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Simultaneous multi-parameter observation of Harring-tonine-treating HL-60 cells with both two-photon and confocal laser scanning microscopy 被引量:7
1
作者 张春阳 李艳平 +3 位作者 马辉 李素文 薛绍白 陈瓞延 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2001年第4期383-391,共9页
Harringtonine (HT), a kind of anticancer drug isolated from Chinese herb-Cephalotaxus hainanensis Li, can induce apoptosis in promyelocytic leukemia HL-60 cells. With both two-photon laser scanning microscopy and conf... Harringtonine (HT), a kind of anticancer drug isolated from Chinese herb-Cephalotaxus hainanensis Li, can induce apoptosis in promyelocytic leukemia HL-60 cells. With both two-photon laser scanning microscopy and confocal laser scanning microscopy in combination with the fluores-cent probe Hoechst 33342, tetramethyrhodamine ethyl ester (TMRE) and Fluo 3-AM, we simulta-neously observed HT-induced changes in nuclear morphology, mitochondrial membrane potential and intracellular calcium concentration ([Ca2+]i) in HL-60 cells, and developed a real-time, sensitive and invasive method for simultaneous multi-parameter observation of drug- treating living cells at the level of single cell. 展开更多
关键词 two-photon laser scanning microscopy confocal laser scanning microscopy Harringtonine HL-60 cells.
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双光子及共聚焦激光扫描显微术研究天花粉蛋白对人绒癌细胞的作用机制 被引量:7
2
作者 张春阳 贡宜萱 +2 位作者 马辉 安成才 陈瓞延 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期717-721,共5页
天花粉蛋白 (trichosanthin ,TCS)是从中草药栝楼根中提取的一种核糖体失活蛋白 ,具有抗肿瘤和抗HIV功能 .应用双光子及共聚焦激光扫描显微术结合特异性荧光探针Hoechst 3334 2、 2′,7′ 二氯荧光黄双乙酸酯(DCFH DA)、Indo 1和Fluo 3 ... 天花粉蛋白 (trichosanthin ,TCS)是从中草药栝楼根中提取的一种核糖体失活蛋白 ,具有抗肿瘤和抗HIV功能 .应用双光子及共聚焦激光扫描显微术结合特异性荧光探针Hoechst 3334 2、 2′,7′ 二氯荧光黄双乙酸酯(DCFH DA)、Indo 1和Fluo 3 AM ,首次同时观察了TCS诱导人绒癌细胞 (JAR细胞 )凋亡过程中活性氧自由基 (ROS)和细胞内钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的变化 ,实验结果表明TCS引起的 [Ca2 + ]i 升高和ROS形成参与了TCS诱导的JAR细胞凋亡 ,并且ROS形成和 [Ca2 + ]i 升高有关 .共聚焦激光扫描显微术的研究结果表明 ,[Ca2 + ]i 升高不是导致ROS形成的主要原因 。 展开更多
