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转录组研究新技术:RNA-Seq及其应用 被引量:205
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作者 祁云霞 刘永斌 荣威恒 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1191-1202,共12页
转录组是特定组织或细胞在某一发育阶段或功能状态下转录出来的所有RNA的集合。转录组研究能够从整体水平研究基因功能以及基因结构,揭示特定生物学过程以及疾病发生过程中的分子机理。RNA-Seq作为一种新的高效、快捷的转录组研究手段... 转录组是特定组织或细胞在某一发育阶段或功能状态下转录出来的所有RNA的集合。转录组研究能够从整体水平研究基因功能以及基因结构,揭示特定生物学过程以及疾病发生过程中的分子机理。RNA-Seq作为一种新的高效、快捷的转录组研究手段正在改变着人们对转录组的认识。RNA-Seq利用高通量测序技术对组织或细胞中所有RNA反转录而成的cDNA文库进行测序,通过统计相关读段(reads)数计算出不同RNA的表达量,发现新的转录本;如果有基因组参考序列,可以把转录本映射回基因组,确定转录本位置、剪切情况等更为全面的遗传信息,已广泛应用于生物学研究、医学研究、临床研究和药物研发等。文章主要介绍了RNA-Seq原理、技术特点及其应用,并就RNA-Seq技术面临的挑战和未来发展前景进行了讨论,为今后该技术的研究与应用提供参考。 展开更多
关键词 RNA-SEQ 转录组 新一代测序技术
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基于杜仲转录组序列的SSR分子标记的开发 被引量:115
2
作者 黄海燕 杜红岩 +1 位作者 乌云塔娜 刘攀峰 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第5期176-181,共6页
简单重复序列(simple sequence repeat,SSR),又称微卫星,是广泛存在于真核和原核生物基因组中的1~6个核苷酸串联重复单元,研究发现基因组中平均每50kb就有1个SSR(Morgante et al.,1993;Kalia et al.,2011),SSR标记主要包括基因组SS... 简单重复序列(simple sequence repeat,SSR),又称微卫星,是广泛存在于真核和原核生物基因组中的1~6个核苷酸串联重复单元,研究发现基因组中平均每50kb就有1个SSR(Morgante et al.,1993;Kalia et al.,2011),SSR标记主要包括基因组SSR和表达序列标签SSR(EST-SSR)。 展开更多
关键词 杜仲 转录组 SSR 引物
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刺梨转录组SSR信息分析及其分子标记开发 被引量:108
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作者 鄢秀芹 鲁敏 安华明 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期341-349,共9页
利用MISA软件筛选刺梨(Rosa roxburghii Tratt)转录组测序获得的106 590条Unigene,共检测出21 711个SSR位点,分布于18 155条Unigene中,出现频率为20.37%,平均分布距离为1.68 kb。优势重复基序为三核苷酸、四核苷酸和二核苷酸,分别占总SS... 利用MISA软件筛选刺梨(Rosa roxburghii Tratt)转录组测序获得的106 590条Unigene,共检测出21 711个SSR位点,分布于18 155条Unigene中,出现频率为20.37%,平均分布距离为1.68 kb。优势重复基序为三核苷酸、四核苷酸和二核苷酸,分别占总SSR位点的26.87%、26.77%和24.93%。AG/CT与AAG/CTT分别是二核苷酸与三核苷酸的优势重复基元,分别占总SSR重复类型的17.80%和11.55%。以不同主导重复基元类型设计合成42对SSR引物,并以刺梨及其他蔷薇属种质的基因组DNA为模板对其有效性及通用性进行初步验证,筛选出具有清晰扩增产物的引物23对,并且均在同属材料中通用。选取16份贵州刺梨资源对筛选出的引物进行多态性检测,获得12对具有多态性的引物。以上结果表明,刺梨转录组测序产生的Unigene信息可作为开发SSR标记的有效来源,获得的大批量SSR标记可为刺梨及其近缘种的遗传多样性分析和遗传图谱构建提供更加丰富可靠的标记选择。 展开更多
关键词 刺梨 SSR 转录组
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基于高通量测序454 GS FLX的丹参转录组学研究 被引量:91
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作者 李滢 孙超 +3 位作者 罗红梅 李西文 牛云云 陈士林 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期524-529,共6页
