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高寒草甸嵩草、珠芽蓼根际优良植物根际促生菌的分离筛选及促生特性研究 被引量:20
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作者 高亚敏 姚拓 +4 位作者 李海云 罗慧琴 张建贵 杨琰珊 刘婷 《草业学报》 CSCD 北大核心 2019年第11期114-123,共10页
为从高寒草甸优势牧草(蒿草、珠芽蓼)根际筛选具有优良促生特性的植物根际促生菌(PGPR),探寻其根际分布规律,并为后期生产应用提供支撑。采用选择性培养基法筛选根表土(RS)、根表面(RP)和根内(HP)细菌,用点接种法在选择培养基(Pikovask... 为从高寒草甸优势牧草(蒿草、珠芽蓼)根际筛选具有优良促生特性的植物根际促生菌(PGPR),探寻其根际分布规律,并为后期生产应用提供支撑。采用选择性培养基法筛选根表土(RS)、根表面(RP)和根内(HP)细菌,用点接种法在选择培养基(Pikovaskaia′s培养基、蒙金娜、无氮培养基)中复筛具溶磷、固氮特性菌株;采用钼蓝比色法、气相色谱法和高效液相色谱法分别测定菌株溶磷量、固氮酶活性和分泌植物激素[PHs:吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA3)、反式玉米素(t-Z)]含量。结果表明:共筛出细菌68株,复筛出溶磷固氮PGPR 43株;其中,溶解无机磷菌17株(溶磷量:9.39~94.79μg·mL^-1),溶解有机磷菌22株(溶磷量:10.37~72.82μg·mL^-1),固氮菌30株[固氮酶活性:3.79~3193.07 nmol (C2H4)·h^-1·mL^-1];分泌IAA菌26株(IAA含量:0.24~69.98μg·mL^-1),分泌GA3菌32株(GA3含量:0.34~68.87μg·mL^-1)和36株分泌t-Z菌(t-Z含量:0.11~47.59μg·mL^-1)。植株根际促生菌PGPR均表现出根表面RP区细菌数显著高于根表土RS和根内HP区,珠芽蓼根际筛选出的PGPR多于嵩草根际;蒿草PGPR溶解有机磷能力强于珠芽蓼根际PGPR,但溶无机磷PGPR数目和能力相反。分泌植物激素PHs菌株在能力和数量上均表现出t-Z>GA3>IAA的趋势。因此,优良溶磷菌(ZNRS2、SNRP2、ZKHP3、ZKRP1),优良固氮菌株(SKRP2、SNHP1、ZNRS3)和优良产植物激素PHs菌(SKHP3、ZNHP2、ZKRS2、ZKRP1、ZKRP2)可用于后期微生物肥料制作和相关研究,其中ZKRS2的促生功能较多,可进行深入挖掘。 展开更多
关键词 高寒草甸 溶磷菌 固氮菌 溶磷特性 固氮酶活性 吲哚乙酸 赤霉素 反式玉米素
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固相萃取-高效液相色谱法测定植物根际促生菌发酵产物中3种植物激素的含量 被引量:16
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作者 刘婷 姚拓 +1 位作者 陈建纲 刘欢 《分析科学学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期201-206,共6页
建立了固相萃取-高效液相色谱法同时测定植物根际促生菌发酵产物中吲哚-3-乙酸、赤霉素和玉米素3种植物激素含量的方法。固相萃取采用Agilent Bond Elut C18固相萃取柱,6 mL甲醇+6 mL 10%甲醇活化;以5 mL 10%甲醇淋洗2次;以5mL 80%甲醇... 建立了固相萃取-高效液相色谱法同时测定植物根际促生菌发酵产物中吲哚-3-乙酸、赤霉素和玉米素3种植物激素含量的方法。固相萃取采用Agilent Bond Elut C18固相萃取柱,6 mL甲醇+6 mL 10%甲醇活化;以5 mL 10%甲醇淋洗2次;以5mL 80%甲醇洗脱2次。采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(250×4.6mm,5μm)分离,流动相采用体积比为2∶3的甲醇-水(含0.2%冰乙酸)二元混合溶剂,流速为1mL·min^(-1),柱温为30℃,进样量为20μL,检测波长为210nm。结果表明:10株供试菌株发酵产物中均能检测到3种植物激素,除菌株003NXZ4外,其余菌株均呈现出玉米素含量最高,赤霉素次之,吲哚-3-乙酸含量最低的趋势。3种植物激素在12min内分离完全,样品的加标回收率达90.3%~104.3%,相对标准偏差(n=6)在1.04%~2.98%之间。该方法简便、准确,可同时检测植物根际促生菌发酵产物中吲哚-3-乙酸、赤霉素和玉米素3种植物激素含量。 展开更多
关键词 固相萃取 高效液相色谱法 植物根际促生菌 植物激素 吲哚-3-乙酸 赤霉素 玉米素
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新麦草异戊烯基转移酶PjIPT基因的功能验证
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作者 任晓敏 云岚 +1 位作者 艾芊 赵乔 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期207-215,共9页