关键词 双光子激光扫描显微术 共聚焦激光扫描显微术 天花粉蛋白 人绒癌细胞 活性氧自由基 作用机制
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双光子技术在生物医学中的应用与研究进展 被引量:4
3
作者 汪洁 梁瑞生 +2 位作者 唐志列 徐险峰 刘景峰 《中国医学物理学杂志》 CSCD 2002年第3期148-150,共3页
双光子技术在生物分子探测、医学诊断等领域具有极大的应用潜力和广阔前景,文章着重介绍了双光子技术与共焦显微镜、近场光学显微镜等显微技术相结合,对生物组织进行三维观察和成像。它既具有亚微米甚至纳米尺度的分辨本领,图像对比度高... 双光子技术在生物分子探测、医学诊断等领域具有极大的应用潜力和广阔前景,文章着重介绍了双光子技术与共焦显微镜、近场光学显微镜等显微技术相结合,对生物组织进行三维观察和成像。它既具有亚微米甚至纳米尺度的分辨本领,图像对比度高,而且对生物样品无损伤。对国内利用双光子荧光进行癌症诊断的一种新方法也作了简要介绍。 展开更多
关键词 双光子技术 生物医学 应用 研究进展 共焦扫描显微镜 扫描近场光学显微镜
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小鼠双光子激光扫描显微镜活体成像窗口构建技术 被引量:2
4
作者 李娟 关苑君 +2 位作者 梁翠莎 张岚岚 吴珏珩 《中国医学物理学杂志》 CSCD 2022年第2期229-235,共7页
双光子显微成像技术以其组织器官穿透性深、光漂白及光毒性低等独特优势,成为小动物活体光学高分辨显微成像的重要工具;但是活体状态下,由于动物的呼吸、心跳以及一些组织非自主的蠕动等使观察视野无法固定,导致图像失焦,降低实验的可... 双光子显微成像技术以其组织器官穿透性深、光漂白及光毒性低等独特优势,成为小动物活体光学高分辨显微成像的重要工具;但是活体状态下,由于动物的呼吸、心跳以及一些组织非自主的蠕动等使观察视野无法固定,导致图像失焦,降低实验的可重复性。成像视窗以其支持原位、实时观察及长期成像等优势,已成为双光子活体成像的重要辅助手段之一。本文主要介绍了小鼠不同脏器活体成像固定装置的设计、成像视窗的构建方法以及成像窗口在实际应用中需注意的问题等,旨在为使用者提供更多的方法参考,解决活体成像图像稳定度低、清晰度差等问题,拓宽实验种类,提高观察深度和精度。 展开更多
关键词 小鼠 双光子激光扫描显微镜 活体成像 成像窗口 综述
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双光子显微镜技术在脑功能研究中的应用:脑片、整体脑结构样品和活体脑
5
作者 张静思 孙长凯 朴花 《大连医科大学学报》 CAS 2010年第5期591-595,607,共6页
双光子显微镜(two-photon microscopy,TPLSM)具有三维成像功能,在分辨率和成像深度方面均具有明显优势。同时,它对样本的损伤程度也明显低于传统成像方法,这使双光子显微镜技术在神经科学研究中的地位日益提升。此外,TPLSM在光化学,尤... 双光子显微镜(two-photon microscopy,TPLSM)具有三维成像功能,在分辨率和成像深度方面均具有明显优势。同时,它对样本的损伤程度也明显低于传统成像方法,这使双光子显微镜技术在神经科学研究中的地位日益提升。此外,TPLSM在光化学,尤其是光解释放笼状分子方面具有无可比拟的优势,该优势为进一步深入研究组织乃至细胞的细微结构、分子成分及细胞功能提供了一种可靠的方法。本文综述TPLSM的上述优点在脑片、整体脑结构样品和活体脑功能中的研究应用,期待双光子显微镜技术在神经科学研究中发挥更大的作用。 展开更多
关键词 双光子显微镜 脑片 整体脑结构样品 活体脑
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双光子激光扫描显微镜中折射率失配引起的图象变形研究 被引量:7
6
作者 陈德强 周拥军 +1 位作者 黄文浩 夏安东 《光子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1486-1491,共6页
