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基于纳米材料提取肝细胞癌患者血浆外泌体的研究 被引量：2
1
作者 纪文静 白洁 包永星 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2020年第4期450-455,共6页
目的建立一种快速、高效提取肿瘤患者血浆外泌体的新方法。方法采用ExoQuick新型纳米材料分离外泌体,考马斯亮蓝染色进行蛋白定量,透射电子显微镜观察外泌体的形态。蛋白质印迹法分析外泌体标记和肝细胞癌相关蛋白。结果以纳米材料为基... 目的建立一种快速、高效提取肿瘤患者血浆外泌体的新方法。方法采用ExoQuick新型纳米材料分离外泌体,考马斯亮蓝染色进行蛋白定量,透射电子显微镜观察外泌体的形态。蛋白质印迹法分析外泌体标记和肝细胞癌相关蛋白。结果以纳米材料为基础的新提取方法分离出的胞外泌体直径为30~100 nm,与传统方法分离的外泌体直径相似;蛋白浓度是传统方法提取的外泌体蛋白浓度的19倍;鉴定到典型的外泌体蛋白:跨膜蛋白CD63和热休克蛋白70(HSP70)。肝细胞癌患者外泌体中含有TGM2,而无膜联蛋白A2表达。结论基于纳米材料提取外泌体方法快速有效。肝癌相关蛋白TGM2可以通过外泌体介导的非经典分泌途径分泌,可能是一种有价值的肿瘤标志物。 展开更多
关键词 外泌体 纳米材料 组织转谷氨酰胺酶2 膜联蛋白A2
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TG2基因修饰的鼻粘膜间充质干细胞向神经样细胞分化的研究 被引量：2
2
作者 崔学文 史文涛 +5 位作者 戴瑶 毕士奇 杨开元 陈平波 孙勇 张志坚 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期297-304,共8页
目的:研究重组transglutaminase 2(TG2)腺病毒转染对鼻粘膜骨髓间充质干细胞(EMSCs)向神经样细胞分化影响。方法:利用贴壁筛选法分离培养和扩增EMSCs,通过免疫荧光方法分析EMSCs的纯度,采用免疫荧光和免疫印迹方法测定转染效率。实验分... 目的:研究重组transglutaminase 2(TG2)腺病毒转染对鼻粘膜骨髓间充质干细胞(EMSCs)向神经样细胞分化影响。方法:利用贴壁筛选法分离培养和扩增EMSCs,通过免疫荧光方法分析EMSCs的纯度,采用免疫荧光和免疫印迹方法测定转染效率。实验分组:重组TG2腺病毒转染EMSCs(ad EMSCs)组、重组GFP腺病毒转染EMSCs组(GFP-EMSCs)和空白对照组(control),诱导细胞向神经样细胞分化,倒置显微镜观察分化过程中细胞形态的变化。免疫荧光和免疫印迹方法检测诱导后EMSCs的轴突膜蛋白(GAP-43),微管相关蛋白(MAP2)和髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达情况。向大鼠脊髓内注射ad EMSCs,2周后取脊髓。结果:实验数据表明转染TG2腺病毒的EMSCs可稳定表达TG2。诱导7 d后,ad EMSCs组细胞呈现双极和多极的典型神经样细胞形态,并且GAP-43,MAP2和MBP的表达水平较对照组高。移植入体内2周的ad EMSCs存活良好且部分细胞表达GAP-43。结论:TG2基因修饰有利于EMSCs在体外向神经样细胞分化,并且具有良好的可移植性。 展开更多
关键词 鼻粘膜 间充质干细胞 组织型谷胺酰氨转胺酶 神经样细胞
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TG2对大鼠鼻粘膜间充质干细胞体外的影响
3
作者 阙云端 卞璐 +4 位作者 吕德民 史文涛 崔学文 王东明 张志坚 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期1591-1595,共5页
[目的]探讨组织型谷胺酰氨转胺酶2(TG2)对大鼠鼻粘膜来源的间充质干细胞体外增殖以及定向成骨分化的影响。[方法]体外分离培养大鼠鼻粘膜间充质干细胞,采用MTT和免疫荧光法检测不同浓度的TG2对大鼠鼻粘膜间充质干细胞增殖能力的影响。... [目的]探讨组织型谷胺酰氨转胺酶2(TG2)对大鼠鼻粘膜来源的间充质干细胞体外增殖以及定向成骨分化的影响。[方法]体外分离培养大鼠鼻粘膜间充质干细胞,采用MTT和免疫荧光法检测不同浓度的TG2对大鼠鼻粘膜间充质干细胞增殖能力的影响。通过茜素红染色、碱性磷酸酶染色、蛋白质印迹法和免疫荧光观察TG2对大鼠鼻粘膜间充质干细胞体外成骨分化能力的影响。[结果]谷胺酰氨转胺酶2能促进鼻粘膜间充质干细胞增殖(P<0.05),并能提高ALP活性(P<0.05),同时增强矿化钙结节形成能力,并对成骨相关标记蛋白COL I和OCN的表达具有上调作用。[结论]谷胺酰氨转胺酶2可提高大鼠鼻粘膜来源的间充质干细胞的增殖能力以及其向成骨细胞分化的潜能。 展开更多
关键词 组织型谷氨酰胺转氨酶(TG-2) 外胚间充质干细胞 细胞增殖 成骨分化
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组织转谷氨酰胺酶2对乙型肝炎相关性肝细胞癌进展的影响 被引量：3
4
作者 王玉萍 张娟 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第20期4999-5001,共3页
目的探讨组织转谷氨酰胺酶(TGM) 2表达对乙型肝炎相关性肝细胞癌(HCC)进展的影响。方法选择乙型肝炎相关的HCC患者,按照TNM分期分为Ⅰ～Ⅳ期,同时对HCC癌细胞株进行培养,进行基因芯片分析及Western印迹分析TGM2基因及蛋白的表达及其与HC... 目的探讨组织转谷氨酰胺酶(TGM) 2表达对乙型肝炎相关性肝细胞癌(HCC)进展的影响。方法选择乙型肝炎相关的HCC患者,按照TNM分期分为Ⅰ～Ⅳ期,同时对HCC癌细胞株进行培养,进行基因芯片分析及Western印迹分析TGM2基因及蛋白的表达及其与HCC分期之间的相关关系,最终使用胱胺竞争性抑制TGM2作用通路,探究其对细胞凋亡的作用。结果微阵列分析结果显示与Ⅰ期HCC相比,Ⅳ期时TGM2的基因表达显著升高(P<0. 05);免疫染色分析显示TGM2的大量表达主要见于HCCⅢ期及Ⅳ期,显著高于Ⅰ～Ⅱ期肿瘤组织水平(P<0. 05);使用胱胺后48 h后HCC细胞的存活率下降至最大值的36. 5%左右,其可使caspase-3的活化降低1. 5倍,其最终导致磷酸化的AKT表达显著减少,诱导细胞凋亡。结论乙型肝炎病毒相关的HCC中TGM2的表达水平与肿瘤的侵袭性及分期相关,通过竞争抑制TGM2的作用通路可促使肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 组织转谷氨酰胺酶2 乙型肝炎 肝细胞癌
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