【目的】异戊烯基转移酶(isopentenyl transferases,IPT)参与反式玉米素(trans-zeatin,tZ)的生物合成。tZ是调节植物生长发育和抵抗逆境胁迫的一种细胞分裂素类型,在促进芽生长和调控植物侧枝发育方面具有重要作用。探索IPT的功能,为后... 【目的】异戊烯基转移酶(isopentenyl transferases,IPT)参与反式玉米素(trans-zeatin,tZ)的生物合成。tZ是调节植物生长发育和抵抗逆境胁迫的一种细胞分裂素类型,在促进芽生长和调控植物侧枝发育方面具有重要作用。探索IPT的功能,为后续新麦草产量性状改良提供了理论依据。【方法】通过对新麦草IPT进行系统发育和多序列比对,探究其编码氨基酸序列的特征和同源性。通过花粉管通道法获得过表达PjIPT拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株,并运用逆转录PCR(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot,WB)对转基因植株进行验证,利用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)对其组织表达模式进行分析,使用液质联用系统测定反式玉米素。【结果】IPT在新麦草(Psathyrostachys juncea)和二粒小麦(Triticum dicoccoides)等麦类作物中具有高度同源性,且AtIPT9是PjIPT的同源蛋白。通过花粉管通道法获得过表达PjIPT拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株,证明PjIPT上调植株分枝数。RT-PCR和蛋白质印迹分析显示,PjIPT在转录水平和蛋白水平均能够正常表达。利用不同部位组织RT-qPCR分析PjIPT的空间特异性表达,结果显示,PjIPT在拟南芥的分蘖节和叶中特异性表达。此外,反式玉米素的定量分析表明PjIPT通过参与tZ的生物合成去调控拟南芥植株分枝数。【结论】PjIPT是上调植株分枝数的关键基因。 展开更多
关键词 新麦草 异戊烯基转移酶 反式玉米素 分蘖 功能验证
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Genome-Wide Identification of Tomato (Solanum lycopersicum L.) CKX Gene Family and Expression Analysis in the Callus Tissue under Zeatin Treatment
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作者 Zhengfeng Lai Dongmei Lian +6 位作者 Shaoping Zhang Yudong Ju Bizhen Lin Yunfa Yao Songhai Wu Jianji Hong Zhou Li 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2024年第6期1143-1158,共16页
The cytokinin oxidase/dehydrogenase(CKX)enzyme is essential for controlling thefluctuating levels of endogen-ous cytokinin(CK)and has a significant impact on different aspects of plant growth and development.Nonethe-les... The cytokinin oxidase/dehydrogenase(CKX)enzyme is essential for controlling thefluctuating levels of endogen-ous cytokinin(CK)and has a significant impact on different aspects of plant growth and development.Nonethe-less,there is limited knowledge about CKX genes in tomato(Solanum lycopersicum L.).Here we performed genome-wide identification and analysis of nine SlCKX family members in tomatoes using bioinformatics tools.The results revealed that nine SlCKX genes were unevenly distributed onfive chromosomes(Chr.1,Chr.4,Chr.8,Chr.10,and Chr.12).The amino acid length,isoelectric points,and molecular weight of the nine SlCKX proteins ranged from 453 to 553,5.77 to 8.59,and 51.661 to 62.494 kD,respectively.Subcellular localization analysis indi-cated that SlCKX2 proteins were located in both the vacuole and cytoplasmic matrix;SlCKX3 and SlCKX5 pro-teins were located in the vacuole;and SlCKX1,4,6,7,8,and 9 