双光子激光扫描显微镜 (TPL SM)在观察生理溶液中的生物样品的结构时 ,水浸物镜是最好的选择 .但是 TPLSM在进行生物样品的三维结构观察时 ,需要样品和物镜在 Z轴方向上做相对移动 ,这种移动很容易引起样品在水溶液中飘动 .为了防止这... 双光子激光扫描显微镜 (TPL SM)在观察生理溶液中的生物样品的结构时 ,水浸物镜是最好的选择 .但是 TPLSM在进行生物样品的三维结构观察时 ,需要样品和物镜在 Z轴方向上做相对移动 ,这种移动很容易引起样品在水溶液中飘动 .为了防止这种样品的漂移 ,往往要在水物镜和样品之间加入盖波片 .由于盖波片和水及样品间的折射率失配将会导致TPL SM荧光图象的变形 ,给观察结果带来误差 .本文主要利用 TPLSM的外源探测器 (ex-ternal detection)观察荧光小球的 TPLSM的荧光图象 ,比较插入盖波片前后小球荧光图象的变化情况 ,研究水浸物镜在插入盖波片后折射率失配引起 TPL SM图象的变形程度及共焦小孔对改进图象变形的作用 .结果显示盖波片的折射率失配不仅导致 TPL SM荧光图象的畸变 ,同时还导致 TPL SM图象的荧光强度和信噪比的下降 .进一步的研究表明共焦小孔可以部分改进由于折射率失配引起畸变的 TPL SM荧光图象的质量 . 展开更多
关键词 双光子激光扫描显微镜 TPLSM 折射率失配 水浸物镜 图象变形
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Ca^2+对Mozzarella干酪凝乳形成及微观结构的影响 被引量:6
7
作者 李丽丽 任发政 +2 位作者 曹雪 陈瓞延 王硕 《农业机械学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第5期124-129,共6页
以双光子共聚焦激光显微镜结合荧光染色法研究Ca2+对Mozzarella干酪凝乳形成及结构的影响,结果表明:Ca2+可明显加快牛奶凝乳的形成,对凝乳的结构有重大影响。添加Ca2+后,牛奶的凝乳时间由38 min(0 mmol/L Ca2+)分别缩短为12 min(3 mmol/... 以双光子共聚焦激光显微镜结合荧光染色法研究Ca2+对Mozzarella干酪凝乳形成及结构的影响,结果表明:Ca2+可明显加快牛奶凝乳的形成,对凝乳的结构有重大影响。添加Ca2+后,牛奶的凝乳时间由38 min(0 mmol/L Ca2+)分别缩短为12 min(3 mmol/L Ca2+)、6 min(6 mmol/L Ca2+)和3 min(9 mmol/L Ca2+)。实时观测发现:未加Ca2+处理的牛奶在凝结后,结点周围的一些细小颗粒进一步向结点聚集,使结点越来越大,结点之间也形成较强的连接;而添加Ca2+的牛奶在短时间内即迅速凝固,使得细小的蛋白颗粒不能向结点靠近,因此凝块比较细小,结点之间连接较弱。 展开更多
关键词 干酪 凝乳 微观结构 双光子共聚焦激光显微镜 荧光染色
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基于双螺旋点扩展函数工程的三维多焦点双光子激光扫描显微技术 被引量:4
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作者 任苏霞 张晨爽 +3 位作者 曹慧群 林丹樱 于斌 屈军乐 《光学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第14期78-84,共7页
为了进一步提高成像速度和分辨率,提出了基于双螺旋点扩展函数(DH-PSF)工程的多焦点双光子激光扫描显微成像方法和系统(DH-MTPLSM)。在激发光路中,通过高速相位型空间光调制器(SLM)同时实现了三维多焦点阵列的产生和在样品面上的高精度... 为了进一步提高成像速度和分辨率,提出了基于双螺旋点扩展函数(DH-PSF)工程的多焦点双光子激光扫描显微成像方法和系统(DH-MTPLSM)。在激发光路中,通过高速相位型空间光调制器(SLM)同时实现了三维多焦点阵列的产生和在样品面上的高精度并行数字寻址扫描;在探测光路中,通过双螺旋相位片将系统探测PSF调制为DH-PSF,从而提供样品的轴向信息,减少轴向扫描层数,进而提高三维成像速度;结合基于DH-PSF的数字重聚焦算法,恢复出不同深度样本的宽场图像,通过单次二维扫描获得样品的三维光切片信息。在此基础上,利用搭建的DH-MTPLSM系统开展了小鼠肾组织切片的双光子成像实验,验证了该方法的快速三维高分辨成像能力,这对于MTPLSM的发展具有重要的意义。 展开更多
关键词 成像系统 荧光显微 多焦点双光子激光扫描显微 双螺旋点扩展函数 数字重聚焦 空间光调制器
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双光子成像观测拟南芥细胞骨架及根尖生长过程