本研究应用新一代高通量测序技术454GS FLX Titanium对2年生丹参根的转录组进行测序,研究其基因表达谱,挖掘其功能基因。获得46722表达序列标签(express sequence tags,EST),序列平均长度414bp,与Sanger测序的长度相当。所得序列与GenB... 本研究应用新一代高通量测序技术454GS FLX Titanium对2年生丹参根的转录组进行测序,研究其基因表达谱,挖掘其功能基因。获得46722表达序列标签(express sequence tags,EST),序列平均长度414bp,与Sanger测序的长度相当。所得序列与GenBank丹参EST合并拼接,获得18235条unigene,其中,454高通量测序发现了13980条新的unigene。数据库中的序列同源性比较表明,其中73.0%(13308条)与其他生物的已知基因具有不同程度的同源性。通过BLAST与Gene Ontology分析获得了可能参与丹参酮合成的序列27条(编码15个关键酶),参与丹酚酸合成的序列29条(编码11个关键酶),细胞色素P450序列70条,转录因子序列577条。454高通量测序技术作为药用植物功能基因组研究的重要手段可在丹参功能基因的发现中发挥重要作用,这些基因的发现为丹参酮和丹酚酸类化合物生物合成研究奠定了基础,同时也为丹参的转录组研究提供了基础数据。 展开更多
关键词 丹参 454GSFLX 表达序列标签 转录组
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南方红豆杉转录组SSR挖掘及分子标记的研究 被引量:89
5
作者 李炎林 杨星星 +2 位作者 张家银 黄三文 熊兴耀 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期735-745,共11页
利用Trinity软件对NCBI公共数据库中公布的南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)根、茎和叶的转录数据进行转录组的重新拼接。通过对13 737 528条序列组装得到96 279条Unigenes(38 Mb),通过SSR检测程序从96 279条Unigenes中得到2 160... 利用Trinity软件对NCBI公共数据库中公布的南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)根、茎和叶的转录数据进行转录组的重新拼接。通过对13 737 528条序列组装得到96 279条Unigenes(38 Mb),通过SSR检测程序从96 279条Unigenes中得到2 160个SSR位点(2.24%),其平均发生率为1/18.01 kb,基序长度为14~25 bp之间。优势重复基序为六核苷酸和三核苷酸,分别占总SSR位点的38.56%和37.08%。2 160个SSR位点由703种重复基序构成,其中六核苷酸占60.96%,主要分布在3~4重复;二、三核苷酸占总SSR位点的44.81%,其中以(AG/CT)n、(AT/AT)n、(AAG/CTT)n、(AGC/CTG)n、(AGG/CCT)n和(ATC/ATG)n重复基序最为丰富,合占总SSR重复类型的34.73%,并出现少量的(CG/CG)n和(CCG/CGG)n重复。通过L9(34)正交试验得到最优的SSR-PCR体系,10μL PCR体系中含DNA 20 ng,1×PCR缓冲液,MgCl220 mmol,dNTPs 0.35 mmol,引物0.25μmol,Taq酶0.45 U。随机挑选62对SSR引物进行8个南方红豆杉株系的SSR扩增,有效扩增率为53.23%,多态性比率为38.71%。这些多态性转录组SSR引物的开发为红豆杉遗传多样性的分析、分子标记辅助育种、遗传图谱构建和功能基因的挖掘提供了更丰富的标记。 展开更多
关键词 红豆杉 转录本 引物 SSR
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非模式生物转录组研究 被引量:77
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作者 刘红亮 郑丽明 +2 位作者 刘青青 权富生 张涌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期955-970,共16页
转录组代表细胞或组织内全部的RNA转录本(RNA transcripts),反映不同生命阶段、不同组织类型、不同生理状态以及不同环境条件下表达的基因。转录组研究可以从整体水平上反映细胞中基因表达情况及其调控规律。非模式生物(Non-model organ... 转录组代表细胞或组织内全部的RNA转录本(RNA transcripts),反映不同生命阶段、不同组织类型、不同生理状态以及不同环境条件下表达的基因。转录组研究可以从整体水平上反映细胞中基因表达情况及其调控规律。非模式生物(Non-model organism)具有许多模式生物不具备的特征,其转录组研究对解决基因进化、遗传育种以及生态等诸多方面的问题具有重要意义。但由于非模式生物缺乏参考基因组信息,传统的转录组研究方法操作复杂,实验周期长,花费大,使得其转录组研究进展缓慢。新一代高通量RNA测序技术(RNA-seq)完全改变了转录组学的研究模式,迅速成为研究非模式生物转录组的先进技术。文章详细论述了近年来利用RNA-seq技术进行非模式生物转录组研究的进展情况,从样品准备、高通量DNA测序以及生物信息学分析等方面介绍了利用RNA-seq技术研究非模式生物转录组的一般流程及方法,并对其中有待进一步研究的问题进行了展望。 展开更多
