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构建TRAF6基因3’非编码区荧光素酶报告质粒验证及与潜在靶基因TRAF6的靶向关系 被引量:1
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作者 张亚楼 邓强 +6 位作者 周杨俊杰 赵阳 郭琼 蒋稥菊 岳明明 陈龙 马文静 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第27期4397-4401,共5页
背景:前期研究发现miR-146-5p在染氟成骨细胞凋亡时表达上调。目的:构建肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)基因3’非编码区(3’UTR)荧光素酶报告质粒,利用双荧光素酶报告基因验证miR-146-5p与其潜在... 背景:前期研究发现miR-146-5p在染氟成骨细胞凋亡时表达上调。目的:构建肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)基因3’非编码区(3’UTR)荧光素酶报告质粒,利用双荧光素酶报告基因验证miR-146-5p与其潜在靶基因TRAF6的靶向关系。方法:采用生物信息学方法预测mi R-146-5p与TRAF6基因的结合位点。采用PCR技术扩增TRAF6基因3’UTR片段,并克隆至p Yr-MirTarget载体,构建野生型重组双荧光素酶报告质粒。实验分6组:①6a-5p-核苷类似物+TRAF6野生型3’-UTR共转组;②无核苷类似物对照+TRAF6野生型3’UTR共转组(对照组);③miR-146a-5p-抑制剂+TRAF6野生型;④TRAF6野生型3’-UTR转染组;⑤p Yr-MirTarget空质粒转染组;⑥正常细胞组。分别将重组荧光素酶报告质粒与miR-146-5p和核苷类似物共转染Saos-2,同时设置无核苷类似物对照、miR-146-5p抑制剂阴性对照和空载p Yr-MirTarget-W3’UTR、TRAF6-W 3’UTR及正常对照。检测6组细胞中荧光素酶活性。将核苷类似物和miR-146-5pinhibitor以及无核苷类似物对照分别转染人成骨细胞Saos-2,裂解细胞提取蛋白后采用免疫印迹检测TRAF6蛋白表达水平。结果与结论:①共转染miR-146-5p mimics的Saos-2细胞中荧光素酶活性为10.103 0±0.558 5、对照组(无核苷类似物-TRAF63’UTR)荧光素酶活性为13.1400±0.7204、抑制剂(inhibitor)组荧光素酶活性为13.707 1±0.434 8、野生型TRAF6 3’UTR质粒的Saos-2细胞中荧光素酶活性为13.202 1±0.456 5。仅转染空质粒的细胞荧光素梅活性为14.706 2±0.441 6,Saos-2细胞中荧光素酶活性本底值为1.126 4±0.126 2。共转染miR-146-5p mimics组明显降低(F=715.789,P <0.000 1),其他3组间与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05);②免疫印迹结果显示,与对照组比较,细胞转染miR-146-5p mimics后TRAF6蛋白表达水平明显下调;③结果说明,TRAF6与mi R-146-5p存在靶向关系。 展开更多
关键词 微小RNA 肿瘤坏死因子家族 双荧光素酶 TRAF6 基因 荧光素酶
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肿瘤坏死因子家族及其相关药物的研究进展 被引量:9
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作者 冯速 邱樊 +1 位作者 张壮壮 华子春 《药学进展》 CAS 2016年第4期284-292,共9页
细胞凋亡是进化保守的重要生物学过程,具有重要的生理和病理作用,如在免疫系统的发育与稳态以及多种疾病(包括肿瘤)的发生、发展、预后及治疗等过程中起重要作用。因此,近年来参与细胞凋亡信号转导的肿瘤坏死因子(TNF)/TNF受体(TNFR)家... 细胞凋亡是进化保守的重要生物学过程,具有重要的生理和病理作用,如在免疫系统的发育与稳态以及多种疾病(包括肿瘤)的发生、发展、预后及治疗等过程中起重要作用。因此,近年来参与细胞凋亡信号转导的肿瘤坏死因子(TNF)/TNF受体(TNFR)家族的重要成员TNFα/TNFR、Fas/Fas L和TRAIL/TRAILR成为重要的药物靶点,并开发出多个相关靶向药物,尤其是生物药物,其中有些在临床疗效和商业上获得巨大成功。简介参与细胞凋亡信号转导的TNF/TNFR家族重要成员,着重对其通过介导细胞凋亡而发挥的生物学作用及其相关药物研发作一综述,希望对我国的药物研发有所裨益。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子家族 细胞凋亡 药物靶点 生物药物
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Tum or necrosis factor (TNF) superfamily ligands and receptors
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作者 NI Jian 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期117-120,共4页
关键词 肿瘤坏死因子 TNF 配体 受体
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贝利木单克隆抗体:治疗系统性红斑狼疮的新型靶向药物 被引量:7
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作者 贺成美 张奉春 《协和医学杂志》 CSCD 2020年第2期130-134,共5页
