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高效液相色谱-串联质谱法测定儿童微量脑脊液中美罗培南浓度
1
作者 姜锡娟 张古英 +1 位作者 尹志萍 杨静 《中国医药导报》 CAS 2023年第22期34-37,共4页
目的建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)快速测定儿童微量脑脊液中美罗培南的浓度。方法以厄他培南为内标,10μl脑脊液样品经0.1%甲酸-乙腈沉淀蛋白,液相分离采用Hypersil GOLD^(TM)色谱柱(50 mm×2.1 mm,3μm),以0.1%甲酸-水... 目的建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)快速测定儿童微量脑脊液中美罗培南的浓度。方法以厄他培南为内标,10μl脑脊液样品经0.1%甲酸-乙腈沉淀蛋白,液相分离采用Hypersil GOLD^(TM)色谱柱(50 mm×2.1 mm,3μm),以0.1%甲酸-水和0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.5 ml/min,柱温40℃;采用电喷雾离子源,正离子多反应监测模式检测。对2020年2月至3月河北省儿童医院神经内科收集的样品进行分析。结果脑脊液中美罗培南浓度在0.01~50.00μg/ml内线性良好,线性方程为Y=0.880X+0.000168(r=0.9989),定量下限为0.01μg/ml;提取回收率为(93.24±9.48)%~(104.62±4.63)%;美罗培南在脑脊液中无明显基质效应。患儿脑脊液样品中美罗培南浓度在0.10~1.25μg/ml。结论本法样品量少、简单、快速、准确、灵敏,适用于儿童微量脑脊液中美罗培南的浓度监测。 展开更多
关键词 美罗培南 高效液相色谱-串联质谱法 脑脊液 儿童 微量样品
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微量生物检材定量及分型 被引量：2
2
作者 宋立 刘松 +2 位作者 吴卉 方少平 傅燕芳 《法医学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期656-658,共3页
目的在传统微量生物检材提取方法中,引入荧光定量流程对样品进行初筛,以提高其有效检验。方法将DNA标准品9947A梯度稀释,使用Rotor-Gene Q实时荧光定量分析仪定量,用AmpF?STR^(TM) Identifiler^(TM) Plus PCR扩增试剂盒检测基因型,构建... 目的在传统微量生物检材提取方法中,引入荧光定量流程对样品进行初筛,以提高其有效检验。方法将DNA标准品9947A梯度稀释,使用Rotor-Gene Q实时荧光定量分析仪定量,用AmpF?STR^(TM) Identifiler^(TM) Plus PCR扩增试剂盒检测基因型,构建微量生物检材可获得完整STR分型结果的定量阈值模型,并使用903个微量检材验证其可靠性。结果检材质量浓度>0.03 ng/μL可直接获得有效的分型;检材质量浓度>0.01～0.03 ng/μL,可通过优化增加PCR热循环参数(30个循环)获得有效分型;检材质量浓度≤0.01 ng/μL时,即使优化PCR也无法得到有效图谱。结论该实时荧光定量阈值模型可有效对微量生物检材进行初筛。 展开更多
关键词 法医遗传学 串联重复序列 实时荧光定量 微量检材
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转基因溶菌酶羊hLZ-J1品系特异性数字PCR方法及样本中痕量转基因成分检测
3
作者 王艺洁 徐文婷 +1 位作者 杨立桃 梁晋刚 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2022年第5期1109-1116,共8页
人溶菌酶是一种天然抗生素,具有抗细菌、真菌,抗炎症,预防感染等功能。转基因溶菌酶山羊可以在乳腺中特异性表达,从而可以从羊乳中规模化制备溶菌酶。本研究旨在建立一种适用于痕量样本中转基因溶菌酶羊成分定量检测的品系特异性数字PC... 人溶菌酶是一种天然抗生素,具有抗细菌、真菌,抗炎症,预防感染等功能。转基因溶菌酶山羊可以在乳腺中特异性表达,从而可以从羊乳中规模化制备溶菌酶。本研究旨在建立一种适用于痕量样本中转基因溶菌酶羊成分定量检测的品系特异性数字PCR方法,并利用该方法对山羊的血液、羊奶、粪便和环境土壤样本等进行检测,用于对转基因溶菌酶山羊成分的溯源。建立的数字PCR方法具有高特异性、灵敏度、准确性,检测限和定量限低至15个拷贝每个反应,可以对羊血、羊乳等制品进行准确的定量检测。研究结果还表明该方法可以准确测定粪便和环境土壤样本中的痕量转基因溶菌酶羊成分,可进一步用于转基因动物外源基因的水平转移检测及环境风险评估。 展开更多
