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γ-谷氨酰转肽酶的性质及其应用进展 被引量:7
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作者 孟佩佩 刘冬英 +1 位作者 蒋敏丽 胡立勇 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期105-110,共6页
γ-谷氨酰转肽酶是广泛存在于生物体内,参与谷胱甘肽循环和氨基酸跨膜转运的异二聚体酶,它能专一性地催化γ-谷氨酰基的转移,具有转肽、自转肽、水解3种催化作用。随着生物技术的发展,γ-GTP酶的应用在生物催化方面开始备受关注,利用其... γ-谷氨酰转肽酶是广泛存在于生物体内,参与谷胱甘肽循环和氨基酸跨膜转运的异二聚体酶,它能专一性地催化γ-谷氨酰基的转移,具有转肽、自转肽、水解3种催化作用。随着生物技术的发展,γ-GTP酶的应用在生物催化方面开始备受关注,利用其对谷氨酰基的催化水解和转肽特性可以催化合成多种γ-谷氨酰化合物,如改善了苦味的L-γ-谷氨酰-缬氨酸,增强了水溶性的L-γ-谷氨酰-胱氨酸,具有生物学活性的茶氨酸,这使得γ-GTP酶在生物医药、保健品及食品生产工业方面具有很好的发展应用前景。 展开更多
关键词 γ-谷氧酰转肽酶 转肽 生物催化 γ-谷氧酰化合物
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重组人胰岛素制备过程中转肽工艺的研究 被引量:4
2
作者 肖拥军 曹春来 +2 位作者 谭叶林 陈虹霖 夏玉平 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第22期4206-4209,4266,共5页
目的:酵母表达体系制备重组人胰岛素的工艺中,转肽反应属于酶促半合成反应,过程复杂,成本高昂,通过实验研究提高反应效率,降低反应成本。方法:通过优化转肽反应中胰蛋白酶和双保护苏氨酸(Thr(But)OBut)的比例,寻找有利的反应条件,为进... 目的:酵母表达体系制备重组人胰岛素的工艺中,转肽反应属于酶促半合成反应,过程复杂,成本高昂,通过实验研究提高反应效率,降低反应成本。方法:通过优化转肽反应中胰蛋白酶和双保护苏氨酸(Thr(But)OBut)的比例,寻找有利的反应条件,为进一步的条件确定奠定基础;从提高转肽反应物的反应效率出发,调整工艺顺序,将一步转肽反应调整为两步转肽反应;以胰蛋白酶和双保护苏氨酸两种反应物,进行综合成本分析比较;同时采用药典方法测定两种不同工艺制备的重组人胰岛素,进行生物活性的比较分析。结果:通过实验研究,一步转肽反应的收率最高可以达到74%,而两步转肽收率的收率最高可以达到90%;两步转肽反应相比一步转肽反应,酶量减少70%,双保护苏氨酸的使用量降低62.5%,同时提高了转肽反应中胰岛素原的反应浓度,达到12.5 mM,有着进一步开发的潜质;生物活性测定两种工艺生产的重组人胰岛素均符合中国药典的要求。结论:两步转肽反应对比一步转肽反应,提高了反应效率,产物的纯度较高,降低了反应的成本,有利于提高国产胰岛素的市场竞争力。 展开更多
关键词 转肽反应 重组人胰岛素 工艺研究 成本分析
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Clinical Isolates of Staphylococcus aureus Show Variation in β-Lactamase Production and Are More Susceptible to Antibiotics Conjugated with β-Lactamase Inhibitors
3
作者 Uzal Umar Umar Ahmed Faruk +1 位作者 Damoroem M. Tanko Mohammed B. Yerima 《Open Journal of Medical Microbiology》 2016年第4期143-149,共7页
