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CNP/NPR-B效应轴与NPR-C/NEP清除途径在大鼠梗阻肾脏的表达 被引量:1
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作者 赵雪奇 汪婧 +2 位作者 孔海波 胡波 胡鹏 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期170-177,共8页
目的研究C-型利钠肽(CNP)/B-型利钠肽受体(NPR-B)效应轴与C-型利钠肽受体(NPR-C)/中性肽链内切酶(NEP)清除途径在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏的表达情况。方法原位杂交、荧光定量PCR、免疫组化和Western blot检测UUO大鼠术后24 h、72 h... 目的研究C-型利钠肽(CNP)/B-型利钠肽受体(NPR-B)效应轴与C-型利钠肽受体(NPR-C)/中性肽链内切酶(NEP)清除途径在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏的表达情况。方法原位杂交、荧光定量PCR、免疫组化和Western blot检测UUO大鼠术后24 h、72 h、1周、2周、3周、1个月、2个月和3个月时肾脏CNP、NPR-B、NPR-C、NEP及IV型胶原mRNA和蛋白的表达情况。结果 CNP主要表达于肾小管上皮细胞,在梗阻后即刻显著增加,随疾病进展增幅逐渐衰减。CNP高表达主要归因于UUO早期NPR-B表达上调。结论 NEP和NPR参与肾小管间质纤维化病程中CNP表达调控;NPR-C和NEP表达渐增是导致CNP增幅降低的可能原因。 展开更多
关键词 C-型利钠肽 利钠肽受体 中性肽链内切酶 肾小管间质纤维化 单侧输尿管梗阻
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EPO干预后人脐带间充质干细胞对人肾小管上皮细胞纤维化及归巢能力的影响
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作者 蒋红樱 张春秀 +4 位作者 李晶 贺婷 李萌 雷蕾 白彝华 《山东医药》 CAS 2021年第26期15-20,共6页
目的探讨促红细胞生成素(EPO)干预的人脐带间充质干细胞(HUMSCs)对人肾小管上皮细胞株(HK-2)纤维化过程的影响。方法取HUMSCs和HK-2细胞,分别进行培养。采用Transwell实验和MTT法筛选EPO干预HUMSCs迁移和增殖的最佳浓度为100 IU/mL,采用... 目的探讨促红细胞生成素(EPO)干预的人脐带间充质干细胞(HUMSCs)对人肾小管上皮细胞株(HK-2)纤维化过程的影响。方法取HUMSCs和HK-2细胞,分别进行培养。采用Transwell实验和MTT法筛选EPO干预HUMSCs迁移和增殖的最佳浓度为100 IU/mL,采用RT-PCR法和Westernblotting法筛选转化生长因子β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞纤维化的最佳浓度为10μg/L。采用Transwell体系进行细胞共培养,将HK-2细胞分为4组,对照组:上室内为单纯培养基,下室内为HK-2细胞和培养基;TGF-β1组:上室内为单纯培养基,下室内为HK-2细胞加入含10μg/L TGF-β1的培养基;HUMSCs干预组:上室内为HUMSCs和培养基,下室内为HK-2细胞加入含10μg/L TGF-β1的培养基;EPO+HUMSCs干预组:上室内为HUMSCs加入含100 IU/mLEPO的培养基,下室内为HK-2细胞加入含10μg/L TGF-β1的培养基。培养72 h后,在显微镜下观察细胞的形态和生长情况,并计数穿膜细胞数。采用RT-PCR法检测HK-2细胞中纤维化因子TGF-β1、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及归巢因子基质细胞衍生因子(SDF-1)及其受体CXCR4、干细胞因子(SCF)及其受体c-KitmRNA的相对表达量,Westernblotting法测定上述纤维化因子和归巢因子蛋白的相对表达量。结果与对照组比较,TGF-β1组HK-2细胞失去了上皮细胞的形态,形成了具有迁移能力的上皮样细胞和肌成纤维细胞。与对照组比较,TGF-β1组、HUMSCs干预组、EPO+HUMSCs干预组细胞迁移数量均增加,EPO+HUMSCs干预组细胞迁移数量较HUMSCs干预组和TGF-β1组减少(P均<0.01)。与对照组比较,TGF-β1组细胞TGF-β1、FN、ColⅣ、α-SMA、CXCR4、SDF-1、c-Kit、SCFmRNA及蛋白表达水平最高,HUMSCs干预组次之,EPO+HUMSCs干预组最低(P<0.05或<0.01)。结论EPO可促进HUMSCs的增殖和迁移,将HUMSCs定向迁移至受损的HK-2,抑制HK-2分化成具有迁徙能力的无功能的上皮样细胞,从而延缓肾小管上皮细胞的纤� 展开更多
关键词 促红细胞生成素 间充质干细胞 肾小管上皮细胞 肾小管间质纤维化 细胞归巢 细胞增殖 细胞迁移
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