proteins were located in the cytoplasmic matrix.Furthermore,we observed differences in the gene structures and phylogenetic relationships of SlCKX proteins among different members.SlCKX1-9 were positioned on two out of the three branches of the CKX phylogenetic tree in the multispecies phylogenetic tree construction,revealing their strong conservation within phylogenetic subgroups.Unique patterns of expression of CKX genes were noticed in callus cultures exposed to varying con-centrations of exogenous ZT,suggesting their roles in specific developmental and physiological functions in the regeneration system.These results may facilitate subsequent functional analysis of SlCKX genes and provide valu-able insights for establishing an efficient regeneration system for tomatoes. 展开更多
关键词 TOMATO SlCKX gene family phylogenetic relationships trans-zeatin expression pattern
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植物根际促生菌发酵液中植物激素含量的液液萃取-高效液相色谱测定法 被引量:4
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作者 刘晓婷 姚拓 +1 位作者 马亚春 柴加丽 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期2222-2228,共7页
植物根际促生菌分泌的植物激素在植物生长过程中发挥着重要作用,能够调节植物生长、发育及抗逆的各个过程。了解植物根际促生菌分泌的植物激素含量,对优良促生菌资源的筛选至关重要。本研究建立了高效液相色谱法以快速准确测定植物根际... 植物根际促生菌分泌的植物激素在植物生长过程中发挥着重要作用,能够调节植物生长、发育及抗逆的各个过程。了解植物根际促生菌分泌的植物激素含量,对优良促生菌资源的筛选至关重要。本研究建立了高效液相色谱法以快速准确测定植物根际促生菌发酵液中植物激素含量。样品用超纯水-乙酸乙酯(体积比1:2)提取,以Agilent ZORBAX Eclipse Plus C色谱柱分离,采用体积比45:55的甲醇-水(含0.2%冰乙酸)作为流动相,流速为0.8mL·min^(-1),柱温为30℃,进样体积为10μL,在254 nm检测波长下进行检测。结果表明:3种植物激素在测定的浓度范围内线性关系良好,相关系数(R~2)均大于0.997,样品的平均加标回收率为88.02%~108.40%,相对标准偏差(n=3)为0.02%~6.51%。该方法简单、快速,适用于植物根际促生菌中3种植物激素同时测定,研究结果为今后微生物肥料的研制应用提供了菌种资源与参考。 展开更多
关键词 植物根际促生菌 高效液相色谱法 植物激素 定量测定 赤霉素 吲哚乙酸 玉米素
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Review: Plant Growth Hormone Cytokinins Control the Crop Seed Yield 被引量:1
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作者 Norimoto Murai 《American Journal of Plant Sciences》 2014年第14期2178-2187,共10页
This review chronicles the development of the cytokinin research during the last 30 years. Cytokinin and auxin are the two major plant growth hormones that control virtually all aspects of growth and development in hi... This review chronicles the development of the cytokinin research during the last 30 years. Cytokinin and auxin are the two major plant growth hormones that control virtually all aspects of growth and development in higher plants. The pathways for cytokinin biosynthesis and