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十字花科黑腐病菌Ⅲ型效应物基因avrAC_(Xcc8004)推测的启动子区 被引量：5
1
作者 蒋国凤 吴秋菊 +5 位作者 梁晓夏 杨丽超 阳丽艳 王凛 吴小建 姜伯乐 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期159-166,共8页
【目的】十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc),能侵染所有十字花科植物,引起黑腐病。Xcc通过III型分泌系统(Type III Secretion System,T3SS)将III型效应物(T3SS effector,T3SE)蛋白直接转运到植物细胞内,T3SE... 【目的】十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc),能侵染所有十字花科植物,引起黑腐病。Xcc通过III型分泌系统(Type III Secretion System,T3SS)将III型效应物(T3SS effector,T3SE)蛋白直接转运到植物细胞内,T3SEs对于病原菌致病性至关重要。许多已鉴定的T3SEs基因的启动子区都存在植物诱导启动子盒(Plant-inducible promoter,PIP-box)和-10 box,但PIP-box及-10 box与经典的启动子-10区及-35区之间的关系如何未见报道,-10 box的序列保守性如何也未见报道。本研究旨在对T3SE基因avrAC Xcc8004推测的启动子区进行研究。【方法】首先,通过5'RACE确定其转录起始位点,接着用Fusion PCR对-10 box TACGTT序列中倒数第二个碱基T进行点突变为A/C/G,即:TACGAT、TACGCT和TACGGT,构建GUS融合报告菌株,定量测定GUS酶活。【结果】5'RACE结果显示avrAC Xcc8004的转录起始位点为A,对比分析得到启动子的-35区位于PIP-box之后8 bp处,而-10区与-10 box重叠;avrAC Xcc8004启动子区的PIP-box和-35区、-10 box的整个模体为:TTCAC-N15-TTCGC-N8-TTGATG-N18-TACGTT。最后,GUS定量测定结果表明,突变为C时(TACGCT)的菌株的GUS酶活最高,突变为G时(TACGGT)的酶活增高最少。在ΔhrpX和ΔhrpG中的GUS酶活均比在Xcc 8004中有显著的降低。【结论】Xcc的T3SE基因PIP-box与-35区前后相衔,-10 box即-10区,-10 box对于avrAC Xcc8004的转录活性有较大的影响,-10 box突变前后avrAC Xcc8004均受HrpG和HrpX正向调控。 展开更多
关键词 十字花科黑腐病菌 Ⅲ型效应物 HrpX avrACXcc8004 PIP-box -10 BOX
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根瘤菌Ⅲ型效应因子NopAA的突变及其对大豆共生结瘤的影响
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作者 马胜男 张浩然 +7 位作者 王悦 张煦杭 黄亚娸 王江旭 胡振帮 辛大伟 陈庆山 王锦辉 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期720-727,共8页
大豆根瘤固氮为大豆生长发育提供必不可少的氮源。根瘤菌Ⅲ型效应因子是大豆与根瘤菌共生体系建立过程中重要的信号分子。本研究以根瘤菌HH103 Ⅲ型效应因子NopAA为研究对象,通过生物信息学手段分析了其基本信息,利用三亲杂交构建NopAA... 大豆根瘤固氮为大豆生长发育提供必不可少的氮源。根瘤菌Ⅲ型效应因子是大豆与根瘤菌共生体系建立过程中重要的信号分子。本研究以根瘤菌HH103 Ⅲ型效应因子NopAA为研究对象,通过生物信息学手段分析了其基本信息,利用三亲杂交构建NopAA突变体,并利用Southern blot对突变体进行鉴定。表达分析发现,NopAA突变显著降低了大豆免疫相关基因PR1的表达;在根瘤成熟之后,根瘤菌依旧能够表达NopAA。最后通过结瘤能力鉴定,发现NopAA突变能够显著抑制根瘤的产生。该研究为揭示根瘤菌Ⅲ型效应因子NopAA的作用机制奠定了基础,同时为大豆农业生产过程中共生固氮的利用提供理论基础。 展开更多
关键词 大豆 根瘤菌 Ⅲ型效应因子 表达分析 结瘤鉴定
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根瘤菌TtsI突变体构建及结瘤表型鉴定 被引量：1
3
作者 田博宇 孙志君 +9 位作者 刘函西 文莹楠 王洁琦 吕浩 周红阳 黄修正 刘春燕 王锦辉 辛大伟 陈庆山 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期17-24,共8页
本论文以中华根瘤菌HH103 Ⅲ型分泌系统调控因子TtsI为研究对象,采用三亲杂交的方法获得突变体HH103ΩTtsI,并用PCR鉴定。Ⅲ型效应因子表达分析表明,在染料木苷存在的情况下,TtsI突变能够抑制NopAA、NopD、NopL和NopP等效应因子基因的... 本论文以中华根瘤菌HH103 Ⅲ型分泌系统调控因子TtsI为研究对象,采用三亲杂交的方法获得突变体HH103ΩTtsI,并用PCR鉴定。Ⅲ型效应因子表达分析表明,在染料木苷存在的情况下,TtsI突变能够抑制NopAA、NopD、NopL和NopP等效应因子基因的转录和表达。当TtsI突变情况下,能够显著抑制根瘤菌HH103 Ⅲ型效应因子的合成。用TtsI突变体和野生型根瘤菌HH103对来自不同生态区的10份种质资源进行结瘤鉴定,结果显示,TtsI突变后能够显著减少根瘤平均数和根瘤干重。导入系群体结瘤鉴定结果显示,TtsI突变体显著减少导入系平均瘤数。说明TtsI在大豆-根瘤菌共生体系建立过程中发挥重要的作用,这种作用的发挥有可能是依赖于调控其他Ⅲ型效应因子的表达。 展开更多
关键词 大豆 根瘤菌 Ⅲ型效应因子 TtsI基因
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