关键词 转录组 非模式生物 RNA-SEQ
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转录组测序技术的研究和应用进展 被引量:78
7
作者 崔凯 吴伟伟 刁其玉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1-9,共9页
转录组(Transcriptome)是指特定细胞或组织中全部转录产物,包括信使RNA,核糖体RNA、转运RNA以及非编码RNA。高通量测序技术的快速发展,为从整体水平系统地研究转录组学研究提供快捷可靠的平台。综述了当前主流的高通量测序技术及其在转... 转录组(Transcriptome)是指特定细胞或组织中全部转录产物,包括信使RNA,核糖体RNA、转运RNA以及非编码RNA。高通量测序技术的快速发展,为从整体水平系统地研究转录组学研究提供快捷可靠的平台。综述了当前主流的高通量测序技术及其在转录组学研究中的应用,并讨论了转录组数据分析中一些值得关注的问题,以及转录组测序技术在生物学研究中的应用方向。 展开更多
关键词 转录组 RNA-SEQ 二代测序 三代测序 单细胞转录组
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党参转录组中SSR位点信息分析 被引量:76
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作者 王东 曹玲亚 高建平 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第16期2390-2394,共5页
目的采用生物信息学方法分析党参转录组文库EST序列简单重复序列(SSR)位点,快速、大规模鉴定党参功能性SSR。方法使用MicroSAtellite(MISA)软件分析党参高通量转录组SSR的分布频率和重复基元的类型特征,利用软件Primer3设计引物,并通过S... 目的采用生物信息学方法分析党参转录组文库EST序列简单重复序列(SSR)位点,快速、大规模鉴定党参功能性SSR。方法使用MicroSAtellite(MISA)软件分析党参高通量转录组SSR的分布频率和重复基元的类型特征,利用软件Primer3设计引物,并通过SSRFinder校验SSR,筛选SSR引物。结果从45 511条Unigenes中共搜到7 327个SSR位点,分布在6 017条Unigenes序列中,发生频率为12.22%,共有415种重复基元,平均每4 520 bp含1个SSR位点,二核苷酸重复占主要地位,发生频率为58.67%,在所有重复基元中,AG/CT出现频率最高。共获得4 329条SSR引物。结论大规模的SSR分子标记开发将有助于党参遗传多样性与分子育种研究。 展开更多
关键词 党参 转录组 SSR MicroSAtellite软件 引物
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红松转录组SSR分析及EST-SSR标记开发 被引量:74
9
作者 张振 张含国 +1 位作者 莫迟 张磊 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第8期114-120,共7页
【目的】红松已开发的分子标记缺乏共显性的遗传标记,尚不能满足分子标记辅助育种的需要。利用转录组数据开发 SSR标记目前仍然是较为经济高效的 DNA分子标记开发策略,本研究利用高通量测序技术开发红松 EST-SSR标记,掌握其在转录组... 【目的】红松已开发的分子标记缺乏共显性的遗传标记,尚不能满足分子标记辅助育种的需要。利用转录组数据开发 SSR标记目前仍然是较为经济高效的 DNA分子标记开发策略,本研究利用高通量测序技术开发红松 EST-SSR标记,掌握其在转录组序列中的分布类型及特征,为红松的 SSR多样性分析及变异分析提供基础。【方法】利用 SSR检索程序从红松转录组41476条 Unigenes中筛选得到1757个 SSR 位点,并对 SSR 位点的数量、分布特征进行统计分析。设计合成101对 SSR引物,采用琼脂糖电泳初步检查和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离检测方法确定引物的多态性,并收集扩增产物,送测序验证,最终开发出16对 SSR引物。合成6对荧光引物,采用荧光标记技术对来自黑龙江省鹤岗、林口、铁力、苇河4个种子园的53份自由授粉子代进行遗传多样性分析。【结果】基于转录组序列开发出的 EST-SSR的分布频率( SSR 的个数与总 Unigene 的数量比)为4.24%。单、二、三核苷酸重复单元分别占总SSR的46.90%,17.12%和34.66%; SSR重复单元的重复次数分布在5~24次之间。参试的101对引物中有21对引物扩增可检测出多态性位点,占引物总数的20.8%;重测序验证,有16对引物能够扩增出目标序列。6对荧光引物共检测出18个等位基因,多态性信息量(PIC)为0.0363~0.6674,平均为0.325。【结论】红松属于基因组序列比较庞大的裸子植物,本研究可扩增出多态性位点的引物重复单元以二、三核苷酸重复为主。所研究红松种子园子代属于中等多态性水平。本研究印证了利用红松转录组数据开发 SSR标记的可行性,同时采用荧光标记技术检测红松自由授粉子代材料,为红松种质资源的多样性水平分析及变异水平的研究提供基础。 展开更多