β-Lactam antibiotics are a cornerstone in the treatment of bacterial infections on account of its high therapeutic index and selective toxicity—they act by inhibiting the biosynthesis of peptidoglycan, a key compone... β-Lactam antibiotics are a cornerstone in the treatment of bacterial infections on account of its high therapeutic index and selective toxicity—they act by inhibiting the biosynthesis of peptidoglycan, a key component in bacterial cell wall. Ninety (90) clinical specimens obtained from the microbiology unit Specialist Hospital Bauchi were screened for S. aureus, positive isolates were examined for β-Lactamase expression by using two Penicillin G concentrations (5000 IU/ml and 25,000 IU/ml) in acidometric agar technique with phenol red as indicator, and the susceptibility pattern of the isolates to β-Lactam antibiotics was also determined. S. aureus prevalence of 31% (28/90) was obtained, of which 96% (27/28) of strains were β-Lactamase positive in the standard test, while 63% (17/27) were able to hydrolyze penicillin G concentration of 25,000 IU/ml (5X the concentration in the standard test), and a strain was found to be β-Lactamase negative. The resistance to five β-Lactams, ampicillin, cephalexin, amoxicillin, cloxacillin and flucloxaillin, were 100%, 96%, 89%, 74% and 56% respectively. When ampicillin and amoxicillin were conjugated to β-Lactamase inhibitors sulbactam and clavulanic acid respectively the resistance to ampicillin decreased to 21% and to amoxicillin to 15%. The antibiotic susceptibility profile revealed β-Lactamase elaboration to be the major mechanism of resistance to the β-Lactams. β-Lactam utilization as therapeutic option would thus require the search for sensitive irreversible β-Lactamase inhibitors for the β-Lactamase enzymes or agents to block the release of β-Lactamase by strains. 展开更多
关键词 Β-LACTAMASE PEPTIDOGLYCAN transpeptidation HAEMOLYSIS Resistance ANTIBIOTICS
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两种谷氨酰胺酶的酶学特性研究 被引量:3
4
作者 卢慧茵 王炜 崔春 《中国调味品》 CAS 北大核心 2018年第10期1-4,10,共5页