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种复杂的自身免疫性疾病,B细胞异常活化在发病中起重要作用。贝利木单克隆抗体是一种人源化单克隆抗体,能通过结合肿瘤坏死因子家族B细胞活化因子(B-cell-activating factor of th... 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种复杂的自身免疫性疾病,B细胞异常活化在发病中起重要作用。贝利木单克隆抗体是一种人源化单克隆抗体,能通过结合肿瘤坏死因子家族B细胞活化因子(B-cell-activating factor of the tumor necrosis factor family,BAFF),减少活化B细胞的数量。2011年美国食品药品监督管理局批准贝利木单克隆抗体上市,为SLE患者提供了新的用药选择。本文主要介绍贝利木单克隆抗体治疗机制及相关临床研究,并对其未来进行展望。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 贝利木单克隆抗体 B淋巴细胞 肿瘤坏死因子家族B细胞活化因子
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血清MBL、BAFF与磷脂酶A2受体相关特发性膜性肾病患者肾功能及疗效的关系
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作者 任海霞 刘菊红 +2 位作者 李佳 申颖娇 李娟 《山东医药》 CAS 2024年第19期35-39,共5页
目的探讨血清甘露聚糖结合凝集素(MBL)、肿瘤坏死因子家族B细胞活化因子(BAFF)与磷脂酶A2受体(PLA2R)相关特发性膜性肾病(IMN)患者肾功能和疗效的关系。方法选取PLA2R相关IMN患者103例作为观察组,并根据疗效将PLA2R相关IMN患者分为未缓... 目的探讨血清甘露聚糖结合凝集素(MBL)、肿瘤坏死因子家族B细胞活化因子(BAFF)与磷脂酶A2受体(PLA2R)相关特发性膜性肾病(IMN)患者肾功能和疗效的关系。方法选取PLA2R相关IMN患者103例作为观察组,并根据疗效将PLA2R相关IMN患者分为未缓解组(n=44)、缓解组(n=59);同期另选健康体检志愿者67例作为对照组。收集相关资料;用酶联免疫吸法检测血清MBL、BAFF、24 h尿蛋白,PA速率微板法试剂盒检测血肌酐,计算估计肾小球滤过率(eGFR)。Spearman相关法分析PLA2R相关IMN患者血清MBL、BAFF水平与肾功能指标的相关性;多因素Logistic回归分析影响PLA2R相关IMN患者疗效的因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清MBL、BAFF对PLA2R相关IMN患者治疗未缓解的预测价值。结果观察组血清MBL、BAFF水平及24 h尿蛋白高于对照组,eGFR低于对照组(P均<0.05)。PLA2R相关IMN患者血清MBL、BAFF水平与eGFR呈负相关(r分别为-0.777、-0.760,P均<0.05),与24 h尿蛋白呈正相关(r分别为0.883、0.828,P均<0.05)。未缓解组白蛋白、eGFR低于缓解组,24 h尿蛋白、MBL、BAFF高于缓解组(P均<0.05),两组性别、年龄、血肌酐、血尿酸、血尿素氮、总胆固醇、甘油三酯、IgG、补体3和PLA2R抗体滴度比较差异无统计学意义(P均>0.05)。白蛋白和eGFR升高为PLA2R相关IMN患者疗效的独立保护因素(P均<0.05),24 h尿蛋白、MBL和BAFF升高为独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清MBL、BAFF联合预测PLA2R相关IMN患者治疗未缓解的曲线下面积(0.880)大于二者单独预测(0.791、0.787),比较差异有统计学意义(Z分别为2.694、2.613,P均<0.05)。结论血清MBL、BAFF水平升高与PLA2R相关IMN患者肾功能降低及疗效差有关,二者联合检测预测PLA2R相关IMN患者治疗未缓解的价值较高。 展开更多
关键词 磷脂酶A2受体相关特发性膜性肾病 甘露聚糖结合凝集素 肿瘤坏死因子家族B细胞活化因子 肾功能 疗效
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BAFF/BAFF-R单核苷酸多态性与移植肾功能的相关性
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作者 贾晨露 徐海燕 +1 位作者 何小舟 徐仁方 《现代免疫学》 CAS 北大核心 2023年第5期386-392,共7页
为探讨人B细胞激活因子(B cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF)及BAFF受体(BAFF-receptor,BAFF-R)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)与肾移植的相关性,随机选取肾移植受者310例和健康体检对照... 为探讨人B细胞激活因子(B cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF)及BAFF受体(BAFF-receptor,BAFF-R)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)与肾移植的相关性,随机选取肾移植受者310例和健康体检对照者51例,采集抗凝外周血和血清。选取5个BAFF/BAFF-R SNP,以Taqman qRT-PCR进行基因分型。Hardy-Weinberg平衡检验结果提示基因型分布具有群体代表性。