关键词 红松 转录组 遗传多样性
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新一代高通量RNA测序数据的处理与分析 被引量:64
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作者 王曦 汪小我 +2 位作者 王立坤 冯智星 张学工 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第8期834-846,共13页
随着新一代高通量DNA测序技术的快速发展,RNA测序(RNA-seq)已成为基因表达和转录组分析新的重要手段.RNA-seq技术产生的海量数据为生物信息学带来了新的机遇和挑战.有效地对测序数据进行针对性的生物信息学处理和分析,成为RNA-seq技术... 随着新一代高通量DNA测序技术的快速发展,RNA测序(RNA-seq)已成为基因表达和转录组分析新的重要手段.RNA-seq技术产生的海量数据为生物信息学带来了新的机遇和挑战.有效地对测序数据进行针对性的生物信息学处理和分析,成为RNA-seq技术能否在科学探索中发挥重大作用的关键.以新一代Illumina/Solexa测序平台所产生的数据为例,在扼要介绍高通量RNA-seq测序流程的基础上,对RNA-seq数据处理和分析的方法和现有软件做一个较为全面的综述,并对其中有待进一步研究的问题进行展望。 展开更多
关键词 高通量RNA测序 转录组 基因表达 数据处理与分析 生物信息学
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野三七转录组中SSR位点信息分析及其多态性研究 被引量:60
11
作者 李翠婷 张广辉 +3 位作者 马春花 孟珍贵 陈军文 杨生超 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1468-1472,共5页
目的分析野三七Panax vietnamensis var.fuscidiscus(PVF)转录组中的SSR位点信息,并设计简单重复序列(SSR)引物,以期为野三七分子标记辅助育种提供有力工具。方法利用MISA工具筛选了野三七转录组测序获得的126 758条unigenes,对其SSR位... 目的分析野三七Panax vietnamensis var.fuscidiscus(PVF)转录组中的SSR位点信息,并设计简单重复序列(SSR)引物,以期为野三七分子标记辅助育种提供有力工具。方法利用MISA工具筛选了野三七转录组测序获得的126 758条unigenes,对其SSR位点信息进行了分析;在此基础上利用Primer3设计SSR引物,并随机选择30对SSR引物对13株不同来源的野三七进行多态性扩增分析。结果在野三七的转录组中,共搜索到21 320个SSRs,分布于17 780条unigenes,SSR位点出现频率为16.82%。SSRs位点中二核苷酸重复是主要类型,占总SSRs的52.52%;其次是三核苷酸重复基序(28.08%)。SSRs所包含的重复基元中,二核苷酸重复基元AG/CT和AT/AT是优势重复基元类型,占总SSRs的46.25%。利用Primer3共设计出39 336对SSR引物。随机选择30对引物进行PCR扩增,其中29对(96.67%)扩增出清晰、可重复的条带,15对(50.00%)扩增条带表现出多态性。利用UPGMA作图,将13个材料分为2类。结论野三七转录组中SSR位点出现频率高,类型丰富;大量的SSR为其遗传多样性分析和遗传图谱构建提供了丰富的候选分子标记。 展开更多
关键词 野三七 转录组 SSR信息 多态性 遗传多样性
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The Genome of Artemisia annua Provides Insight into the Evolution of Asteraceae Family and Artemisinin Biosynthesis 被引量:55
12
作者 Qian Shen Lida Zhang +22 位作者 Zhihua Liao Shengyue Wang Tingxiang Yan Pu Shi Meng Liu Xueqing Fu Qifang Pan Yuliang Wang Zongyou Lv Xu Lu Fangyuan Zhang Weimin Jiang Yanan Ma Minghui Chen Xiaolong Hao Ling Li Yueli Tang Gang Lv Yan Zhou Xiaofen Sun Peter E. Brodelius Jocelyn K.C. Rose Kexuan Tang 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2018年第6期776-788,共13页
