemagglutinin
antibody
detection
indirect
enzyme-linked
immunosorbent
assay
分类号
S852.62 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
2016-2019年我国部分地区鸡滑液囊支原体分离株vlhA基因遗传进化分析
被引量:
6
2
作者
谢迪
马爽
楚电峰
孙通行
陈梦瑶
何吉鑫
吴艳涛
杜元钊
范根成
张小荣
机构
扬州大学
青岛易邦生物工程有限公司
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期81-85,90,共6页
基金
动物基因工程疫苗国家重点实验室开放课题资助项目(AGVSKL-ZD-202001)
国家蛋鸡产业技术体系专项资助项目(CARS-40)
+1 种基金
扬州大学高端人才支持计划资助项目(2016年)
江苏高校优势学科建设工程资助项目(2018年)。
文摘
为了解我国鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)感染的最新流行情况,本研究于2016―2019年从江苏、安徽、山东、河南、河北、宁夏、黑龙江、湖北等8个省份疑似发生MS感染的鸡场采集样品,进行MS菌株的分离鉴定,结果共获得48株MS分离株。对这些分离株的vlhA基因片段测序和分析显示,其中46株均属于K基因型,另外2株分别属于A基因型和E基因型。研究结果表明,当前国内流行的MS优势基因型是K基因型,与其他国家和地区流行的基因型存在显著性差异。本研究结果为制定适合我国鸡群MS控制与净化的策略提供了必要的流行病学依据。
关键词
滑液囊支原体
vlhA基因
K基因型
A基因型
E基因型
Keywords
Mycoplasma
synoviae
variable
lipoprotein
haemagglutinin
gene(vlhA)
K
genotype
A
genotype
E
genotype
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
检测鸡毒支原体抗体的间接ELISA方法和HI试验方法的建立及初步应用
陈杨
孟林春
郭梦娇
张成成
薄宗义
楚电峰
曹永忠
吴艳涛
张小荣
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
3
下载PDF
职称材料
2
2016-2019年我国部分地区鸡滑液囊支原体分离株vlhA基因遗传进化分析
谢迪
马爽
楚电峰
孙通行
陈梦瑶
何吉鑫
吴艳涛
杜元钊
范根成
张小荣
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
6
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