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半枝莲总黄酮调控RIP1/RIP3通路减轻急性脑梗死缺血再灌注大鼠大脑皮层神经元的损伤 被引量:11
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作者 张立波 姚袁媛 +1 位作者 王清勇 刘雯 《中医学报》 CAS 2020年第7期1476-1484,共9页
目的:分析半枝莲总黄酮通过调控受体相互作用蛋白激酶-1(receptor interaction protein kinase-1,RIP1)/受体相互作用蛋白激酶-3(receptor interaction protein kinase-3,RIP3)通路减轻急性脑梗死缺血再灌注大鼠大脑皮层神经元损伤的机... 目的:分析半枝莲总黄酮通过调控受体相互作用蛋白激酶-1(receptor interaction protein kinase-1,RIP1)/受体相互作用蛋白激酶-3(receptor interaction protein kinase-3,RIP3)通路减轻急性脑梗死缺血再灌注大鼠大脑皮层神经元损伤的机制。方法:从48只SPF级SD大鼠中随机挑出40只建立大鼠中脑动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,剩余8只记为阴性对照组。将MCAO建模成功的大鼠随机分为模型组,阳性对照组,半枝莲总黄酮高剂量组、中剂量组、低剂量组。阳性对照组以30 mg·kg^-1尼莫地平溶于2 mL生理盐水中灌胃;半枝莲总黄酮高剂量组、中剂量组、低剂量组分别使用200 mg·kg^-1、100 mg·kg^-1、50 mg·kg^-1半枝莲总黄酮溶于2 mL生理盐水中灌胃;模型组和阴性对照组使用2 mL生理盐水灌胃,每天1次,连续给药10 d。给药前后分别使用Longa评分标准对大鼠神经功能进行评分;治疗前后分别通过酶联免疫吸附实验检测血清白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-6水平。断头法处死大鼠后,取模型大鼠大脑皮层梗死部位组织和阴性对照组大鼠大脑皮层相同部位组织,通过脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法观察大脑皮层神经细胞凋亡情况;采用HE染色观察大脑皮层组织病理变化;使用RT-qPCR检测大脑皮层组织中RIP1、RIP3和MLKL mRNA相对表达量;通过蛋白免疫印记法检测大脑皮层组织RIP1、RIP3和MLKL蛋白表达量及p-RIP1、p-RIP3、p-MLKL水平。结果:神经功能评分比较显示:模型组,阳性对照组和半枝莲总黄酮不同剂量组均低于治疗前(P<0.05)。给药后,模型组高于阴性对照组(P<0.05),阳性对照组和半枝莲总黄酮高剂量组、中剂量组、低剂量组低于模型组(P<0.05),半枝莲总黄酮高剂量组和中剂量组低于阳性对照组和半枝莲总黄酮低剂量组(P<0.05),半枝莲总黄酮高� 展开更多
关键词 半枝莲总黄酮 急性脑梗死缺血再灌注 受体相互作用蛋白激酶 神经元损伤 大鼠
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基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨半枝莲总黄酮对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能和氧化应激损伤的影响 被引量:7
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作者 卜一 张硕 +3 位作者 钱旭东 王红梅 杨康梅 窦志杰 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第18期3440-3446,共7页
目的:基于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/哺乳动物的雷帕霉素(mTOR)信号通路探究半枝莲总黄酮对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠神经功能和氧化应激损伤的影响。方法:选取70只SPF级雄性SD大鼠,采用线栓法制备大脑中动脉... 目的:基于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/哺乳动物的雷帕霉素(mTOR)信号通路探究半枝莲总黄酮对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠神经功能和氧化应激损伤的影响。方法:选取70只SPF级雄性SD大鼠,采用线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,将造模成功的60只大鼠随机分为模型组、半枝莲总黄酮低剂量组(半枝莲L组)、半枝莲总黄酮中剂量组(半枝莲M组)、半枝莲总黄酮高剂量组(半枝莲H组)、control组、LY294002组,每组10只,剩余10只大鼠作为sham组。半枝莲L、M、H组分别给予半枝莲总黄酮0.1、0.2、0.4 g/kg溶于2 mL生理盐水灌胃,control组给予尼莫地平0.3 g/kg溶于2 mL生理盐水灌胃,LY294002组给予半枝莲总黄酮0.4 g/kg溶于2 mL生理盐水灌胃,同时侧脑室注射PI3K抑制剂LY29400220μmol/L,模型组和sham组给予等量的生理盐水灌胃。分别比较各组大鼠神经功能评分、脑组织积水量、脑梗死体积、脑组织病理学变化、脑组织氧化应激水平、脑组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达。结果:各组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑梗死体积、丙二醛(MDA)水平比较,模型组明显高于sham组,半枝莲L、M、H组、control组均低于模型组,且半枝莲H组优于半枝莲L、M组,但LY294002组高于半枝莲H组(P<0.05);各组大鼠超氧化物岐化酶(SOD)水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达比较,模型组明显低于sham组,半枝莲L、M、H组、control组均高于模型组,且半枝莲H组优于半枝莲L、M组,但LY294002组低于半枝莲H组(P<0.05)。结论:半枝莲总黄酮可能通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路发挥对CIRI大鼠神经功能和氧化应激损伤的改善作用,且高剂量半枝莲总黄酮的改善作用最显著。 展开更多
关键词 PI3K/Akt/mTOR信号通路 半枝莲总黄酮 脑缺血再灌注损伤 神经功能 氧化应激
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TFESB调控lncRNA LINC00858/miR-324-5p通路抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭 被引量:1
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作者 徐蕾 王珊珊 陈琳 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第1期38-44,共7页
目的:探讨半枝莲总黄酮提取物(total flavonoids extract from Scutellaria barbata D.Don,TFESB)调控长链非编码RNA(lncRNA)LINC00858/miR-324-5p通路对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:qRT-PCR检测20例宫颈癌组织和... 目的:探讨半枝莲总黄酮提取物(total flavonoids extract from Scutellaria barbata D.Don,TFESB)调控长链非编码RNA(lncRNA)LINC00858/miR-324-5p通路对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:qRT-PCR检测20例宫颈癌组织和与其对应的癌旁组织中LINC00858和miR-324-5p的表达水平。以宫颈癌SiHa细胞为研究对象,将SiHa细胞随机分为Con组、TFESB处理组、si-NC组、si-LINC00858组、miR-NC组、miR-324-5p组、TFESB+pcDNA组和TFESB+pcDNA-LINC00858组。qRT-PCR检测各组细胞中LINC00858和miR-324-5p的表达水平。细胞计数(CCK-8)试剂盒检测细胞增殖活力。Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。Western blot检测增殖相关蛋白(CyclinD1、p21)和迁移侵袭相关蛋白(MMP-2、MMP-9)的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证LINC00858和miR-324-5p的靶向调控关系。结果:与癌旁组织相比,宫颈癌组织中LINC00858的表达水平显著升高,miR-324-5p的表达水平显著降低。与Con组比较,TFESB处理组SiHa细胞LINC00858的表达水平显著降低,miR-324-5p的表达水平显著升高,细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著降低,并呈显著的浓度依赖性;与si-NC组比较,si-LINC00858组SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著降低;与miR-NC组比较,miR-324-5p组SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著降低;与TFESB+pcDNA组比较,TFESB+pcDNA-LINC00858组SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著提高。结论:半枝莲总黄酮提取物可抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制与调控lncRNA LINC00858/miR-324-5p通路有关。 展开更多
关键词 半枝莲总黄酮提取物 LINC00858 miR-324-5p 宫颈癌 增殖 侵袭 迁移
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