metabolism have been characterized by the identification of isopentenyl pyrophosphate transferase, cytokinin oxidases, cytokinin hydroxylase, zeatin cis-/trans-isomerase, cytokinin phosphoribosyl hydrolases, cytokinin-specific riboside phosphorylase, and others enzymes. Loss-of function mutant phenotypes of cytokinin degradation/activating enzymes indicate the regulation of concentration and spatial distribution of bio-active cytokinin plays a pivotal role in the increase in panicle size, in the numbers of floral organs, and eventually in seed yield. One of the most fundamental questions in the cytokinin field is one concerning the prevalence of cis-zeatin in monocotyledonous crops (rice and maize) and in dicotyledonous legumes (pea, chickpea) and potato/sweet potato. A hypothesis is that cis-zeatin is synthesized by the cis-specific hydroxylation of the terminal methyl group of N6-isopentenyl side chain of N6-isopentenyl adenosine (i6Ado) or of their mono-, di-, or tri-phosphates catalyzed by the cis-specific hydroxylase. A second potential pathway is the isomerization of trans-zeatin to cis-zeatin by zeatin cis-/trans-isomerase. A second fundamental question to be addressed is the physiological role of cis-zeatin. Some have argued for a special function of cis-zeatin to account for the prevalence of the cis-zeatin in the plant kingdom from algae to higher plants. 展开更多
关键词 CYTOKININS BIOSYNTHESIS and METABOLISM cis-and trans-zeatin CYTOKININ OXIDASE
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反式玉米素抑制紫外线诱导的水通道蛋白3下调有关的信号通路 被引量:1
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作者 蒋洁瑶 纪超 +1 位作者 毕志刚 张美华 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期342-344,共3页
目的:观察能特异性诱导水通道蛋白-3(AQP3)表达的反式玉米素(trans-zeatin,tZ)对紫外线导致的AQP3丢失的影响及PD98059、U0126和MEK/细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂对紫外线引起的AQP3丢失的作用。方法:蛋白质免疫印迹方法分析各蛋白的... 目的:观察能特异性诱导水通道蛋白-3(AQP3)表达的反式玉米素(trans-zeatin,tZ)对紫外线导致的AQP3丢失的影响及PD98059、U0126和MEK/细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂对紫外线引起的AQP3丢失的作用。方法:蛋白质免疫印迹方法分析各蛋白的表达。结果:tZ抑制了紫外线诱导的MEK/ERK活化,后者作为关键信号通路调节由紫外线诱导的AQP3丢失。tz的预处理很大程度上抑制了MEK的磷酸化,且具有剂量-效应关系。MEK/ERK的抑制剂PD98059和U0126抑制紫外线引起的AQP3下调,而c-Jun氨基端激酶(JNK),P38或丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)的抑制剂则没有抑制效应。结论:tZ对抗紫外线引起AQP3丢失的保护作用是由抑制紫外线引起的MEK/ERK活化介导的。 展开更多
关键词 反式玉米素 水通道蛋白3 MEK ERK MEK ERK抑制剂
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反式玉米素对HaCaT细胞迁移及水通透性的影响
