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线粒体内膜转位酶13调控肝星状细胞活化和增殖的实验研究
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作者 阮仙仙 廖晓敏 +2 位作者 邓哲君 韦大福 姜海行 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第5期756-761,共6页
目的:研究线粒体内膜转位酶13(TIMM13)的表达对小鼠肝星状细胞活化和增殖的影响,探讨TIMM13在肝纤维化的的进展中的作用。方法:用5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL转化生长因子-β1(TGF-β1)作用小鼠肝星状细胞系JS-1细胞24 h,诱导JS-1细胞... 目的:研究线粒体内膜转位酶13(TIMM13)的表达对小鼠肝星状细胞活化和增殖的影响,探讨TIMM13在肝纤维化的的进展中的作用。方法:用5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL转化生长因子-β1(TGF-β1)作用小鼠肝星状细胞系JS-1细胞24 h,诱导JS-1细胞活化,实验分为对照组(0 ng/mL组)、5 ng/mL组、10 ng/mL组、20 ng/mL组;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹(western blotting)法检测各组TIMM13、肝纤维化指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(COL1A1)的mRNA与蛋白表达水平;在JS-1细胞中分别敲低和过表达TIMM13,将实验分为空载组(对照组)和沉默组/过表达组,用RTqPCR和western blotting法检测TIMM13、α-SMA和COL1A1的mRNA与蛋白表达水平,用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测沉默/过表达TIMM13的第0、第24、第48和第72小时细胞的增殖情况。结果:与对照组比较,5 ng/mL组、10 ng/mL组、20 ng/mL组中TIMM13的mRNA表达升高(均P<0.05),5 ng/mL组、10 ng/mL组中TIMM13蛋白表达水平增高(均P<0.05);沉默组中TIMM13、α-SMA和COL1A1的mRNA表达水平相对于对照组降低(均P<0.01),TIMM13和α-SMA的蛋白表达水平降低(均P<0.01),在第48小时和第72小时JS-1细胞增殖能力被明显抑制(均P<0.05),而过表达组中TIMM13、α-SMA和COL1A1的mRNA表达水平升高(均P<0.05),TIMM13和α-SMA的蛋白表达水平升高(均P<0.05),在第48小时和第72小时促进了JS-1细胞的增殖能力(均P<0.05)。结论:TIMM13的表达促进小鼠肝星状细胞的活化和增殖,进而促进了肝纤维化的发展。 展开更多
关键词 线粒体内膜转位酶13 肝星状细胞 细胞活化 细胞增殖 肝纤维化
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