以2种常见的谷氨酰胺酶作为研究对象,利用离子选择电极法测定谷氨酰胺酶的水解活性和转肽活性,探究不同pH、温度、盐含量对谷氨酰胺酶的水解活性及转肽活性的影响。研究结果表明:厂家一谷氨酰胺酶催化水解反应的最适pH为7.0,最适温度为5... 以2种常见的谷氨酰胺酶作为研究对象,利用离子选择电极法测定谷氨酰胺酶的水解活性和转肽活性,探究不同pH、温度、盐含量对谷氨酰胺酶的水解活性及转肽活性的影响。研究结果表明:厂家一谷氨酰胺酶催化水解反应的最适pH为7.0,最适温度为50℃,催化转肽反应的最适pH为10.0,最适温度为50℃;厂家二谷氨酰胺酶催化水解反应的最适pH为7.0,最适温度为45℃,催化转肽反应的最适pH为9.0,最适温度为45℃。同时,谷氨酰胺酶表现水解活性时具有较好的耐盐性,但其转肽活性随盐含量的增加而下降。该研究结果可为谷氨酰胺酶的产业化应用提供理论指导。 展开更多
关键词 谷氨酰胺酶 影响因素 水解 转肽 酶活
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一种水相反应制备胰岛素衍生物的方法
5
作者 惠长野 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1028-1030,共3页
目的建立一种简易的制备去B30及去B23-30肽胰岛素的方法。方法在转肽方法基础上,改变胰蛋白酶反应条件,在水相反应系统中,使得小C肽猪胰岛素原生成去B30及去B23-30肽胰岛素。阴离子交换层析进行产物分离,并结合HPLC纯度分析及质谱鉴定... 目的建立一种简易的制备去B30及去B23-30肽胰岛素的方法。方法在转肽方法基础上,改变胰蛋白酶反应条件,在水相反应系统中,使得小C肽猪胰岛素原生成去B30及去B23-30肽胰岛素。阴离子交换层析进行产物分离,并结合HPLC纯度分析及质谱鉴定。结果胰蛋白酶催化猪胰岛素原生成去B30及去B23-30肽胰岛素。离子交换层析可以对两者进行基线分离。结论成功建立了一种制备胰岛素衍生物的方法,并对产物进行有效纯化。 展开更多
关键词 转肽 去B30胰岛素 去B23-30肽胰岛素
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γ-谷氨酰转肽酶及其应用 被引量:14
6
作者 荀志金 贺忠 +1 位作者 张征 徐虹 《南京工业大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第4期106-110,共5页
γ-谷氨酰转肽酶(EC2 3 2 2,γ-GT)在生物体内分布相当广泛,从细菌到哺乳动物体内都有它的存在。该酶能催化3种类型的反应、转肽反应,自转肽反应和γ-谷氨酰基的水解反应。γ-GT在临床检测中可作为生物标志物,已经用作肝脏和其他疾病的... γ-谷氨酰转肽酶(EC2 3 2 2,γ-GT)在生物体内分布相当广泛,从细菌到哺乳动物体内都有它的存在。该酶能催化3种类型的反应、转肽反应,自转肽反应和γ-谷氨酰基的水解反应。γ-GT在临床检测中可作为生物标志物,已经用作肝脏和其他疾病的常规检测指标。该酶在生物催化合成中也有相当重要的应用,利用此酶可以合成多种含γ-谷氨酰基的化合物。 展开更多
关键词 Γ-谷氨酰转肽酶 转肽反应 水解反应 运输作用 药物
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γ-谷氨酰转肽酶的酶学性质及其转肽反应机制 被引量:12
7
作者 汪前 姚忠 +3 位作者 荀志金 徐晓滢 徐虹 韦萍 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期288-293,共6页
γ–谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,GGT)能专一地催化γ-谷氨酰基的转移,在γ-谷氨酰基类衍生物的合成方面具有重要的应用价值。今利用Bacillus subtilis NX-2发酵生产GGT,上清液中的GGT经硫酸铵沉淀后,以DEAE Sepharose FF和... γ–谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,GGT)能专一地催化γ-谷氨酰基的转移,在γ-谷氨酰基类衍生物的合成方面具有重要的应用价值。今利用Bacillus subtilis NX-2发酵生产GGT,上清液中的GGT经硫酸铵沉淀后,以DEAE Sepharose FF和Source15Q两步离子交换进行纯化。以γ-D-Gln-L-Trp(SCV-07)为目的产物,研究了GGT的基本酶学性质,确定了其最适反应温度为40℃,最适pH值10.0,供体/受体浓度为5:7,最适反应时间为4h,产物转化率可高达42%。结合反应进程曲线,分析了GGT的作用机制,并通过实验证实了GGT不仅具有转肽活性,还可催化产物的不可逆水解,这是导致产物回收率下降的关键原因。经测定得到GGT的转肽反应米氏常数(Km)为5.08mmol·L-1,最大反应速率(rmax)为0.034mmol·(min·L)-1;对γ-D-Gln-L-Trp的水解反应米氏常数(Km’)为2.267mmol·L-1,最大反应速率(rmax’)为0.012mmol·(min·L)-1。 展开更多