Artemisia annua, commonly known as sweet wormwood or Qinghao, is a shrub native to China and has long been used for medicinal purposes. A. annua is now cultivated globally as the only natural source of a potent anti-m... Artemisia annua, commonly known as sweet wormwood or Qinghao, is a shrub native to China and has long been used for medicinal purposes. A. annua is now cultivated globally as the only natural source of a potent anti-malarial compound, artemisinin. Here, we report a high-quality draft assembly of the 1.74-gigabase genome of A. annua, which is highly heterozygous, rich in repetitive sequences, and contains 63 226 protein-coding genes, one of the largest numbers among the sequenced plant species. We found that, as one of a few sequenced genomes in the Asteraceae, the A. annua genome contains a large number of genes specific to this large angiosperm clade. Notably, the expansion and functional diversification of genes encoding enzymes involved in terpene biosynthesis are consistent with the evolution of the artemi- sinin biosynthetic pathway. We further revealed by transcriptome profiling that A. annua has evolved the sophisticated transcriptional regulatory networks underlying artemisinin biosynthesis. Based on compre- hensive genomic and transcriptomic analyses we generated transgenic A. annua lines producing high levels of artemisinin, which are now ready for large-scale production and thereby will help meet the chal- lenge of increasing global demand of artemisinin. 展开更多
关键词 Artemisia annua ARTEMISININ GENOME EVOLUTION transcriptome metabolic engineering
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转录组测序技术在生物测序中的应用研究进展 被引量:56
13
作者 贾昌路 张瑶 +1 位作者 朱玲 张锐 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2388-2394,共7页
转录组所代表的是细胞或组织内全部RNA转录本(RNA transcripts),它反映着不同的生命阶段、不同的组织类型、不同的生理状态以及不同的环境条件下表达的基因。转录组的研究可以从整体水平上反映出细胞中基因的表达情况及其调控规律。随... 转录组所代表的是细胞或组织内全部RNA转录本(RNA transcripts),它反映着不同的生命阶段、不同的组织类型、不同的生理状态以及不同的环境条件下表达的基因。转录组的研究可以从整体水平上反映出细胞中基因的表达情况及其调控规律。随着基因组时代的到来,转录组测序技术将会在较为广泛的领域中得以应用并快速发展。本文参考近几年发表的有关转录组研究的文献,综述了转录组测序技术在各研究领域中的应用及取得的成果,并对该技术在核桃研究中的应用进行了展望。 展开更多
关键词 转录组 玉米 单细胞 中药 蛋白质组
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药用植物转录组研究进展 被引量:56
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作者 王尧龙 黄璐琦 +1 位作者 袁媛 查良平 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2055-2061,共7页
