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肥大细胞类过敏反应脱颗粒的实时动态检测方法 被引量：20
1
作者 胡剑江 侯燕鸣 +3 位作者 张倩 雷洪涛 王毅 王丹巧 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1860-1864,共5页
目的:建立实时、动态、直接的肥大细胞脱颗粒光学成像检测方法。方法:将囊泡表面特异性分子CD63与绿色荧光蛋白(green fluorescence prote in,GFP)的基因融合后,通过质粒转染入细胞中,建立稳定表达CD63-GFP蛋白的鼠肥大细胞株(RBL-2H3细... 目的:建立实时、动态、直接的肥大细胞脱颗粒光学成像检测方法。方法:将囊泡表面特异性分子CD63与绿色荧光蛋白(green fluorescence prote in,GFP)的基因融合后,通过质粒转染入细胞中,建立稳定表达CD63-GFP蛋白的鼠肥大细胞株(RBL-2H3细胞)。之后利用激光扫描共聚焦显微镜及全内反射显微镜分别观察细胞内囊泡在过敏原刺激下脱颗粒时的运动状况。结果:成功建立稳定表达CD63-GFP的RBL-2H3细胞株;在类过敏原的刺激下,用激光扫描共聚焦显微镜观察到了细胞脱颗粒过程中,细胞内囊泡向细胞外脱出的过程,同时,用全内反射显微镜观察到了细胞内囊泡与细胞膜融合的过程。结论:本研究在活细胞状态下,实时、直观、灵敏、快速地观察到肥大细胞脱颗粒的过程,直接评估过敏原刺激肥大细胞脱颗粒的特性,为类过敏反应的检测提供了新的检测手段。 展开更多
关键词 肥大细胞 脱颗粒 类过敏反应 激光扫描共聚焦显微镜 全内反射显微镜
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GPCRs二聚体:功能和药理作用展望 被引量：5
2
作者 陈京 姜云璐 《济宁医学院学报》 2015年第1期1-7,25,共8页
G蛋白偶联受体是最大的膜受体超家族之一,参与调节多种生理过程,在信号识别及转导中具有重要作用,是医学研究与计划的焦点之一,但基于GPCRs单体的药物通常疗效欠佳、副作用较多。随着GPCRs二聚体的不断证实,二聚体不同于单体的内在疗效... G蛋白偶联受体是最大的膜受体超家族之一,参与调节多种生理过程,在信号识别及转导中具有重要作用,是医学研究与计划的焦点之一,但基于GPCRs单体的药物通常疗效欠佳、副作用较多。随着GPCRs二聚体的不断证实,二聚体不同于单体的内在疗效、配体选择及由变构调节引起的功能选择性,在临床疾病治疗及新药研发中倍受关注。本文基于检测GPCRs二聚体的技术,就GPCRs二聚体形成的决定因素、功能及药理学作用作一综述。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体 变构调节 荧光相关光谱 全内反射显微镜
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单个心肌细胞内钙波的微观动力学研究 被引量：4
3
作者 白永强 唐爱辉 +1 位作者 王世强 朱星 《物理学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期3607-3612,共6页
利用基于近场光学原理构建的全内反射荧光显微镜研究了大鼠单个心肌细胞中的钙信号.利用这种显微镜的快速成像和高信噪比的特点,观察到单个细胞中复杂的二维钙波斑图.分析了单个钙信号释放事件在钙波形成、运动过程中的作用.建立在fire-... 利用基于近场光学原理构建的全内反射荧光显微镜研究了大鼠单个心肌细胞中的钙信号.利用这种显微镜的快速成像和高信噪比的特点,观察到单个细胞中复杂的二维钙波斑图.分析了单个钙信号释放事件在钙波形成、运动过程中的作用.建立在fire-diffuse-fire模型基础上的模拟显示,由基本钙释放事件组成的钙波可以在心肌细胞中稳定存在.此研究对进一步认识活体可激发系统的微观动力学行为有指导意义. 展开更多
关键词 近场光学 全内反射荧光显微镜 心肌细胞 钙波
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细胞膜上信号转导蛋白的单分子成像与分析 被引量：2
4
作者 梁钰昕 赵容 +1 位作者 梁馨月 方晓红 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1127-1138,共12页
结合本课题组的研究工作,介绍了单分子荧光成像原理、荧光标记方法及数据分析方法,并进一步综述了单分子荧光成像在几种重要的膜蛋白信号转导分子机制和相关药物研究中的进展.