以估算的肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate, eGFR)90 mL/(min·1.73 m^(2))为临界值,将肾移植受者分为eGFR正常组和异常组。Logistic回归分析显示,在杂合遗传模型下BAFF rs9514828 CT基因型携带者移植肾功能异常概率比其他基因型携带者显著升高(OR=1.597, 95%CI 1.012~2.519,P<0.05),与血清可溶性BAFF(soluble BAFF, sBAFF)水平和群体反应性抗体(panel reactive antibody, PRA)阳性率无显著相关性。其余4个SNP基因型在组间的差异无统计学意义。Haploview 4.0软件分析显示,BAFF rs16972194、rs9514828、rs16972197间存在强连锁不平衡。单倍体分析显示,单倍体“GCG”携带者移植肾功能正常概率显著升高(OR=0.381, 95%CI 0.156~0.931,P<0.05)。该研究提示,对肾移植受者来说,BAFF rs9514828 CT基因型可能是移植肾功能异常的风险因素,单倍体GCG可能是移植肾功能正常的保护因素。 展开更多
关键词 人B细胞激活因子 人B细胞激活因子受体 单核苷酸多态性 肾移植
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B细胞活化因子的双向性:促进调节性T细胞分泌白细胞介素-35 被引量:4
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作者 张亚敏 王瑞云 +2 位作者 李军 陶娟 涂亚庭 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第5期640-644,共5页
目的研究B细胞活化因子(B cell activation factor of the tumor necrosis factor family,BAFF)对调节性T细胞(Tregs)分泌抑制性细胞因子白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)的影响,验证系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,S... 目的研究B细胞活化因子(B cell activation factor of the tumor necrosis factor family,BAFF)对调节性T细胞(Tregs)分泌抑制性细胞因子白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)的影响,验证系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)中BAFF对免疫反应的双向调节机制。方法磁珠分选狼疮模型鼠Tregs,经BAFF刺激后采用qRT-PCR及流式细胞术检测其分泌IL-35浓度。比较正常对照鼠、狼疮模型鼠及经尾静脉注射抗BAFF蛋白后狼疮模型鼠脾脏Tregs频率及分泌IL-35情况。结果BAFF能够有效促进Tregs分泌IL-35。相对于正常对照鼠,狼疮模型鼠(血清中BAFF升高)脾脏Tregs分泌较高浓度的IL-35,而中和其循环中BAFF后,Tregs分泌IL-35减少。结论在SLE发病机制中,BAFF不仅是重要的致病因素,还能够通过促进Tregs细胞分泌IL-35发挥负向免疫调节效应。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 B细胞活化因子 调节性T细胞 白细胞介素-35
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BAFF,IL-10在干燥综合征患者血清中的表达及其意义 被引量:1
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作者 于杰 王晓东 +2 位作者 慈春增 周阳 王树刚 《潍坊医学院学报》 2015年第3期217-219,共3页
目的检测原发性干燥综合征(PSS)患者血清中人B细胞刺激因子(BAFF)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平及相关性,并探讨其与干燥综合征发病的关系。方法收集确诊为PSS患者血液标本28例为实验组,并以28例年龄与之相匹配的健康对照者血液作为... 目的检测原发性干燥综合征(PSS)患者血清中人B细胞刺激因子(BAFF)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平及相关性,并探讨其与干燥综合征发病的关系。方法收集确诊为PSS患者血液标本28例为实验组,并以28例年龄与之相匹配的健康对照者血液作为对照组。通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测对照组和实验组患者血清BAFF,IL-10表达水平,并行BAFF与IL-10指标的相关性分析。结果 PSS组血清中BAFF,IL-10表达水平明显高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);PSS组血清BAFF与IL-10表达水平呈正相关(P<0.05)。结论 BAFF,IL-10在PSS患者血清中的表达明显上调,提示两者参与PSS患者自身免疫性炎症反应过程,可以作为PSS诊断的辅助指标及治疗靶点;PSS患者血清IL-10可能上调血清BAFF的表达。 展开更多
关键词 原发性干燥综合征 B细胞刺激因子 白细胞介素-10
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MMP-9、BAFF在原发性干燥综合征患者唇腺组织中表达的相关研究
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作者 侯西倩 竺红 《宁夏医科大学学报》 2013年第4期424-427,F0004,共5页