细胞或组织内全部的RNA转录本(RNA transcripts)被称为转录组,其反映了基因在不同生命阶段、不同生理状态、不同组织类型以及不同环境条件下表达的情况。而药用植物转录组作为现今研究药用植物基因组最活跃的领域之一,可从整体水平了解... 细胞或组织内全部的RNA转录本(RNA transcripts)被称为转录组,其反映了基因在不同生命阶段、不同生理状态、不同组织类型以及不同环境条件下表达的情况。而药用植物转录组作为现今研究药用植物基因组最活跃的领域之一,可从整体水平了解细胞中基因表达情况及其调控规律。对转录组的研究将有助于解决基因进化、遗传育种以及生态等诸多方面的问题。该文以转录组的研究目标、发展历程和研究方法为基础,介绍了药用植物中转录组的研究现状及未来发展趋势,为分子生药学的研究提供更多基础数据。 展开更多
关键词 转录组 药用植物 分子生药学
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Gene expression and metabolite profiles of cotton fiber during cell elongation and secondary cell wall synthesis 被引量:52
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作者 Jin-Ying Gou Ling-Jian Wang +2 位作者 Shuang-Ping Chen Wen-Li Hu Xiao-Ya Chen 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2007年第5期422-434,共13页
Cotton fibers elongate rapidly after initiation of elongation, eventually leading to the deposit of a large amount of cellulose. To reveal features of cotton fiber cells at the fast elongation and the secondary cell w... Cotton fibers elongate rapidly after initiation of elongation, eventually leading to the deposit of a large amount of cellulose. To reveal features of cotton fiber cells at the fast elongation and the secondary cell wall synthesis stages, we compared the respective transcriptomes and metabolite profiles. Comparative analysis of transcriptomes by cDNA array identified 633 genes that were differentially regulated during fiber development. Principal component analysis (PCA) using expressed genes as variables divided fiber samples into four groups, which are diagnostic of developmental stages. Similar grouping results are also found if we use non-polar or polar metabolites as variables for PCA of developing fibers. Auxin signaling, wall-loosening and lipid metabolism are highly active during fiber elongation, whereas cellulose biosynthesis is predominant and many other metabolic pathways are downregulated at the secondary cell wall synthesis stage. Transcript and metabolite profiles and enzyme activities are consistent in demonstrating a specialization process of cotton fiber development toward cellulose synthesis. These data demonstrate that cotton fiber cell at a certain stage has its own unique feature, and developmental stages of cotton fiber cells can be distinguished by their transcript and metabolite profiles. During the secondary cell wall synthesis stage, metabolic pathways are streamed into cellulose synthesis. 展开更多
