为提供制备抗病转基因山羊核供体细胞,研究Toll样受体9(Toll like receptor 9,TLR9)对山羊抗病性能的影响,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从山羊外周血单核细胞中克隆了TLR9基因,并对其遗传进化关系及分子结构特征进行了分析,...为提供制备抗病转基因山羊核供体细胞,研究Toll样受体9(Toll like receptor 9,TLR9)对山羊抗病性能的影响,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从山羊外周血单核细胞中克隆了TLR9基因,并对其遗传进化关系及分子结构特征进行了分析,发现克隆的基因具有Toll样受体家族的典型结构特征,其遗传进化关系与物种亲缘关系密切相关。将克隆的山羊TLR9基因亚克隆至pIRES2-EGFP真核表达载体,转染山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选以及阳性细胞基因组PCR鉴定和荧光观察证实,外源TLR9基因确已稳定整合入转染阳性细胞克隆基因组中并获得表达。成功建立了稳定表达外源TLR9的山羊胎儿成纤维细胞系,为培育抗病转基因山羊奠定了基础。展开更多
【目的】揭示奶粉制备过程对转基因山羊乳汁中表达的重组人溶菌酶(recombinant human lysozyme,rhLYZ)的影响。【方法】对表达有2mg/mL rhLYZ的转基因山羊乳汁进行了喷雾干燥,对获得的奶粉样品进行了溶解性,乳汁成分,蛋白组分以及溶菌...【目的】揭示奶粉制备过程对转基因山羊乳汁中表达的重组人溶菌酶(recombinant human lysozyme,rhLYZ)的影响。【方法】对表达有2mg/mL rhLYZ的转基因山羊乳汁进行了喷雾干燥,对获得的奶粉样品进行了溶解性,乳汁成分,蛋白组分以及溶菌酶活性的测定,对测定结果进行统计分析。【结果】喷雾干燥引发非脂固形物的损失率为42.05%;整个热处理过程引发可溶性蛋白损失率为25.3%;乳汁中rhLYZ的损失为51.1%,扣除总干物质的损耗,喷雾干燥过程引发了约17.7%的rhLYZ生物学活性损失。【结论】制备奶粉过程对转基因山羊乳汁中表达的人溶菌酶影响较小,喷雾干燥是人溶菌酶羊奶的一种可行的保存和加工方式。展开更多
文摘为提供制备抗病转基因山羊核供体细胞,研究Toll样受体9(Toll like receptor 9,TLR9)对山羊抗病性能的影响,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从山羊外周血单核细胞中克隆了TLR9基因,并对其遗传进化关系及分子结构特征进行了分析,发现克隆的基因具有Toll样受体家族的典型结构特征,其遗传进化关系与物种亲缘关系密切相关。将克隆的山羊TLR9基因亚克隆至pIRES2-EGFP真核表达载体,转染山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选以及阳性细胞基因组PCR鉴定和荧光观察证实,外源TLR9基因确已稳定整合入转染阳性细胞克隆基因组中并获得表达。成功建立了稳定表达外源TLR9的山羊胎儿成纤维细胞系,为培育抗病转基因山羊奠定了基础。
文摘【目的】揭示奶粉制备过程对转基因山羊乳汁中表达的重组人溶菌酶(recombinant human lysozyme,rhLYZ)的影响。【方法】对表达有2mg/mL rhLYZ的转基因山羊乳汁进行了喷雾干燥,对获得的奶粉样品进行了溶解性,乳汁成分,蛋白组分以及溶菌酶活性的测定,对测定结果进行统计分析。【结果】喷雾干燥引发非脂固形物的损失率为42.05%;整个热处理过程引发可溶性蛋白损失率为25.3%;乳汁中rhLYZ的损失为51.1%,扣除总干物质的损耗,喷雾干燥过程引发了约17.7%的rhLYZ生物学活性损失。【结论】制备奶粉过程对转基因山羊乳汁中表达的人溶菌酶影响较小,喷雾干燥是人溶菌酶羊奶的一种可行的保存和加工方式。