9
作者 王鹏飞 林丹樱 马万云 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第10期2593-2596,共4页
细胞骨架在植物细胞及其运动、发育变化等过程中起着重要作用。本文利用MS培养基在无菌条件下培养转染GFP(绿色荧光蛋白)的拟南芥,使其经过从种子萌发、植株生长直至开花结果的完整生命周期;在此过程中,利用适合对较大较厚样品进行活体... 细胞骨架在植物细胞及其运动、发育变化等过程中起着重要作用。本文利用MS培养基在无菌条件下培养转染GFP(绿色荧光蛋白)的拟南芥,使其经过从种子萌发、植株生长直至开花结果的完整生命周期;在此过程中,利用适合对较大较厚样品进行活体四维成像的双光子激光扫描显微术,观测活的拟南芥种子、根尖、导管和根毛等器官内的细胞骨架形态,以及拟南芥根尖生长发育的动态过程,量化计算出根尖的生长速度。用低浓度(10-10mol.L-1)吲哚-3-乙酸刺激拟南芥,观测到根尖生长速度比正常情况下提高约3.8倍。 展开更多
关键词 双光子成像 拟南芥 GFP转染 细胞骨架
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活体小鼠微血管血流倒置双光子激光扫描显微镜检测方法的建立
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作者 刘皎 丛馨 何其华 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期261-265,共5页
目的 使用倒置双光子显微镜,建立连续及质量更好的活体微血管成像及血流计算。方法 将麻醉和尾静脉注射染料的小鼠放置于37℃热板中央,剥离的组织器官放置于打磨自制的低边缘共聚焦小皿内,生理盐水浸没,自制不同重量和大小的圆形金属垫... 目的 使用倒置双光子显微镜,建立连续及质量更好的活体微血管成像及血流计算。方法 将麻醉和尾静脉注射染料的小鼠放置于37℃热板中央,剥离的组织器官放置于打磨自制的低边缘共聚焦小皿内,生理盐水浸没,自制不同重量和大小的圆形金属垫片按压暴露的组织器官。利用上述改进的装置测量孕鼠(n=3)和正常雌鼠(n=3)的肝脏及后肢的微血管血流差异。结果 此方法可以实现稳定连续成像,孕鼠比正常雌鼠的肝脏及后肢血流速度更快。结论 此方法能对组织器官进行微血管三维立体成像和血流速度检测。 展开更多
关键词 微血管 活体成像 倒置双光子激光扫描显微术 血流检测 小鼠
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双光子激光扫描荧光显微镜及其应用 被引量:20
11
作者 陈德强 夏安东 《物理》 CAS 2000年第4期232-236,共5页
文章对双光子激光扫描荧光显微镜的原理及其应用进行了综述.双光子激光扫描荧光显微镜的本征的空间三维成像特性广泛应用于生命科学、半导体和三维高密度数据存储及其微细加工的研究.
关键词 双光子激光扫描荧光显微镜 共焦 三维
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双光子显微镜的应用优势与维护要素
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作者 李娟 张岚岚 吴珏珩 《中国医学装备》 2021年第12期158-163,共6页
双光子显微镜是结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术的一种新精密仪器,具有低光毒性、高时空分辨率、高信噪比等优点,广泛应用于脑科学、免疫学、肿瘤、胚胎发育等生物医学相关研究领域。但双光子显微镜操作较复杂,对于新用户... 双光子显微镜是结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术的一种新精密仪器,具有低光毒性、高时空分辨率、高信噪比等优点,广泛应用于脑科学、免疫学、肿瘤、胚胎发育等生物医学相关研究领域。但双光子显微镜操作较复杂,对于新用户而言对设备的选用存在一定困惑。通过阐述双光子显微镜的工作原理、样品前期准备、成像难点及设备使用和日常维护要点,梳理双光子显微镜与其他同类成像类设备在成像原理、配置参数、成像特点及应用领域等方面的区别,总结双光子显微镜的应用特点及优势,为从事医学临床、教学及科研提供参考。 展开更多
关键词 双光子显微镜 应用对比 日常维护 激光扫描共聚焦显微镜
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