关键词 数字PCR 转基因溶菌酶羊 品系特异性 痕量样本
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REPLI-g~? Single Cell Kit应用于微量DNA扩增的效率评估
4
作者 徐倩南 沈琼 +4 位作者 张佳怡 张轶伦 李莉 刘希玲 李成涛 《法医学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期210-215,共6页
目的评估REPLI-g~?Single Cell Kit应用于检材DNA扩增的效率,探讨该试剂盒在法医学微量DNA扩增方面的应用价值。方法选取3种微量DNA提取试剂盒,对来自10名无关个体的外周血进行DNA提取,并对所提DNA的产量和纯度进行比较。根据比较结果选... 目的评估REPLI-g~?Single Cell Kit应用于检材DNA扩增的效率,探讨该试剂盒在法医学微量DNA扩增方面的应用价值。方法选取3种微量DNA提取试剂盒,对来自10名无关个体的外周血进行DNA提取,并对所提DNA的产量和纯度进行比较。根据比较结果选取1例DNA样本进行浓缩稀释作为全基因组扩增起始样本,使用REPLI-g~?Single Cell Kit对起始样本进行全基因组扩增,计算扩增产量及扩增倍数,并进行琼脂糖凝胶电泳检测片段分布情况。使用Goldeneye~? DNA身份鉴定系统20A对起始样本和经全基因组扩增所得DNA进行STR分型。结果经比较后选取由QIAsymphony~? DNA Investigator~? Kit所提取的1例DNA进行浓缩稀释作为全基因组扩增起始样本。经REPLI-g~?Single Cell Kit对一系列起始样本全基因组扩增后,发现扩增产量均值最低可达到8.77×10~3ng,相应的扩增倍数均值为1.40×10~6,DNA片段大且集中。全基因组扩增样本随着起始样本量的减少,STR分型成功率降低,但当起始样本量低于0.5ng时,全基因组扩增后样本的STR分型成功率高于相同起始量未经全基因组扩增样本的STR分型成功率。结论应用REPLI-g~?Single Cell Kit可有效提高模板DNA总量,特别对于微量DNA,可在一定程度上提高STR分型成功率。 展开更多
关键词 法医遗传学 短串联重复 全基因组扩增 多重置换扩增 微量检材
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一种微量样品快速测定比色法在水环境监测中的应用研究 被引量：3
5
作者 王文静 赵旭 +1 位作者 甄航勇 钱宝 《水利水电快报》 2020年第5期61-65,共5页
分光光度法在我国水环境监测领域应用广泛,但在分析批量样品时需投入大量人力物力,成本较高。利用酶标仪微量比色法,提出了一种对微量、批量样品的快速测定方法。以水中氨氮检测为例,确定了该方法的最佳参数和条件,并与传统的分光光度... 分光光度法在我国水环境监测领域应用广泛,但在分析批量样品时需投入大量人力物力,成本较高。利用酶标仪微量比色法,提出了一种对微量、批量样品的快速测定方法。以水中氨氮检测为例,确定了该方法的最佳参数和条件,并与传统的分光光度法进行比较。酶标仪微量比色法与分光光度法在线性范围、检出限、最低检出限、灵敏度等分析参数上没有明显差异。通过对实验条件的优化,酶标仪微量比色法测定氨氮仅需样品体积200μL,纳氏试剂4μL,1 min内可以完成96个样品的测定,弥补了分光光度法在批量操作上的不足,减少了实验废水的排放,使分析检测工作快速、准确和省时。 展开更多
关键词 酶标仪微量比色法 分光光度法 微量测定 氨氮检测 水环境监测
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微量样品的X射线定量相分析 被引量：1
6
作者 常世安 孙序 《中国有色金属学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第4期621-625,共5页
从Ｘ射线衍射强度的指数方程出发，考虑到１％的允许误差，经数学处理建立了微量薄膜样品的质量与衍射强度间的线性方程ｙ＝ａ＋ｂＩｎ；ａ，ｂ值用被测物相纯样的外标曲线确定，线性方程的相关系数ｒ＝０．９９５，从而建立了微量薄膜... 从Ｘ射线衍射强度的指数方程出发，考虑到１％的允许误差，经数学处理建立了微量薄膜样品的质量与衍射强度间的线性方程ｙ＝ａ＋ｂＩｎ；ａ，ｂ值用被测物相纯样的外标曲线确定，线性方程的相关系数ｒ＝０．９９５，从而建立了微量薄膜样品的物相定量分析直接对比法。同时，建立了微量样品和有限厚样品间临界值的实验方法及有限厚样品衍射强度的吸收校正方法。所建立的方法用于矿山呼吸性粉尘中αＳｉＯ２的定量测定，检出下限达０．０１ｍｇ。 展开更多
关键词 微量样品 物相定量分析 吸收校正 粉尘 矿山
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