关键词 单分子荧光成像 细胞膜受体 全内反射荧光显微镜 超分辨成像 单分子分析
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G蛋白偶联受体与G蛋白相互作用的最新研究进展 被引量：2
5
作者 姜云璐 龚磊 +1 位作者 白波 陈京 《生命科学》 CSCD 2014年第2期181-187,共7页
传统观念认为,在激动剂作用下,G蛋白偶联受体(GPCRs)能够激活G蛋白的α亚基,从而使Gα亚基与Gβγ亚基分离,被激活的Gα亚基通过信号转导进一步参与细胞的生理过程。但是,最新研究发现GPCRs和G蛋白存在多种偶联关系,GPCRs不仅能够激活G... 传统观念认为,在激动剂作用下,G蛋白偶联受体(GPCRs)能够激活G蛋白的α亚基,从而使Gα亚基与Gβγ亚基分离,被激活的Gα亚基通过信号转导进一步参与细胞的生理过程。但是,最新研究发现GPCRs和G蛋白存在多种偶联关系,GPCRs不仅能够激活Gα亚基,还可以与Gβγ亚基相互靠近,甚至会使G蛋白亚基构象发生重排而不分离,这对于疾病发病机制的研究及新的药物靶点的发现具有重要意义。就GPCRs与G蛋白之间的相互作用以及最新研究技术作一简要综述。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体 G蛋白 荧光共振能量转移 生物发光共振能量转移 全内反射荧光显微镜
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原子力显微技术与其他生物技术的联用 被引量：1
6
作者 姜爽 王晓波 +1 位作者 袭荣刚 张英鸽 《生物技术通讯》 CAS 2011年第2期303-306,共4页
原子力显微技术(AFM)是一种高分辨率显微成像系统,与其他生物技术联用,使AFM在充分发挥自身优势的同时,建立新的研究方法,扩大其应用范围,是未来发展的重要方向。简要综述了AFM与其他显微技术、计算机模拟技术、蛋白质工程技术和质谱技... 原子力显微技术(AFM)是一种高分辨率显微成像系统,与其他生物技术联用,使AFM在充分发挥自身优势的同时,建立新的研究方法,扩大其应用范围,是未来发展的重要方向。简要综述了AFM与其他显微技术、计算机模拟技术、蛋白质工程技术和质谱技术等联用的进展。 展开更多
关键词 原子力显微镜 荧光共焦显微术 全内反射荧光显微镜 计算机模拟 纳米操纵 蛋白质工程 质谱技术
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应用全反射荧光显微镜对MIN6细胞分泌过程的动态研究
7
作者 周建平 李昱骥 +1 位作者 李继光 寺川进 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期216-218,共3页
目的 :通过追踪胰腺 β细胞株MIN6细胞内单个分泌囊泡的运动轨迹研究胰岛素的动态分泌过程和影响因素。方法 :应用吖啶橙转染MIN6细胞 ,通过全反射荧光显微镜观察细胞膜和靠近胞膜 80nm区域内的单个囊泡运动的动态过程。结果 :在高浓度... 目的 :通过追踪胰腺 β细胞株MIN6细胞内单个分泌囊泡的运动轨迹研究胰岛素的动态分泌过程和影响因素。方法 :应用吖啶橙转染MIN6细胞 ,通过全反射荧光显微镜观察细胞膜和靠近胞膜 80nm区域内的单个囊泡运动的动态过程。结果 :在高浓度氯化钾刺激下 ,附着在细胞膜的分泌囊泡发生融合和释放 ,此分泌过程大约在1min达到高峰 ,并可持续到 4～ 5min。在高浓度葡萄糖激发下 ,前 1～ 2min主要由原来附着在细胞膜的分泌囊泡融合和释放 ,5～ 6min以后由新融合的囊泡分泌。结论 :在高浓度氯化钾刺激下 ,主要引发第一相分泌 ,在高浓度葡萄糖的刺激下 。 展开更多
关键词 胰腺细胞 分泌 全反射荧光显微镜 MIN6细胞
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基于全内反射荧光显微镜的单个心肌细胞内钙信号斑图的介观表征 被引量：1
8
作者 白永强 朱星 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期672-675,共4页
利用基于近场光学原理组建的全内反射荧光显微镜研究单个大鼠心肌细胞内钙离子信号的斑图.结果表明:存在于盖玻片表面约100nm区域的隐失场可较好地照射活体细胞,并能清晰地显示胞内信号;心肌细胞内钙信号包括钙火花、钙靶波、钙平面波... 利用基于近场光学原理组建的全内反射荧光显微镜研究单个大鼠心肌细胞内钙离子信号的斑图.结果表明:存在于盖玻片表面约100nm区域的隐失场可较好地照射活体细胞,并能清晰地显示胞内信号;心肌细胞内钙信号包括钙火花、钙靶波、钙平面波和钙螺旋波等形式,钙信号各形式间存在相互作用;在钙诱导钙释放机制作用下,心肌细胞具有较强的可激发特性. 展开更多
关键词 全内反射荧光显微镜 钙火花 钙螺旋波 钙诱导钙释放 可激发特性
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