关键词 Γ-谷氨酰转肽酶 纯化 性质 γ-D-谷氨酰-L-色氨酸 转肽反应机制
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转肽酶Sortase A在蛋白质修饰中的应用 被引量:3
8
作者 谭祥龙 许玲 +1 位作者 石景 李宜明 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1741-1751,共11页
近年来,发展蛋白质与多肽的化学选择性连接与修饰方法已成为化学生物学的研究热点。这类方法可以在很大程度上弥补基因工程技术无法制备翻译后修饰蛋白与人工改造蛋白的缺陷,得到目前无法通过生物表达的功能蛋白。20世纪90年代末,人们... 近年来,发展蛋白质与多肽的化学选择性连接与修饰方法已成为化学生物学的研究热点。这类方法可以在很大程度上弥补基因工程技术无法制备翻译后修饰蛋白与人工改造蛋白的缺陷,得到目前无法通过生物表达的功能蛋白。20世纪90年代末,人们从金黄色葡萄球菌中分离得到转肽酶Sortase A,它能够选择性识别特异性多肽序列LPXTG,并在特定位点切断氨基酸的肽键进而将其与一个新的肽链连接。该特性使Sortase A有望成为一种高效、通用的蛋白质修饰的工具。与传统的化学合成相比,Sortase催化的化学半合成方法,可以较好的解决化学合成蛋白的尺寸问题。本文就近年来Sortase A在蛋白质修饰及合成中的研究进展进行简要综述。 展开更多
关键词 转肽酶Sortase A 生物正交反应 转肽反应 特异性 蛋白质修饰
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蛋白质环化的研究进展 被引量:3
9
作者 王心哲 张光亚 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期430-439,共10页
天然蛋白质在生物体内主要以线性形式存在,由于多数蛋白质(酶)热稳定性较差,制约了其在工业催化、食品制造、医药领域的高效应用。自然界中发现的天然环肽类物质具有首尾相连的环化结构,使蛋白质具有较高的稳定性,为改造酶的结构、提高... 天然蛋白质在生物体内主要以线性形式存在,由于多数蛋白质(酶)热稳定性较差,制约了其在工业催化、食品制造、医药领域的高效应用。自然界中发现的天然环肽类物质具有首尾相连的环化结构,使蛋白质具有较高的稳定性,为改造酶的结构、提高其热稳定性及拓宽其应用范围提供了新思路。本文根据国内外在蛋白质环化领域的新动态并结合本实验室的研究,系统介绍了内含肽介导的蛋白质反式剪接、表达蛋白连接、转肽酶催化的转肽作用等几种传统蛋白质环化方法,着重介绍了基于新型超强分子粘合剂Spy Tag/Spy Catcher介导的蛋白质环化的研究。 展开更多
关键词 蛋白质反式剪接 表达蛋白连接 转肽作用 光催化内含肽 SPY Tag/Spy Catcher
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蛋白水解酶转肽使猪胰岛素转成人胰岛素 被引量:2
10
作者 杨纪庆 林志新 俞吉安 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第2期96-99,共4页
利用赖氨酸专一性的蛋白水解酶(Lyticusprotease)进行了酶促人胰岛素半合成反应,猪胰岛素经该酶切去B链羧基端丙氨酸形成去丙氨酸胰岛素DAI(DeletionAlanineIn-sulin).进一步在水/有... 利用赖氨酸专一性的蛋白水解酶(Lyticusprotease)进行了酶促人胰岛素半合成反应,猪胰岛素经该酶切去B链羧基端丙氨酸形成去丙氨酸胰岛素DAI(DeletionAlanineIn-sulin).进一步在水/有机溶剂介质中该酶的转肽反应,使B链生成苏氨酸叔丁酯羧基末端,水解去酯后产生人胰岛素.研究了转肽反应的最佳条件.转肽反应生成的人胰岛素具有较强的生物活性. 展开更多
关键词 去丙氨酸胰岛素 转肽 胰岛素 蛋白水解酶
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用胰酶转肽的方法使人胰岛素原转成人胰岛素 被引量:1
11