关键词 cotton fiber transcriptome metabolite profile AUXIN cell elongation cellulose synthesis
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茶树转录组中SSR位点的信息分析 被引量:52
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作者 杨华 陈琪 +3 位作者 韦朝领 史成颖 方从兵 宛晓春 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期882-886,共5页
利用茶树全转录组的高通量测序获得的127 094条Unigenes来发掘茶树转录组SSR功能性标记。在这些序列中共搜索出12 242个SSRs,分布于10 325条Unigenes中,出现频率为9.63%。茶树转录组SSRs的平均长度为16 bp,平均分布频率是1/3.68 kb。在... 利用茶树全转录组的高通量测序获得的127 094条Unigenes来发掘茶树转录组SSR功能性标记。在这些序列中共搜索出12 242个SSRs,分布于10 325条Unigenes中,出现频率为9.63%。茶树转录组SSRs的平均长度为16 bp,平均分布频率是1/3.68 kb。在茶树转录组的SSRs中,二核苷酸重复是主要的类型,占总SSRs的63.78%。茶树转录组SSRs共包含181种重复基元,二核苷酸重复基元CT/AG和TC/GA是优势重复基元类型,分别占总SSRs的23.84%和23.58%。同时对这些SSR的可用性进行了评价。 展开更多
关键词 茶树 转录组 SSR信息
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基于新一代测序技术的昆虫转录组学研究进展 被引量:47
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作者 张棋麟 袁明龙 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1489-1508,共20页
新一代测序技术具有快速、高通量和低成本的特点,为"组学"研究带来了新方法、新方案,正在深刻地改变着当前生物学的研究模式。近年来,新一代测序技术极大促进了昆虫特别是无参考基因组信息昆虫的转录组学研究。自2008年至今,... 新一代测序技术具有快速、高通量和低成本的特点,为"组学"研究带来了新方法、新方案,正在深刻地改变着当前生物学的研究模式。近年来,新一代测序技术极大促进了昆虫特别是无参考基因组信息昆虫的转录组学研究。自2008年至今,采用新一代测序技术已对7个目的 68种昆虫进行了转录组测序,其中由我国学者完成了6个目的 22种昆虫的转录组测序。目前,昆虫转录组学研究主要集中在基因挖掘、分子标记开发、基因表达分析等方面,为全面揭示昆虫生命活动中相关基因功能、系统发生与进化以及昆虫与其他生物相互作用等奠定了基础。本文总结了当前昆虫转录组学研究的已有成果,分析了其今后的发展趋势,讨论了采用新一代测序技术开展昆虫转录组学研究中存在的诸如研究对象相对局限、测序准确性不够高等不足,并指出开展昆虫转录组学研究时需充分思考所要回答的科学问题,选择合适的研究策略,评估性价比,以及开发转录组信息高效利用的方法等。作者建议未来的研究方向侧重于:(1)大规模开展基于新一代测序技术的昆虫转录组学研究,特别是对其他目以及独特生态环境中的代表性昆虫应予以重点关注;(2)开发昆虫转录组数据存储及分析的软硬件;(3)合理利用新一代测序技术研究昆虫转录组并充分挖掘已测昆虫转录组中的遗传信息。 展开更多
关键词 昆虫 转录组 高通量测序 基因发掘 功能鉴定 基因表达
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洋葱转录组SSR信息分析及其多态性研究 被引量:47
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作者 李满堂 张仕林 +2 位作者 邓鹏 侯喜林 王建军 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1103-1111,共9页