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作者 蒋洁瑶 纪超 +1 位作者 张美华 毕志刚 《中国麻风皮肤病杂志》 2013年第3期168-171,共4页
目的:评价反式玉米素(Trans-Zeatin,tZ)对HaCaT细胞的迁移和水通透性的影响。方法:RNA干扰实验;载有钙黄绿素的HaCaT细胞执行水的通透性测量。结果:反式玉米素缓解了UV导致的HaCaT细胞迁移能力的下降;并改善了HaCaT细胞由UV介导的水通... 目的:评价反式玉米素(Trans-Zeatin,tZ)对HaCaT细胞的迁移和水通透性的影响。方法:RNA干扰实验;载有钙黄绿素的HaCaT细胞执行水的通透性测量。结果:反式玉米素缓解了UV导致的HaCaT细胞迁移能力的下降;并改善了HaCaT细胞由UV介导的水通透性的下降。结论:经Trans-Zeatin处理后可上调角蛋白细胞中小鼠水通道蛋白3(AQP3)的表达,促进HaCaT细胞的迁移和改善水的通透性。 展开更多
关键词 反式玉米素 水通道蛋白3 细胞迁移 水通透性
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LC-MS同时测定大型海藻中9个植物激素 被引量:11
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作者 刘雪梅 赵鹏 +4 位作者 徐继林 骆其君 王秀娟 陈海敏 严小军 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1747-1752,共6页
目的:利用高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-QqQ MS)联用分析系统建立几种大型海藻中植物激素的分析方法。方法:冷冻干燥后的藻样用甲醇-水-甲酸(15∶4∶1,v/v/v)提取。9个中、酸性植物激素分别在Hypersil Gold C18色谱柱上实现分离,... 目的:利用高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-QqQ MS)联用分析系统建立几种大型海藻中植物激素的分析方法。方法:冷冻干燥后的藻样用甲醇-水-甲酸(15∶4∶1,v/v/v)提取。9个中、酸性植物激素分别在Hypersil Gold C18色谱柱上实现分离,流动相为水(A)-甲醇(B),梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,柱温30℃。在电喷雾电离源正离子模式下,分别取m/z 130.0,204.1,136.1,220.0作为吲哚乙酸、异戊烯腺苷、异戊烯腺嘌呤和反式玉米素核苷的定量目标离子;在负离子模式下分别取153.3,91.3,93.2,143.2,59.5作为脱落酸、苯乙酸、水杨酸、赤霉素和茉莉酸的定量目标离子进行检测。结果:植物激素浓度在5~500μg·L-1范围内线性良好,检测限为0.0041~0.8622μg·L-1,回收率在61.33%~90.39%之间,RSD<11%(n=3)。结论:本法操作简单,准确可靠,适用于藻类植物激素的含量检测。 展开更多
关键词 大型海藻 植物激素 吲哚乙酸 异戊烯腺苷 异戊烯腺嘌呤 反式玉米素核苷 脱落酸 苯乙酸 水杨酸 赤霉素 茉莉酸 高效液相色谱-三重四极杆质谱 厚膜藻 角叉菜 石莼 浒苔 羊栖菜 鼠尾藻
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农杆菌GV3101中反式玉米素合成基因促进烟草再生 被引量:4
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作者 韩召奋 王秋苹 +3 位作者 褚越洋 于会敏 武永军 罗鑫娟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1134-1142,共9页
胭脂碱型农杆菌GV3101已经被广泛用于植物遗传转化研究。已有的研究结果证明,农杆菌GV3101株系含有的反式玉米素合成(trans-zeatin synthesizing,tzs)基因编码产物会影响烟草细胞器的形态及细胞的生理状态。然而,有关tzs基因对遗传转化... 胭脂碱型农杆菌GV3101已经被广泛用于植物遗传转化研究。已有的研究结果证明,农杆菌GV3101株系含有的反式玉米素合成(trans-zeatin synthesizing,tzs)基因编码产物会影响烟草细胞器的形态及细胞的生理状态。然而,有关tzs基因对遗传转化过程外植体再生的影响研究却少有报道。本文在前期研究工作的基础上,以2种烟草、4个农杆菌株系为组培实验材料,验证了胭脂碱型农杆菌tzs基因产物的生理活性。结果表明:以外源添加生长调节物质的外植体为阳性对照,在不添加任何生长调节剂的培养基上,与GV3101菌株共培养的烟草外植体能分化再生,并发育成完整植株;外植体再生与GV3101携带的质粒种类无关;外植体与农杆菌GV3101培养液共培养24 h,烟草再生效果较好;与GV3101株系共培养24 h,将外植体烟草叶片匀浆,经亲和柱分离纯化后,检测出烟草外植体叶片中高达0.78 ng/g FW-1的反式玉米素含量。菌落PCR扩增结果证实,农杆菌GV3101株系有tzs基因序列。以上结果表明,农杆菌GV3101株系内的tzs基因的表达产物有生理学活性,能够促进烟草外植体再生,调节细胞生长。 展开更多
关键词 胭脂碱型根癌农杆菌 植物再生 反式玉米素合成基因 功能
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