作者 唐建国 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期355-360,共6页
在猪胰岛素酶转肽成人胰岛素的相似条件下,基因工和生产的人胰岛素原可以50%的产率转成人胰岛素,所得人胰岛的氨基酸与理论值相符,并具有天然活力。
关键词 人类 胰岛素原 胰岛素 胰酶转肽
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贝伐珠单抗结合XELOX、FOLFOX6方案治疗转移性结直肠癌的疗效对比及其对患者肝肾功能的影响 被引量:7
12
作者 陈晓莉 杜书章 +2 位作者 张瑞 孙明扬 陈哲 《中国合理用药探索》 CAS 2021年第3期45-49,共5页
目的:探究贝伐珠单抗结合卡培他滨联合奥沙利铂(XELOX)、亚叶酸钙和氟尿嘧啶联合奥沙利铂(FOLFOX6)方案治疗转移性结直肠癌(CRC)的疗效及其对患者肝肾功能的影响。方法:选取2018年1月~2020年6月就诊于本院的150例转移性CRC患者作为研究... 目的:探究贝伐珠单抗结合卡培他滨联合奥沙利铂(XELOX)、亚叶酸钙和氟尿嘧啶联合奥沙利铂(FOLFOX6)方案治疗转移性结直肠癌(CRC)的疗效及其对患者肝肾功能的影响。方法:选取2018年1月~2020年6月就诊于本院的150例转移性CRC患者作为研究对象,根据不同治疗方案分为贝伐珠单抗组、XELOX组和FOLFOX6组,各50例。贝伐珠单抗组采用贝伐珠单抗治疗,XELOX组采用贝伐珠单抗结合XELOX方案,FOLFOX6组采用贝伐珠单抗结合FOLFOX6方案,均治疗28天。观察并比较3组临床疗效、XELOX组和FOLFOX6组治疗前和治疗后肝肾功能指标[谷氨酰转肽酶(GT)、谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(Cre)]水平,以及治疗期间不良反应发生情况。结果:XELOX组和FOLFOX6组临床疗效均高于贝伐珠单抗组,有统计学差异(P <0.05),但XELOX组和FOLFOX6组比较无统计学差异(P> 0.05)。治疗后,XELOX组和FOLFOX6组GT、ALT、Cre水平有所升高,但与治疗前相比无统计学差异(P> 0.05),组间比较也无统计学差异(P>0.05)。XELOX组和FOLFOX6组口腔炎发生率比较无统计学差异(P> 0.05);XELOX组恶心呕吐、白细胞降低发生率低于FOLFOX6组,腹泻、周围神经毒性发生率高于FOLFOX6组,有统计学差异(P <0.05)。结论:贝伐珠单抗结合XELOX、FOLFOX6方案均可有效治疗转移性CRC,其疗效相当,血清GT、ALT、Cre水平也无统计学差异,不良反应发生情况略有差异。 展开更多
关键词 贝伐珠单抗 卡培他滨联合奥沙利铂方案 亚叶酸钙和氟尿嘧啶联合奥沙利铂方案 转移性结直肠癌 谷氨酰转肽酶 谷丙转氨酶 肌酐
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γ-谷氨酰转肽酶的催化特性及其在食品领域应用研究进展
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作者 张柯铭 罗茜 +3 位作者 魏夏森 万嗣宝 高海燕 秦臻 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期304-313,共10页
γ-谷氨酰转肽酶广泛存在于生物体中,可以专一性催化γ-谷氨酰基的转移反应,参与生物体内谷胱甘肽代谢和γ-谷氨酰基循环等生理过程。随着食品酶学、合成生物学技术的发展,γ-谷氨酰转肽酶在生物催化领域的应用也日渐受到重视。基于其... γ-谷氨酰转肽酶广泛存在于生物体中,可以专一性催化γ-谷氨酰基的转移反应,参与生物体内谷胱甘肽代谢和γ-谷氨酰基循环等生理过程。随着食品酶学、合成生物学技术的发展,γ-谷氨酰转肽酶在生物催化领域的应用也日渐受到重视。基于其水解和转肽催化活性,γ-谷氨酰转肽酶可被应用于茶氨酸等多种γ-谷氨酰化合物的生物催化合成。利用酶工程手段进一步优化γ-谷氨酰转肽酶的催化特性,提高目标产物产率,使得γ-谷氨酰转肽酶在食品功能因子的绿色生物制造领域具有较好的应用前景。文章综述了γ-谷氨酰转肽酶的分子结构、催化机制及其在食品工业中的应用现状,并重点关注γ-谷氨酰转肽酶的分子改造及其在催化合成L-茶氨酸领域的应用,以期为γ-谷氨酰转肽酶在食品领域的研究及应用提供参考。 展开更多
关键词 Γ-谷氨酰转肽酶 转肽反应 生物催化 茶氨酸 食品酶工程
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