采用生物信息学方法分析洋葱(Allium cepa L.)转录组中的SSR位点信息,并设计简单重复序列(SSR)引物,以期为洋葱分子标记辅助育种提供有力工具。利用MISA工具筛选了洋葱转录组测序获得的106 932条unigenes(84.04 Mb),并对其SSR位点信息... 采用生物信息学方法分析洋葱(Allium cepa L.)转录组中的SSR位点信息,并设计简单重复序列(SSR)引物,以期为洋葱分子标记辅助育种提供有力工具。利用MISA工具筛选了洋葱转录组测序获得的106 932条unigenes(84.04 Mb),并对其SSR位点信息进行了分析,共筛选得到5 959个SSR位点(占总unigenes的5.10%),其发生频率为1/14.1 kb。SSRs位点中主导类型是以AAG/CTT(占总SSRs的10.20%)为主的三核苷酸重复,占总SSRs的37.27%;其次是单、二核苷酸重复,其出现频率分别为30.91%和24.75%。利用Primer5共设计出5 258对SSR引物。随机选择20对引物进行PCR扩增,其中12对扩增出清晰可重复的条带,9对在24个不同类型洋葱材料中表现出多态性。利用UPGMA作图,将24个洋葱材料分为4类。 展开更多
关键词 洋葱 转录组 SSR 引物 多态性
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基于RNA-Seq技术的连翘转录组组装与分析及SSR分子标记的开发 被引量:47
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作者 王兴春 谭河林 +3 位作者 陈钊 孟令芝 王文斌 范圣此 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2015年第3期301-310,共10页
连翘既是传统的中药材,又是优良的城市绿化树种,具有重要的经济价值和生态价值.但是连翘基因资料非常匮乏,限制了其分子生物学和基因功能的研究.本研究以连翘根、茎、叶、花和果实等器官的混合样品作为材料,利用Illumina Hi SeqTM 2500... 连翘既是传统的中药材,又是优良的城市绿化树种,具有重要的经济价值和生态价值.但是连翘基因资料非常匮乏,限制了其分子生物学和基因功能的研究.本研究以连翘根、茎、叶、花和果实等器官的混合样品作为材料,利用Illumina Hi SeqTM 2500测序平台对其进行转录组测序.共获得23164327条干净数据(clean reads),总碱基数为4678791021 bp.Clean reads经de novo组装后获得45112条unigenes.进一步利用五大公共数据库进行同源比对,注释了28699条unigenes.其中,473个基因参与了连翘次生物质的合成和代谢,包括81个与苯丙氨酸和苯丙烷代谢相关的基因.对这81个基因的分析表明,有4个基因编码苯丙氨酸脱氨酶,1个基因编码肉桂酸4-羟化酶,2个基因编码4-香豆酰:辅酶A连接酶.这3个酶催化了连翘中主要药用活性物质苯乙醇苷和木脂素前体肉桂酸衍生物的生物合成.此外,还发现了2个松脂醇-落叶松树脂醇还原酶和1个开环异落叶松脂醇脱氢酶编码基因,这2个酶是木脂素合成的关键酶.最后,分析了长度在1 kb以上的12721个unigenes的基因结构,检测到3199个SSR位点,并对其中40个位点进行了验证.本研究不仅为连翘基因克隆和分子生物学研究提供了丰富的基础数据信息,而且为连翘遗传多样性研究、指纹图谱构建和分子标记辅助选育奠定了分子基础. 展开更多
关键词 RNA-SEQ 转录组 次生代谢 苯乙醇苷 木脂素 SSR分子标记 连翘
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基于中国樱桃转录组的SSR分子标记开发与鉴定 被引量:44
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作者 宗宇 王月 +3 位作者 朱友银 邵姁 李永强 郭卫东 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1566-1576,共11页
对中国樱桃(Prunus pseudocerasus Lindl.)休眠芽转录组数据进行了SSR位点搜索和分析,发现了7 197个SSR位点,总的发生频率为15.62%。SSR重复类型以二核苷酸发生频率最高(58.65%),三核苷酸次之(34.72%)。利用8对多态性引物在24份... 对中国樱桃(Prunus pseudocerasus Lindl.)休眠芽转录组数据进行了SSR位点搜索和分析,发现了7 197个SSR位点,总的发生频率为15.62%。SSR重复类型以二核苷酸发生频率最高(58.65%),三核苷酸次之(34.72%)。利用8对多态性引物在24份樱桃种质中进行了引物有效性验证和遗传多样性分析,结果表明有效等位基因数最大值为2.92(Pp SSR2),最小值为1.09(Pp SSR8),平均值为1.73;香农多样性指数变化范围是0.202~1.290,平均值为0.755。观察杂合度和期望杂合度的变化范围分别是0.083~0.917和0.082~0.671;平均值分别为0.391和0.384。香农多样性指数、观察杂合度和期望杂合度3个多样性指数最大值均出现在位点Pp SSR2,最小值出现在位点Pp SSR8。基于SSR标记的24份樱桃种质的聚类结果与经典的形态学分类不完全一致,但聚类结果清晰地划分出5个不同组别,说明浙江省的中国樱桃种质资源遗传多样性丰富。两个龙泉地方品种与其他的浙江樱桃种质资源明显不同,它们与山樱和浙闽樱有着更紧密的遗传关系,该地方品种可以作为樱桃新品种选育的优良材料,有利于拓宽现有樱桃栽培品种的遗传背景。 展开更多
关键词 中国樱桃 转录组 SSR 种质资源 遗传多样性
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