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番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白基因dsRNA载体的构建及其表达
被引量:
2
1
作者
唐前君
肖启明
+4 位作者
刘勇
李基光
谢丙炎
谭新球
张德咏
《湖南农业科学》
2010年第7期99-101,共3页
将中国番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)外壳蛋白基因(coat protein,CP)同源的部分片段双链RNA重组至植物表达载体pBIN19,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株LBA4404导入本氏烟(Nicotianaben...
将中国番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)外壳蛋白基因(coat protein,CP)同源的部分片段双链RNA重组至植物表达载体pBIN19,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株LBA4404导入本氏烟(Nicotianabenthamiana)。PCR筛选表明,目的片段已整合至转基因植株的基因组DNA中,引起与其同源的基因发生沉默,从而可抑制病毒复制,达到抗该病毒的目的,为防治这类病毒病害提供了新的可能。
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关键词
中国番茄黄花曲叶病毒
DSRNA
植物表达载体
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职称材料
中国番茄黄化曲叶病毒编码的RNA沉默抑制子AC4蛋白的核酸结合特性
2
作者
张馨月
章颉
+1 位作者
邓凤林
吴建祥
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期85-90,共6页
农杆菌共浸润试验结果表明:中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)Y10分离物编码AC4蛋白是RNA沉默抑制子。为了研究RNA沉默抑制子AC4蛋白的作用机制,将TYLCCNV-Y10的AC4基因插入到原核表达载体pET-32a的...
农杆菌共浸润试验结果表明:中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)Y10分离物编码AC4蛋白是RNA沉默抑制子。为了研究RNA沉默抑制子AC4蛋白的作用机制,将TYLCCNV-Y10的AC4基因插入到原核表达载体pET-32a的多克隆位点上,构建重组原核表达载体pET32a-Y10AC4。将重组载体导入BL21(DE3)pLysS进行AC4蛋白表达,并在自然条件下纯化蛋白。利用原核表达的AC4蛋白进行电泳迁移率变动试验(electrophoretic mobilityshift assay,EMSA),分析AC4蛋白分别与单、双链siRNA和单、双链长RNA的结合情况。试验结果表明:TYLCCNV-Y10编码的AC4蛋白具有结合单链siRNA和单链长RNA特性,而不与双链siRNA和双链长RNA结合。
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关键词
中国番茄黄化曲叶病毒
AC4蛋白
原核表达
电泳迁移率变动试验
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职称材料
题名
番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白基因dsRNA载体的构建及其表达
被引量:
2
1
作者
唐前君
肖启明
刘勇
李基光
谢丙炎
谭新球
张德咏
机构
湖南农业大学生物安全科技学院
湖南省植物保护研究所
中国农科院蔬菜花卉研究所
出处
《湖南农业科学》
2010年第7期99-101,共3页
基金
国家"863"计划(2008AA10Z407)
湖南省杰出青年基金(08JJ1004)
国家自然科学基金(30871619)
文摘
将中国番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)外壳蛋白基因(coat protein,CP)同源的部分片段双链RNA重组至植物表达载体pBIN19,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株LBA4404导入本氏烟(Nicotianabenthamiana)。PCR筛选表明,目的片段已整合至转基因植株的基因组DNA中,引起与其同源的基因发生沉默,从而可抑制病毒复制,达到抗该病毒的目的,为防治这类病毒病害提供了新的可能。
关键词
中国番茄黄花曲叶病毒
DSRNA
植物表达载体
Keywords
tomato
yellow
leaf
curl
china
virus
(
tylccnv
)
dsRNA
plant
expression
vector
分类号
S436.412.11 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
中国番茄黄化曲叶病毒编码的RNA沉默抑制子AC4蛋白的核酸结合特性
2
作者
张馨月
章颉
邓凤林
吴建祥
机构
浙江大学农业与生物技术学院/生物技术研究所
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期85-90,共6页
基金
国家自然科学基金项目(30670087)
国家自然科学基金重点项目(30530520)
文摘
农杆菌共浸润试验结果表明:中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)Y10分离物编码AC4蛋白是RNA沉默抑制子。为了研究RNA沉默抑制子AC4蛋白的作用机制,将TYLCCNV-Y10的AC4基因插入到原核表达载体pET-32a的多克隆位点上,构建重组原核表达载体pET32a-Y10AC4。将重组载体导入BL21(DE3)pLysS进行AC4蛋白表达,并在自然条件下纯化蛋白。利用原核表达的AC4蛋白进行电泳迁移率变动试验(electrophoretic mobilityshift assay,EMSA),分析AC4蛋白分别与单、双链siRNA和单、双链长RNA的结合情况。试验结果表明:TYLCCNV-Y10编码的AC4蛋白具有结合单链siRNA和单链长RNA特性,而不与双链siRNA和双链长RNA结合。
关键词
中国番茄黄化曲叶病毒
AC4蛋白
原核表达
电泳迁移率变动试验
Keywords
tomato
yellow
leaf
curl
china
virus
(
tylccnv
)
AC4
protein
prokaryotic
expression
electrophoretic
mobility
shift
assay
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S432.4 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白基因dsRNA载体的构建及其表达
唐前君
肖启明
刘勇
李基光
谢丙炎
谭新球
张德咏
《湖南农业科学》
2010
2
下载PDF
职称材料
2
中国番茄黄化曲叶病毒编码的RNA沉默抑制子AC4蛋白的核酸结合特性
张馨月
章颉
邓凤林
吴建祥
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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