目的探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、B细胞激活因子(B cell activatingfactor of the tumor necrosis factor family,BAFF)在原发性干燥综合征(PSS)发病过程中的作用和意义。方法采用免疫组化SP法检测50例PS... 目的探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、B细胞激活因子(B cell activatingfactor of the tumor necrosis factor family,BAFF)在原发性干燥综合征(PSS)发病过程中的作用和意义。方法采用免疫组化SP法检测50例PSS患者及30例正常对照组唇腺组织中MMP-9、BAFF的表达情况。结果50例PSS患者唇腺组织中MMP-9均阳性高表达,其表达的面积(14382.38±657.39)μm2、累积光密度(2705.46±868.76)均高于正常对照组(8445.10±361.84)μm2、(1114.26±570.82),且随着淋巴细胞浸润等级的增加,MMP-9表达增强,差异有统计学意义(P<0.05);50例PSS组患者唇腺组织中BAFF均阳性表达,其表达的面积(13586.72±1569.45)μm2、累积光密度(2073.57±850.73)均高于正常对照组(7116.83±338.19)μm2、(850.73±120.31),且随着淋巴细胞浸润等级的增加,BAFF表达增强(P<0.05);PSS组患者唇腺组织中MMP-9与BAFF的表达呈正相关(P<0.05)。结论 MMP-9、BAFF的异常表达与原发性干燥综合征患者唇腺组织的破坏有关,二者参与了PSS的发病过程。 展开更多
关键词 干燥综合征 唇腺疾病 免疫组织化学 基质金属蛋白酶-9 B细胞激活因子
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B淋巴细胞激活因子的全人源抗体对BAFF生物学活性的拮抗作用
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作者 曹萌 曹鹏 +2 位作者 张双全 程莹 颜怀江 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1336-1340,共5页
通过注射人B淋巴细胞激活因子(hsBAFF)的全人源抗体scFv-Fc,观察其对hsBAFF引发的B细胞增殖与分化的拮抗作用。将ICR小鼠随机分为对照组、hsBAFF(1 mg.kg 1)组、hsBAFF(1 mg.kg 1)+Ab(1mg.kg 1)组、hsBAFF(1 mg.kg 1)+Ab(2 mg.kg 1)组、... 通过注射人B淋巴细胞激活因子(hsBAFF)的全人源抗体scFv-Fc,观察其对hsBAFF引发的B细胞增殖与分化的拮抗作用。将ICR小鼠随机分为对照组、hsBAFF(1 mg.kg 1)组、hsBAFF(1 mg.kg 1)+Ab(1mg.kg 1)组、hsBAFF(1 mg.kg 1)+Ab(2 mg.kg 1)组、hsBAFF(1 mg.kg 1)+human IgG(1 mg.kg 1)组和hsBAFF(1 mg.kg 1)+human IgG(2 mg.kg 1)组。采用MTT、ELISA及流式细胞检测,分别考察各组小鼠脾脏指数、脾脏B淋巴细胞增殖活性及成熟分化和血浆中抗体水平。结果表明:通过注射scFv-Fc有效抑制了hsBAFF引起的脾脏B细胞增殖以及血浆中抗体水平的升高;同时scFv-Fc也显著抑制了hsBAFF引发的B细胞成熟分化,具有潜在的抗体药物开发价值。 展开更多
关键词 B淋巴细胞激活因子 人源性抗体 自身免疫性疾病 免疫治疗
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TNF-α诱导的人肺动脉内皮细胞GITRL的表达及意义
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作者 顾镭 徐凌霄 +3 位作者 冯小可 王嫱 张缪佳 王虹 《江苏医药》 CAS 2015年第1期1-3,共3页
目的研究糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关蛋白配体(GITRL)在TNF-α诱导的人肺动脉内皮细胞(HPAECs)中的表达及意义。方法原代培养HPAECs,分别加入TNF-α0、5、10、20ng/ml培养2、12、24、48、72h后,采用RT-PCR和Western blot... 目的研究糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关蛋白配体(GITRL)在TNF-α诱导的人肺动脉内皮细胞(HPAECs)中的表达及意义。方法原代培养HPAECs,分别加入TNF-α0、5、10、20ng/ml培养2、12、24、48、72h后,采用RT-PCR和Western blot分别检测GITRL mRNA和蛋白表达,ELISA法检测GITRL在细胞上清液中的表达水平。结果 TNF-α呈浓度和时间依赖性地促进GITRL mRNA及其蛋白和上清液GITRL表达水平,其中TNF-α浓度为10ng/ml、培养时间为72h时的表达量最高(P<0.05或P<0.01)。结论 GITRL在TNF-α诱导的HPAECs中表达增加,提示GITR/GITRL可能参与HPAECs的损伤机制,在肺动脉高压的发病过程中起重要作用。 展开更多
关键词 糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关蛋白配体 人肺动脉内皮细胞
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